Leprosy

1- Studies on risk of leprosy relapses in China: relapses after treatment with dapsone monotherapy

Xiang-Sheng Chen; Wen-Zhong Li; Cheng Jiang; Gan-Yun Ye

Based upon the data from the Chinese National System for Leprosy Surveillance,this paper reports on the relapses in 297,343 leprosy patients [multibacillary (MB) 106,518, paucibacillary (PB) 190,825] cured by dapsone monotherapy. A total of 11,055 (MB 8675, PB 2380) patients relapsed during an accumulated follow-up period of 4,229,050 patient-years (PY), givingan overall relapse rate of 3.72 per 100 casesor 2.61 per 1000 PY, i.e., 8.14% or 5.91 per 1000 PY over an average follow-up period of 13.8 ± 8.4 years in MB patients and 1.25% or 0.86 per 1000 PY over an averageperiod of 14.5 ± 8.9 years in PB patients. For either the overall relapse rate per 100 cases or per 1000 PY, the differences between MB and PB patients were statistically significant, except during 36-40 years of follow up. For both MB and PB patients,the relapse rates showed consistently significant decreases year by year, particularly in PB patients whose relapse rate per 1000 PY was 1.21 in year 10 of follow up; whereas it remained more than 10 per 1000 PY in MB patients. In view of that, the overall relapserates in MB and PB patients cured by dapsone monotherapy were acceptably low,and most of these patients have been followed up for more than a mean incubation period of observed dapsone relapse. Along with the further extension of follow up, therisk of relapse in dapsone-cured patients will not be expected to increase. This conclusion should be considered when planning policy for the management of patients released front dapsone monotherapy.

Cet article, basé sur les données provenant du Systeme National Chinois de Surveillance de la Lèpre, décrit les rechutes chez 297 343 patients atteints de lèpre [106 518 multibacillaire (MB). 190 825 paucibacillaire (PB)] et soignés par monothérapie à la dapsone. Un total de 11 055 (8675 MB et 2380 PB) ont rechuté duram une période cumulée de 4 229 050 personnes-par-année (PPA), donant un taux de rechuteglobal de 3,72 cas pour 100 patients (3,72%) ou 2,61 pour 1000 PPA et, plus précisément, 8,14% ou 5,91 pour 1000 PPA sur une période de suivi ale 13,8 ± 8.4 années chez les patients MB et 1,25% ou 0,86 pour 10000 PPA sur une période de suivi de 14,5 ± 8.9 années chez les patients PB. Que ce soit le taux global pour 100 cas ou celui pour 1000 PPA, les différences entrepatients MB et PB étaient statistiquement significatives. à 1'exception eles cas ayant 36-40 années de suivi. Les taux de rechute pour les patients à la fois MB et PB montrérent une dintinution d'incidence aucours du temps, ein particulier chez les patients PB dont le taux de rechute pour 1000 PPA était de 1,21 à10 ans de suivi; Tandis qu'il est resté à plus de 10 pour 1000 PPA pour les patients MB. Au vu de ces résultats, la proportion globale de rechute chez les patients MB et P11 traités par monothérapie est restée à des taux bas acceptahles, et la plupart des patients ont été suivi sur une période supérieure à celle de la période moyenne d'incubation des rechutes après traitement par la dapsone. Concomitant avec l'extension de lapériode de suivi, le risque de rechute chez les patients ne devrait pas augmenter. Cate conclusion devrait être prise cn considération lorsque des décisions sur les mesures à prendre pour gérer les patients après monolhérapie à la dapsone.

Con base en los datos del Sistema Nacional Chino para la Vigilancia de Ia Lepra, en este articulo se reportan las recaídas en 297,343 pacientes con lepra (106, 518 mutibacilares, MB, y 190, 825 paucihacilares. PB), curados con monoterapia con dapsona. Un total de 11,055 pacientes (8675 MB y 2380PB) recayeron durante un periodo de seguimiento acu-mulado de 4,229,050 paciente afios (PA), dando una tasa de recaida global de 3.72 por 100 casos ó 2.61 por1000 PA, i.e., 8.14% ó 5.91 por 1000 PA, en un periodo de seguimiento promedio de 13.8 ± 8.4 afios años en los pacientes MB, y 1.25% 6 0.86 por 1000 PA en un periodo de seguimiento promedio de 14.5 ± 8.9 años en los pacientes PB. Las tasas globales de recaida por 100 casos 6 por 1000 PA fueron estatisticamente diferentes entre los pacientes MB y PB, excepto para el periodo de 36-40 años de seguimiento. Tanto para los pacientes MB como para los PB, las tasas de recaída mostraran decrementos consistentemente significantes año tras año, particularmente en los pacientes PB, cuya tasa de recaída por 1000 PA fue de 1.21 en el año 10 del seguimiento, mientras que ésta permaneció mayor de 10 por 1000 PA en los pacientes MB. La tasa global de recaída en los pacientes MB y PB curados con monoterapia con dapsona ha sido aceptablemente baja : la mayoria de los pacientes han estado vigilaelos durante un periodo mayor al tiempo de incubacion promédio de las recaídas observadas en los pacientes tratados con dapsona. No obstante la extensión del tiempo de seguimiento, no se espera que el riesgo de recaída aumente en los pacientes curados con dapsona. Esta conclusion debe ser considerada cuando se planeen las estrategias para el manejo de los pacientes tratados con monoterapia con dapsona.

2- Studies on risk of leprosy relapses in China: relapses after treatment with multidrug therapy

Xiang-Sheng Chen; Wen-Zhong Li; Cheng Jiang; Gan-Yun Ye

Based upon the data from the Chinese National System for Leprosy Surveillance, this paper reports on the relapses in 47,276 leprosy patients cured by or released from WHO-recommended multidrug therapy (WHO/MDT). The overall relapse rate was 0.73/1000 patient-years (PY). There was a statistically significant difference in the relapse rates of WHO/MDT-MB (0.61/1000 PY) and WHO/MDT-PB (1.04/1000 PY) (χ² = 15.7, p <0.01) patients. For multibacillary (MB) patients, the relapse rate in patients treated with fixed-duration MDT (0.56/1000 PY) was comparable with that in patients treated with MDT until skinsmear negativity (0.73/1000 PY (χ² = 2.20, p >0.05). Our present study suggests that fixed-duration MDT is a cost-effective regimen for the treatment of leprosy in China. The present results also show that relapse of leprosy is acceptably low and has not yet become a serious clinical or public health problem but, based upon the incubation of relapse in MDT patients, it is necessary to encourage annual follow up for at least 5 years for paucibacillary (PB) and 10 years for MB patients after being released from WHO/MDT.

Cet article, basé sur les données provenant du Systéme National Chinois de Surveillance de la Lépre, décrit les rechutes chez 47 276 patients atteints de lépre et soignés par ou ayant terminé leur polychimiothérapie (PCT). Le taux de rechute global était de 0.73/1000 personnes-par-année (PPA). Une différence Statistiquement significative fut trouvée parmi les taux de rechutes observés chez les patients multibacillaires (MB)-PCT (0.61/1000 PPA) et paucibacillaires (PB)-PCT (1.04/1000 PPA) (χ² = 15.7. p <0.01 ). Le taux de rechute parmi les patients MB traités par la PCT á durée pré-déterminée (0,56/1000 PPA) était voisin de celui rencontré chez les patients MB traités jusqu'á ce que l'examen du suc dermique soit négatif (0,7.3/1000 PPA) (χ² = 2.20, p >0.05). L'étude présentée ici suggére que la PCT á durée pré-déterminée présente un bon rapport coût-efficacité pour le traitement de la lépre en Chine. Cette étude montre également que les rechutes de lépre restent dans les limites de l'acceptable et ne sont pas encore devenues un probléme clinique sérieux ou de santé publique. Cependant, basé sur les temps d'incubation et de rechute des patients sous PCT. il est nécessaire d'encourager le suivi clinique annuel pour au moins 5 ans chez, les patients PB. et 10 ans chez, les patients MB, aprés l'arrêt du traitement de PCT.

Basados en los datos del Sistema Nacional Chino para la Vigilancia de la Lepra, este articulo reporta la lasa de recaida en 47.276 pacientes con lepra curados con poliquimioterapia (PQT). La tasa global de recaida fue de 0.73/1000 pacient-años (PA). Hubo una diferencia estadisticamente significativa en las tasas de recañda entre los pacientes MDT-MB (0.61/1000 PA) y MDT-PB (1.04/1000 PA) (χ² = 15.7, p <0.01). Para Los pacientes multibacilares (MB), la tasa de recaida en los pacientes tratados con PQT de duracion fija (0.56/1000 PA) fue comparable con aquella de los pacientes tratados con PQT hasta su negatividad bacilar en piel (0.73/1000 PA) (χ²=2.20, p >0.05). Nuestros resultados sugieren que la PQT de duraciin lija es una terapia costo-efectiva para el tratamiento de la lepra en China. Los resultados también muestran que la tasa de recaida de la lepra es aceptablemente baja y no ha llegado a ser un serio problema clñnico o de salud publica, aunque tomando en cuenta la incubaciin de las recañdas en los pacientes PQT. es recomendable mantener el seguimiento anual de los pacientes cuando menos duratne 5 años para los pacientes PB y hasta por 10 años para los pacientes MB.

3- Hypopigmented face patches; their distribution and relevance to ocular complications in leprosy

Ebenezer Daniel; Ramaswamy Premkumar; Sheena Koshy; Paramanandam Yowan; Nisha Kurian; Timothy J. ffytche

Eighty-two leprosy patients with hypopigmented patches over the face (cases) and an equal number of age-, sex-, and classification-matched leprosy patients without any hypopigmented patches over the face (controls) were examined for the distribution of hypopigmented facial patches, areas of anesthesia over the face, and eye complications. The hypopigmented patches did not follow any pattern and overlapped in the areas of sensation supplied by the three branches of the trigeminal nerve. Anesthesia over the face, evaluated by a Semmes-Weinstein monofilament which exerted a force of 0.05 grams, was present in 19.5% of the cases and 15.9% of the controls. Patients with hypopigmented facial patches were found to have more corneal hypoesthesia than patients who did not have hypopigmented facial patches. The risk of having impaired corneal sensation was three to four times higher in patients with hypopigmented facial patches. This feature can be used to identify decreased corneal sensation among leprosy patients under field conditions where direct estimation of corneal sensation is not advocated

Quatre vingt deux patients atteints de lèpre présentant des aires hypopigmentées sur la figure (cas) et un nombre identique de patients hanséniens contrôlés en ce qui concerne l'âge, le genre et la classification (contrôles) furent examinés pour la distribution des plaques hypopigmentées faciales, les aires anesthésiées sur la ligure et les complications oculaires. Les plaques hypopigmentées ne suivaient pas d'aires définies et se chevauchaient dans les aires de sensibilité des trois branches du nerf trijumeau. L'anesthésie faciale, évaluée par le filament de Semmes-Weinstein qui exerçait une force de 0,05 grammes, était présente chez 19.5% des cas et 15.9% des contrôles. Les patients présentant des plaques hypopigmentées avaient plus d'hypoesthésies de la cornée que les patients sans plaques hypopigmentées faciales. Le risque d'avoir une diminution de la sensitivité de la cornée étaient trois à quatre fois plus élevée chez les patients présentant des plaques hypopigmentées faciales. Cette caractéristique peut être utilisée pour identifier une baisse de sensitivité de la cornée parmi les patients hanséniens dans les conditions du terrain où l'estimation directe de la sensitivité cornéenne n'est pas pronée possible.

Un grupo de 82 pacientes con lepra, con manchas hipopigmentadas sobre la cara (casos), y un número igual de pacientes sin ninguna hipopigmentatición facial (controles), se examinaron para establecer la distribución de las áreas de anestesia en la cara y la frecuencia de complicaciones oculares. Las manchas hipopigmentadas no siguieron ningún patrón y se sobrepusieron en las áreas de sensación innervadas porlas tres ramas del nervio trigémino. La anestesia sobre la cara, evaluada con un monotilamento de Semmes-Weinstein que ejerce una fuerza de 0.05 gramos, estuvo presente en el 19.5% de los casos y en el 15.9% de los controles. Los pacientes con manchas faciales hipopigmentadas presentaron más hipoanestesia de la córnea, que los pacientes sin hipopigmentación en la cara. El riesgo de presentar alguna alteración en la sensación de la córnea fue 3 a 4 vexes mayor en los pacientes con manchas hipopigmentadas. Esta caracteristica puede usarse para identificar aquellos pacientescon disminución en la sensación corneal bajo condiciones de campo, donde no es posible hacer mediciones directas.

4- Isolation, characterization, molecular cloning and amplification of a species-specific M. leprae antigen

Carlos Y. Soto; Pedro A. Moreno; James T. Valencia; Maria M. Bernal; Fanny Guzman, Manuel E. Patarroyo; Luis A. Murillo

A polyclonal serum sample f rom a lepromatous leprosy (LL) patient, which presented a specific recognition pattern for leprosin, was used to screen a Mycobacterium leprae genomic library constructed with DNA isolated f rom human lepromas. One clone, designated ML4-I, which expressed a specific antigenic determinant of M. leprae as part of a (β-galactosidase fusion protein, was isolated. The 1.932 bp M. leprae derived genomic fragment was sequenced, and it had an incomplete open-reading frame shown to code for a 644 amino-acid polypeptide (72.3 kDa). Some partial nucleotide homology to the M. tuberculosis MTCY9C4 cosmid and the M. leprae B1913 cosmid were found. Southern blot assays using the 584 bp Eco RI-Bam HI fragment excised f rom the ML4-1 clone revealed that this sequence is present only in the M. leprae genome and not in the 24 different mycobacterial DNA tested. Two oligonucleotides based on the genomic sequence were also synthesized and used as amplifiers for a polymerase chain reaction (PCR) test, giving a positive signal exclusively in M. leprae DNA. Furthermore, 32 sequential synthetic peptides, 20 aminoacids long, spanning the entire protein corresponding to the hypothetical ML4-I clone sequence, were synthesized and evaluated by ELISA. A peptide included in the 221-240 region was significantly recognized by either lepromatous leprosy or healthy tuberculosis contact patient sera. Thus, PCR amplification of this fragment, along with the récognition of its protein séquence by leprosy patient sera, could be a useful tool for a potential diagnostic method in the détection of M. leprae infection in the future.

Un échantillon de sérum polyclonal provenant d'un patient souffrant de lèpre lépromateuse et qui exhibait une reaction spécifique à la léprosine, fut utilisé pour tester une bibliothèque génomique construite à partir d'ADN provenant de lépromes humains. Il fut isolé un clone, appelé ML4-1, qui exprimait un déterminant antigénique spécifique de M. leprae fusionné à une protéine de (β-galactosidase. Le fragment de génome dérivé de M. leprae, mesurant 1932 paires de bases, fut séquence: il montrait un cadre de lecture ouvert incomplet codant un polypeptide de 644 acides aminés (72.3 kilodaltons). Une homologie partielle de séquence fut trouvée avec le cosmide MTCY9C4 dérivé de M. tuberculosis et le cosmide B1913 dérivé de M. leprae. Une analyse par Southern blot, utilisant un fragment de ML4-1 mesurant 584 paires de bases, obtenu par digestion avec les enzymes de restriction Eco Rl et Bam HI, a démontré que cette séquence n'était rencontrée que dans le génome de M. leprae et non pas dans l'ADN de 24 autres mycobactéries testées. Deux oligonucleotides furent également synthétisés et utilisés pour amplifier le fragment ML4-1, par la réaction de polymerase en chaîne (PCR), ne donnant un résultat positif qu'en présence d'ADN de M. leprae. De plus, 32 oligopeptides artificiels de 20 acides aminés de long, qui mis bout à bout représentent la protéine hypothétique correspondant à la séquence du clone ML4-1, furent synthétisés et évalués par ELISA. Un peptide, inclu dans la région 221-240 de la protéine hypothétique, fut significativement reconnu par les sérums issus de patients lépromateux ou des personnes en contact avec des patients tuberculeux. Ainsi, l'amplification par PCR de ce fragment génomique et la reconnaissance par le sérum de patients atteints de lèpre de sa fraction protéique correspondante, pourrait être un outils intéressant et une méthode diagnostique potentielle pour la future détection de l'infection par M. leprae.

Se utilizóun suero policlonal de un paciente con lepra lepromatosa (LL) con un patrón de reconocimiento especifico de la leprosina, para analizar una biblioteca genómica de Mycobacterium leprae construida con el DNA aislado de lepromas humanos. Se aisló una clona, designada ML4-1, la cual expresóun determinante antigénico específico de M. leprae como parte de una proteina de fusión con beta-galactosidasa. El fragmento genómico secuenciado de 1.932 pares de bases (pb) de M. leprae tuvo un marco de lectura abierto incompleto que codificó para un polipéptido de 644 aminoácidos (72.3 kDa) y mostró homologías parciales con las secuencias de los cósmidos MTCY9C4 de M. tuberculosis y B1913 de M. leprae. Los análisis de Southern blot usando el fragmento de 584 pb Eco RI-Bam HI obtenido de la clona ML4-1 revelóque esta secuencia sólo está presente en el genoma de M. leprae y no en el DNA de 24 diferentes micobacterias probadas. También se sintetizaron dos oligonucleótidos basados en la secuencia genómica y se usaron como iniciadores en la prueba de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Sólo se obtuvo señal positiva con el DNA de M. leprae. Además, se sintetizaron 32 péptidos sintéticos secuenciales de 20 aminoácidos de logitud, que abarcaron la proteina completa correspondiente a la secuencia hipotética de la clona ML4-1. Estos péptidos fueron evaluados por ELISA. Un péptido incluido en la región 221-240 fue reconocido de manera significativa por los sueros de pacientes con lepra lepromatosa o tuberculosis per no por los sueros de contactos sanos. Asi, la amplificación por PCR de este fragmento y el reconocimiento de su secuencia proteica por los sueros de los pacientes con lepra, podrían servir como herramientas de diagnóstico para detectar la infección por M. leprae en el futuro.

5- HLA linked with leprosy in southern China; HLA-Linked resistance alleles to leprosy

Li-Man Wang; Akinori Kimura; Manatsu Satoh; Satoru Mineshita

According to the World Health Organization recommended multidrug therapy (WHO/MDT), we have carried out this study to investigate the presence of HLA linked susceptibility or resistance to leprosy in a southern Chinese population. Sixtynine leprosy patients and 112 healthy controls participated in the study. HLA-DR2 subtypes, HLA-B and MHC Class I chain related A (MICA) alleles were typed at the DNA level using the polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism method. The frequencies of HLA-DR2-DRB1 alleles did not show any significant differences between the patient and the control groups, suggesting that the disease susceptibility was not associated with the DR2 subtypes in this southern Chinese population. On the other hand, in the multibacillary (MB) patients significantly decreased allele frequencies of HLA-B46 (0.040 in MB patients vs 0.129 in controls) and MICA-A5 (0.200 vs 0.380) were observed compared with the healthy controls. The calculated relative risk (RR) for B46 was 0.28; for MICA-A5, 0.52. In addition, on haplotype analysis the frequency of the HLA-B46/MICA-A5 haplotype was significantly decreased in the MB patients compared to controls (0.060 vs 0.233, RR = 0.22, p<0.01).These results suggest that an HLAlinked disease-resistant gene to MB leprosy in southern China is in strong linkage disequilibrium with the HLA-B46/MICA-A5 haplotype. In other words, the resistant gene may be located near the HLA-B/MICA region and not in the HLA-DR locus.

En suivant les recommendations de l'Organisation Mondiale de la Santéen matière de polychimiotherapie (OMS/PCT). nous avons entrepris de déterminer si il existe un lien entre les antigènes leucocytaires humains (HLA) et la susceptibilitéà la lèpredans une population de Chine du sud. Soixante neuf patients lépreux et 112 contrôles en bonne santéont participéà l'étude. Les alíeles des sous-types de HLA-DR2. de HLA-B et des protéines A liées aux chaînes du complexe majeur d'histocompatibilitéde type I (MICA) furent typés en utilisant la méthode combinant le réaction de polymérase en chaîne couplée à une analyse du polymorphisme de conformation des chaînes simples d'ADN. Il n'a pas étéobservéde différence de fréquences des alíeles de HLA-DR2-DRBI entre le groupe des patients et le groupe des contrôles, suggérant qu'il n'y a pas d'association entre la suseptilitéà la maladie et les sous-types DR2 dans cette population de Chine du sud. Par contre, la fréquence des alíeles HLA-B46 et MICA-A5 était significativement diminuée chez les patients multibacillaires (MB), comparée aux contrôles en bonne santé(0,040 chez, les patients MB contre 0,129 chez les contrôles et 0.200 chez les patients MB contre 0.380 chez les contrôles, respectivement). Le risque relatif (RR) calculépour B46 était de 0.28: pour MICA-A5, il était de 0.52. De plus, l'analyse des haplotypes révèle une diminution significative de la fréquence de l'haplotype HLA-B46 / MICA-A5 chez, les patients MB comparée à celle des contrôles (0.060 contre 0.233, RR = 0.22; p <0.01 ). Ces résultats suggèrent que le gène de résistance à la maladie liéà HLA contre la lèpre multibacillaire de Chine méridionale est en fort déséquilibre de lien avec l'haplotype HLA-B46/MICA-A5. En d'autres termes, le gène de résistance pourrait être localiséproche de la région incluant HLA-B/MICA mais pas proche du locus HLA-DR.

De acuerdo a los resultados de la poliquimioterapia recomendada por la Organizacion Mundial de la Salud (PQT/OMS) hemos realizado este estudio para investigar la asociación entre el sistema HLA y la susceptibilidad o resistencia a la lepra en una población del sur de China. En el estudio participaron 69 pacientes con lepra y 112 controles sanos. Se tipificaron los subtipos de HLA-DR2. IILA-B y MHC clase IA (MICA) a nivel de DNA, usando un variante de la reacción en cadena de la DNA polimerasa. Las frecuencias de los alelos HLA-DR2-DRB1 no mostraron diferencias significativas entre los pacientes y el grupo control, sugiriendo que la susceptibilidad a la enfermedad no esta asociada a los subtipos de DR2 en est población del sur de China. Por otro lado, comparados con los controles sanos, los pacientes multibacilares (MB) mostraron frecuencias significativamente disminuidas de los alelos HLA-B46 (0.040 en MB vs 0.129 en los controles) y MICA-A5 (0.200 vs 0.380). El riesgo relativo (RR) calculado para B46 fue de 0.28 mientras que para MICA-A5 fue de 0.52. Además, la frecuencia del haplotipo HLA-B46/MICA-A5 estuvo significativamente disminuida en los pacientes MB (0.060 en MB vs 0.233 en los controles. RR = 0.22, p <0.0 1 ). Estos resultados sugieren que en la población del sur de China estudiada, un gene de resistencia a la enfermedad ligado a HLA está en fuerte desequilibrio de enlace con el haplotype. IILAB46/MICA-A5. En otras palabras, el gene de resistencia puede estar localizado cerca de la región HLA-B/MICA y no en el locus HLA-DR.

6- Histopathological activity in paucibacillary lepros y patients after ROM therapy

Gigi J. Ebenezer;Charles K. Job

Histopathological activity was assessed in the skin tissue of 13 skin-smear negative, borderline tuberculoid leprosy patients after administration of a single dose of ROM (rifampin 600 mg, ofloxacin 400 mg and minocycline 100 mg) therapy. Biopsies taken just before therapy showed Mycobacterium leprae to be present in eight cases. After 6 months, only three showed granulomatous lesions and others showed only resolving or inactive lesions. Acid-fast bacilli (AFB) persisted in the nerves of three cases. At the end of 12 months, granulomas persisted in 2 out of 13 (15%) patients. No bacilli, however, were detected in any of them at the end of 12 months. This study demonstrated that 12 months after a single dose of ROM granuloma cleared in 85% of the patients and AFB were absent in all of them.

L'activité lésionelle de 13 patients hanséniens borderlines tuberculoïdes ayant un examen du suc dermique négatif, après administration d'une dose unique de ROM (rifampine 60 0 mg. Ofloxacine 40 0 mg et minocycline 100 mg). fut évaluée par des examens histopatologiques de peau. Les biopsies prélevées juste avant le traitement ont démontré la présence de Mycobacterium leprae dans huit cas. Après une période de 6 mois, des lésions granulomateuses ne furent observées que dans 3 cas: les autres patients n'ont montré que des lésions inactives ou en involution. Des bacilles alcoolo-acido-résistants (AAR) persistaient dans les nerfs de 3 patients. A la lin du douzième mois suivant le traitement, des granulomes persistaient chez 2 des 13 (15%) patients. Aucun bacille AAR ne fut cependant détecté À 12 mois. Cette étude a montré que 12 mois après une dose unique de ROM, les lésions granulomateuses avaient disparu chez 85 % des patients et qu'il n'y avait plus d'évidence de bacille AAR chez aucun d'entre eux.

Se analizó la actividad histopatológica en la piel de 13 pacientes con lepra tuberculoide subpolar que fueron negativos para bacilos alcohol-ácido resistentes (BAAR) después de administrar una sola dosis de ROM (rifampina 600 mg, olloxacina 400 mg yminociclina 100 mg). Las biopsias lomadas antes de la terapia mostraron Mycobacterium leprae en ocho casos. Después de 6 meses, sólo 3 biopsias mostraron lesiones granulomatoses mientras que las otras mostraron lesiones inactivas o en resolución. Los bacilos (BAAR) persistieron en los nervios de 3 casos. Las biopsias tomadas al final de 12 meses mostraron granulomas en 2 de 13 pacientes (15%), pero no se encontraron BAAR en ninguna de ellas. Este estudio demuestra que 12 meses después de aplicar una sola dosis de ROM, 85 % de los pacientes resolvieron los granulomas y todos ellos eliminaron los bacilos.

7- Serologic response to mycobacterial proteins in hansen's patients during multidrug treatment

Elsa Rada; Nacarid Aranzazu; Marian Ulrich; Jacinto Convit

Humoral immune responses were studied in 24 leprosy patients treated with multidrug therapy (MDT) and 16 contacts. The patients were monitored for 2 to 3 years with repeated determination of IgG antibody levels directed to different mycobacterial proteins (Mycobacterium tuberculosis, Mt70; M. bovis, Mb65; M. leprae, M136, 28, 18, 10 kDa, and the complete protein M. leprae extract, MLSA). All recombinant antigens were used at 5 µg/ml concentration and the complete soluble M. leprae extract at 2 µg/ml. The results shown in this study reveal a clear decline in IgG antibodies directed toward mycobacterial proteins in the 12 multibacillary (MB) patients when they were submitted to MDT. Initially we found strong reactivity toward complete cytosolic protein and M. leprae membrane protein. The most reactive recombinant proteins in MB patients were Ml 10, M136, Mt70 kDa and, finally, Ml 18 kDa when compared to the paucibacillary (PB) group. After treatment was completed all lepromatous and borderline lepromatous patients showed low or undetectable levels as compared with their initial values before starting treatment.

La réponse immunitaire à médiation humorale fut étudiée chez 24 patients traités par la polychimiothérapie (PCT) et chez 16 personnes en contact avec ces derniers. Les patients furent suivis pendant au moins 2 à 3 années, période au cours de laquelle les niveaux d'anticorps de type IgG dirigés contre des protéines variées d'origine mycobactérienne (Mycobacterium tuberculosis. Mt 70; M. bovis, Mb 65; M. leprae. M1 36. 28, 18, 10 kDa, et l'extrait complet soluble de M. leprae MLSA) furent déterminés de façon répétée. Tous les antigènes recombinants furent utilisés à une concentration de 5 (µg/ml et l'extrait complet soluble de M. leprae à 2 (µg/ml. Les résultats présentés dans cette étude ont montré une nette diminution des anticorps de type IgG dirigés contre les protéines d'origine mycobactérienne chez, les 12 patients multibacillaires (MB) lorsqu'ils débutèrent la PCT. Au début, nous avons trouvé une forte réactivité contre la protéine cytosolique complète et la protéine membranaire de M. leprae. Les protéines recombinantes les plus réactives chez les patients MB étaient M1 10, M1 36, Mt 70 kDa et. finalement M1 18 kDa, comparé au groupe des patients paucibacillaires (PB). Après la lin du traitement, tous les patients lépromateux et lépromateux borderline ont montré des niveaux faibles ou non-détectables, comparés aux valeurs initiales mesurées avant le traitement.

Se estudiaron las respuestas humorales en 24 pacientes con lepra tratados con poliquimioterapia (PQT) y en 16 contactos sanos. Los pacientes fueron estudiados durante 2 ó 3 años con relación a la presencia de anticuerpos IgG contra diferentes proteínas microbacterianas (Mycobacterium tuberculosis, Mt70; M. bovis, Mb65; M. leprae, M136, 28, 18, 10 kDa, y un extracto total de M. leprae, MLSA). Todos los antigenos recombinantes fueron usados a la concentración de 5 µg por ml y el extracto soluble MLSA a 2 ug por mi. Los resultados de este estudio mostraron una clara disminución en los anticuerpos IgG contra las proteínas micobaeterianas en los 12 pacientes multibacilares (MB) sujetos al tratamiento con PQT. Inicialmente se encontró una fuerte reactividad hacia las proteínas citosólieas y de membrana de M. leprae. Las proteínas recombinantes más reactivas en los pacientes multibacilares fueron M110, M136, Mt70 y finalmente M118. En comparación con los niveles de anticuerpos encontrados al inicio, los niveles de anticuerpos encontrados después de completar el tratamiento fueron bajos o no détectables.

8- Determination of circulating igG subclasses against lipoarabinomannan in the leprosy spectrum and reactions

Mihir K. Beuria; Keshar K. Mohanty; Kiran Katoch; U. Sengupta

IgG subclasses against lipoarabinomannan of mycobacteria were analyzed in the sera of leprosy patients. Patients with active leprosy [tuberculoid and lepromatous, patients undergoing erythema nodosum leprosum (ENL) and reversal reactions] and inactive cases (tuberculoid and lepromatous who were cured after chemotherapy) were included in this study. Active lepromatous patients had higher levels of IgG subclasses, except IgG4, compared to active tuberculoid patients. Some of the inactive cases (lepromatous patients cured after chemotherapy) were positive for the IgG 1, IgG2 and IgG3 subclasses. However, their levels are lower than active lepromatous cases. On the other hand, no difference in the subclass levels between the active and inactive tuberculoid groups could be observed. While a significant fall in the level of IgG3 in ENL was observed as compared to lepromatous leprosy without ENL, higher levels of IgGl and IgG2 were found in patients with reversal reactions compared to their active counterparts without reactions.

Los sous-classes d'IgG diriges contre le lipo-arabino-mannane de mycobactérie furent analysés à partir de sérums de patients hanséniens. Les patients présentant une lèpre active [tuberculoïde et lépromateuse, patients souffrant d'érythèine noueux lépreux (ENL) et de réactions reverses] et des individus avec une lèpre inactive (tuberculoïdes et léproniateux qui ont été guéris par la chimiothérapie) ont été inclu dans cette étude. Les patients qui présentaient une lèpre lépromateuse active avaient des niveaux plus élevés de sousclasses d'IgG, à l'exception des lgG4, que les patients tuberculoïdes. Certains cas inactifs (patients léproniateux guéris après chimiothérapie) étaient positifs pour les sous-classes IgGl. IgG2 et IgG3. Cependant, leur niveaux étaient plus bas que chez les cas de lèpre lépromateuse active. En revanche, il n'a pas été observé de différences de niveaux de sous-classes entre les groupes de lèpre tuberculoïde active et inactive. Tandis qu'une baisse significative du niveau d'IgG3 fut observée chez, les patients atteints d'ENL, comparé aux cas de lèpre lépromateuse sans ENL. des niveaux plus élevés de IgGl et lgG2 étaient présents chez les patients souffrant de réactions réverses, comparés à leurs homologues actifs sans réactions.

Se analizaron las subclases de IgG contra lipoarabinomanana de micobacterias en los sueros de pacientes con lepra. En el estudio se incluyeron pacientes con lepra activa (tuberculoides y lepromatosos, pacientes con eritema nodoso leproso, ENL, y pacientes con reacción reversa) asi como casos inactivos (tuberculoides, los pacientes lepromatosos activos tuvieron los niveles más altos de todas las subclases, excepto IgG4. Algunos de los casos inactivos (lepromatosos curados con PQT) fueron positivos para las subclases IgGl, igG2 e IgG3. Sin embargo, sus niveles fueron menores que los de los casos lepromatosos activos. Por otro lado, no se observaron diferencias en los niveles de las subclases entre los grupos tuberculoides activo e inactivo. Aunque se observó una caída significativa en el nivel de IgG3 en los cases con ENL (comparados con los casos sin ENL). los niveles de IgGl e IgG2 fueron mayores en los casos activos con reacciones reversas que en los casos sin reacción.

9- Cytodiagnosis of primary neuritic leprosy

Elizabeth Jayaseelan; Shameem Shariff; Pritilata Rout

The diagnosis of primary neuritic leprosy (PNL) and its differentiation from other causes of peripheral neuropathy is difficult since acid-fast bacilli (AFB) smears and skin biopsy are negative from anesthetic areas. A biopsy of the involved nerve is the only conclusive method of diagnosis. Such a biopsy may not necessarily be free of complications when a large nerve is in volved. However, fine needle aspiration has in this study proved to be a simple technique to emonstrate inflammation granulomas and AFB from these involved nerves in 18 of the 27 cases suspected to have PNL. The validity of the cytological classification into morphological subtypes may have to be supplemented by a large series of studies.

Le diagnostic de lèpre purement neuritique (LPN) et la différentiation de celle-ci des autres causes de neuropathies périphériques est difficile car il n'y a pas de bacilles alcoolo-acido-résistants (AAR) à l'examen du suc dermique et de lésions à l'examen des biopsies cutanées. Une biopsie du nerf atteint est la seule méthode permettant de conclure au diagnostic. Une telle biopsie n'est pas sans risque de complications si un nerf majeur est lésé. Cependant, cette étude a démontré la valeur de la cytoponction à l'aiguille line comme technique simple pour mettre en evidence une inflammation granulomateuse et des bacilles AAR à partir de nerf atteints chez 18 des 27 cas suspectés de souffrir de LPN. La classification cytologique des sous-types morphologiques devra certainement être validée et complémentée par des études comprenant un nombre supérieur de cas.

No es fácil hacer el diagnóstico de la lepra neurítica primario (LNP) ni su diferenciación de otras causas de neuropatía periférica porque usualmente no se encuentran bacilos ácido resistentes (BAAR) ni en la linfa cutánea, ni en las biopsias de piel de las áreas anestésicas. La biopsia del nervio afectado es el único método conclusivo de diagnóstico, aunque esta biopsia puede presentar complicaciones cuando se trata de una rama nerviosa grande. En el presente estudio encontramos que la aspiración con aguja lina resultó ser una técnica simple para demostar inflamación, granulomas y BAAR en los nervios afectados, en 18 de 27 casos sospechosos de tener LNP. La validez de la clasificación citológica en los subtipos morfológicos requiere ser confirmada en estudios más extensos.

10- Leprosy in hypertensive nude rats (SHR/NCrj-rnu)

Yasuko Yogi; Tomoko Banba; Masanori Kobayashi; Hideki Katoh; Nilufar Jahan; Masumi Endoh; Hiroko Nomaguchi

Since more than a decade ago, we have attempted to develop spontaneously hypertensive rats carrying the nude gene that permits high multiplication of Myrobacierium leprae. A congenic strain carrying nude (rnu) and hypertensive genes was produced using SHR/NCrj females and F344/NJcl-rnu males. Cross-intercross was carried out 12 times to establish the hypertensive nuderat congenic strain. As a result of the genetic monitoring test with NE I 2F2 genera-tion rats, the genetic protile of the SHR/NCrj-rnu rats was the same as that ofthe SHR/NCrj rats except for the rim gene.We have successfully deveioped a hypertensive congenic nude rat strain(SHR·F344Hfh11; SHR/NCrj-rnu). An increase in the blood pressure in nude rats was found to begin at a slightly delayed age when compared with their hairy litter mates. Both female and male rats showed the highest blood pressure at approximately 20 weeks of age - 166 ± 1.4 and 197 ± II mm Hg in nude rats and 175 ± 11 and 193 ± 3.2 mm Hg in their hairy litter mates in female and male rats, respectively. In the present study, comparisons were made on the susceptibility to M. leprae in hypertensive SHR/NCrj-rnu and normotensive F344/NJcl-rnu rats. We have reconfirmed that hypertensive SHR/NCrj-rnu rats of the NE12F3 generation were highly susceptible to M. leprae. In the SHR/NCrj-rnu rats of both sexes excellent massive swelling due to multiplication of M. leprae was observed and, also, nodular lesions were produced in uninoculated fore feet and lips while those sites in the F344/NJcl-rnu rats showed only a slight swelling of the inoculated feet with mild nodular lesions. Although mild lymphocyte proliferation was seen only in the M. leprae-inoculated site with numerous bacilli and partial necrosis in the SHR/NCrj-rnu rats, at noninoculated sites, multiplication of M. leprae was only observed in the cells of the mononuclear phagocyte system. However, in F344/NJcl-rnu rats, lymphocyte proliferation with a few neutrophils was seen at the site of inoculated hind foot pads and everywhere at the site of multiplication of M. leprae. There was a wide difference in the susceptibility to M. leprae between the SHR/NCrj-rnu and the F344/NJcl-rnu rats.

11 y a plus de 10 ans, nous avons essayé de développer des rats spontanément hypertendus porteurs du gène nu qui permet une forte multiplication de Mycobacterium leprae. Une souche congénique porteuse des gènes nu (rnu) et hyperlensifs fut produite en croisant des femelles SHR/NCrj et des mâles F344/Njcl-rnu. Des croisements successifs furent entrepris 12 fois pour établir la souche consanguine eongénique de rats nu hypertendus. D'après les résultats des tests génétiques à partir des rats de génération NE12F2, ïe profil génétique des rats SHR/NCrj-rnu était le même que celui des rats SHR/NCrj, excepté pour le gène rnu. Nous avons donc développé avec succès une souche eongénique de rats nus hypertendus (SHR·F344Hfh11;SHR/NCrj-rnu). L' augmentation de la pression artérielle chez ces rats nus débutait légèrement après leur homologues porteurs de poils. Les rats tant femelles que mâles présentaient la plus haute pression artérielle autour de 20 semaines: 166 ± 1,4 et 197 ± 11 mm 1 Ig chez les rats nus et 175 ± 11 et 193 ± 3.2 mm Hg chez leur homologues porteurs de poils, respectivement. Dans cette étude, il fut entrepris une comparaison de la susceptibilité des rats hypertendus SHR/NCrj-rnu et des rats normotendus F344/NJcl-rnu à l'infection par M. leprae. Nous avons reconfirmés que les rats hypertendus SHR/NCrj-rnu de la génération NE12F3 étaient hautement susceptibles à M. leprae. Chez les rats SHR/NCrj-rnu des deux sexes, des lésions massives dues à des multiplications de M. leprae furent observées aux sites d'inoculation. De plus, des lésions nodulaires étaient présentes sur les pattes avant noninoculées et les lèvres tandis que ces sites, chez les rats F344/NJcl-rnu, ne montraient que des lésions légères au niveau des pattes inoculées avec des lésions nodulaires légères. Bien que des infiltrations lymphocytaires légères ne furent observées que dans des sites d'inoculation comportant de nombreux bacilles et de la nécrose partielle chez, les rats SHR/NCrj-rnu, dans les sites non-inoculés, la multiplication de M. leprae ne fut observée que dans les cellules du système des phagocytes mononucléés. Cependant, chez les rats F344/NJcl-rnu, des infiltrations lymphocytaires avec quelques neutrophiles ont été vues dans les sites d'inoculation des pattes arrières et à chaque site de multiplication de M. leprae. En conclusion, une différence importante de la susceptiblité à entre les rats SIIR/NCrj-rnu et les rats F344/NJcl-rnu a été observée.

Desde hace más de una década, hemos intentado desarrollar ratas hiperlensas portadoras del gene desnudeo rnu que permitan la multiplicación masiva de Mycobacterium leprae. Asi desarrollamos una cepa congénica portadora de los genes desnudo (rnu) y de hipertensión, usando hembras SHR/NCrj y machos F344/NJcl-rnu. Se neccesitaron 12 intercruces para establecer la cepa de ratas desnudas congénicas e hiperlensas. El análisis de las ratas de la generación NE12F2 indicó que el perfil genético de las ratas SHR/NCrj-rnu fue el mismo que el de las ratas SHR/NCrj, excepto por el gene mu. Hemos desarrollado, exitosamente, una cepa de ratas desnudas congénicas e hipertensas (SHR-F344Hfh 11; SHR/NCrj-rnu). Comparadas con las cantadas con pelo, las ratas desnudas presentaran un incremento en la presión sanguínea a una edad ligeramente tardia. Tanto las hembras como los machos mostraron la presión sanguínea más alta alrededor de las 20 semanas de edad: 166 ± 1.4 mm Hg (hembras) y 197 ± 11 muí Hg (machos) en las ratas desnudas, y 175 ± II mm Hg (hembras) y 19.3 ± 3.2 mm Hg (machos) en las ratas con pelo. En el presente estudio, se hicieron comparaciones en la susceptibilidad a M. leprae en las ratas hipertensas SHR/NCrj-rnu y en las ratas normotensas 1-344/NJcl-rnu. Confiramamos que las ratas hipertensas SHR/ NCrj-rnu de la generación NF 12F3 fueron altamente susceptibles a M. leprae. En las ralas SHR/NCrj-rnu de ambos sexos se observó una multiplicación masiva de M. leprae en las patas traseras inoculadas y lesiones nodulares en las patas delanteras y en los labios, mientras que las ratas F344/NJcl-rnu sólo mostraron una hinchazón moderada de las patas inoculadas y lesiones nodulares discretas. Aunque en las ralas SHR/NCrj-rnu sólo se observó ligera proliferación de linfocitos con numerosos bacilos y necrosis parcial en los sitios inoculados con M. leprae, en los sitios no inoculados la multiplicación de M. leprae sólo se observó en las células del sistema fagocitico mononuclear. Sin embargo, en las ratas F344/NJcl-rnu. la proliferación de linfocitos, con escasos neutrólilos. se observó tanto en el sitio de inoculación como en todos aquellos sitios de multiplicación de M. leprae. Hubo una gran diferencia en la susceptibilidad a M. leprae entre las ratas SHR/NCrj-rnu y las ratas F344/NJcl-rnu.

11- Sciatic nerve of normal and T200x5R swiss white mice fails to support multiplication of intraneurally injected M. leprae

Vanaja P. Shetty; Papinder S. Malharu; Noshir H. Antia

In a preliminary study we have shown that freshly harvested Mycobacterium leprae, when injected into the sciatic nerve in normal and immunosuppressed (TR) mice, induce massive but localized epithelioid and macrophage granuloma, respectively, in 3-4 weeks. In order to determine the fate of M. leprae injected intraneurally into normal and TR mice, in the present study we measured sequentially the viability, fold increase and clearance, if any, using semiquantitative methods. The average M. leprae yield per nerve assessed at regular intervals, beginning at 24 hr and including 72 hr, 1 week, 2, 3, 4, 12, 24 and 48 weeks, showed neither a significant increase nor a decrease in either the normal or the TR mice. The viability of M. leprae, assessed using the standard mouse foot pad method, showed a significant decrease as compared to baseline growth effective at 24 hr and remained static until approximately 4 weeks. A further decline and total loss of viability was noted by 12 months. The results show that injection of M. leprae via the intraneural route in both normal and TR mice failed to sustain the viability and failed to support the multiplication of the organisms.

Dans une étude préliminaire, nous avons montré que des Mycobacterium leprae récemment récoltées et injectées dans le nerf seiatique de souris normales ou immunosupprimées (TR) provoquent la formation massive mais locale de granulomes macrophagiques de type épithélioïdes ou histiocytaires. respectivement, en 3 ou 4 semaines. Dans cette étude, afin de déterminer le devenir de M. leprae après une injection intraneuronale de M. leprae chez des souris normales ou TR, nous avons mesuré, de façon séquentielle et si cela était approprié, la viabilité, les facteurs de croissance et d'élimination par des méthodes semi-quantitatives. Le rendement moyen de M. leprae par nerf, évalué à des intervalles de temps réguliers, débutant à 24 heures et incluant 72 heures. 1 semaine, 2, 3, 4, 12, 24, et 48 semaines n'a révélé ni d'augmentation ni de diminution significative que les souris furent TR ou normales. La viabilité de M. leprae, évaluée par la méthode standard d'inoculation dans la patte de souris, a montré une diminution significative dès 24 heures, comparée aux valeurs de croissance basales avant inoculation. Cette diminution resta constante jusqu'à approximativement 4 semaines, puis un second déclin et une perte totale de viabilité furent notés autour de 12 mois. Ces résultats indiquent que l'injection intra-neurale de M. leprae ne permet pas la survie et ne soutient pas la multiplication de cet organisme chez les souris normales ou immunosupprimées (TR).

En un estudio preliminar demostramos que Mycobacterium leprae recién aislado, inyectado en el nervio ciático de ratones, induce, en 3-4 semanas, granulomas epitelioides en ratones normales y granulomas macrofágico en animales inmunosprimidos (TR). Para determinar el destino de los bacilos en estos animales, en el presente estudio medimos secuencialy senúcuantitativamente la viabilidad, la multiplicación y la depuración de los bacilos. El número promedio de bacilos por nervio a las 24 h, 72 h, 1 semana, 2, 3, 4, 12, 24 y 48 semanas, no mostró cambios ni en los ratones normales ni en los ratones TR. La viabilidad de M. leprae, según el método etsándar de la amohadilla plantar del ratón, se encontró significativamente disminuida en comparación con la viabilidad del bacilo observada a las 24 h de inoculación y permaneció estática hasta aproximadamente 4 semanas. Después, a los 12 meses se observó una posterior declinación y la pérdida total de la viabilidad. Los resultados muestran que la inyección de M. leprae via la ruta intraneural en ratones normales y en ratones inmunosuprimidos, no sostiene ni la viabilidad ni la multiplicación del microorganismo.

12- Do antibodies to phospholipid antigens play any role in murine leprosy?

Oscar Rojas-Espinosa; Kendy Wek Rodriguez; Jose A. Vargas Hernandez; Patricia Arce Paredes

In order to know whether antibodies to phospholipids and other host lipids play a role in the pathology of murine leprosy, we looked for the presence of antibodies to cardiolipin, cerebroside sulfatide, and to lipids extracted from normal murine spleen, liver and brain in the sera of mice bearing a 6-month infection with Mycobacterium lepraemurium. We also looked for the presence of antibodies to lipids isolated from M. lepraemurium. We found that all of the 16 animals examined contained high levels of antibodies to the mycobacterial lipids of intermediate polarity (mostly glycolipds) but none of them had antibodies to the other lipids tested, including those isolated from mouse liver, spleen and brain, bovine cardiolipin and sulfatide, nor any significant levels of antibodies to mycobacterial lipids of high or low polarity. The infected animals also had high levels of antibodies to antigens sonically extracted from the microorganism. Antibodies to the socially extracted antigens (mostly proteins) were mainly IgG, while antibodies to the lipid antigens were predominantly IgM. Despite the low but significant percentage (1%-3%) of infected animals developing bilateral paralysis of the rear limbs, autoimmunity (due to antibodies to phospholipids and other host lipids) does not seem to be a feature of murine leprosy.

En vue de savoir si les anticorps contre les phospholipides et autres lipides de l'hôte jouent un rôle dans la pathologie de la lèpre murine. nous avons examiné, dans le sérum de souris infectées depuis 6 mois par Mycobacterium lepraemurium, la présence d'anticorps contre des cardiolipine. les cérébrosides sulfatés et antineural antibodies in perpetuation of a pre-exles lipides isolés à partir de Mycobacterium lepraemurium. Nous avons trouvé, chez les 16 souris examinées, de fort taux d'anticorps contre les lipides mycobactériens de polarité intermédiaire (principalement des glycolipides). Cependant, aucun de ces animaux n'avait d'anticorps contre les autres lipides testés tels ceux isolés de la rate, du foie et du cerveau de souris normale, la cardiolipine bovine et cérébrosides sulfatés, ainsi que une absence de niveaux significatifs d'anticorps contre les lipides de polarité haute ou basse. Les animaux infectés avaient aussi de haut niveaux d'anticorps contre les antigènes extraits des micro-organismes par ultrason aux ultrasons. Les anticorps dirigés contre les antigènes extrait par ultrason (principalement des protéines) étaient principalement des IgG, tandis que les anticorps dirigés contre les antigènes lipidiques étaient principalement des IgM. En dépit du pourcentage bas maissignificatif (l%-3%) d'animaux infectés présentant des paralysies bilatérales des pattes arrières, l'auto-immunité (due à des anticorps dirigés contre les phospholipides et autres lipides de l'hôte) ne semble pas être une caractéristique de la lèpre murine.

Para saber si los anticuerpos contra fosfolípidos y otros lípidos del huésped juegan algún papel en la patología de la lepra murina, investigamos la presencia de anticuerpos contra cardiolipina y cerebrósido-sulfatido, y contra lípidos de hígado, bazo y cerebro de ratón normal, en el suero de ratones con 6 meses de infección por Mycobacterium lepraemurium (MLM). También buscamos la presencia de anticuerpos contra lípidos aislados de MLM. Los 16 animales estudiados contuvieron niveles elevados de anticuerpos contra los lípidos de MLM de polaridad intermedia (glicolípidos, en su mayoría), pero ninguno de ellos tuvo niveles significativos de anticuerpos contra los otros lípidos usados en el estudio, incluyendo los lípidos de hígado, bazo y cerebro de ratón, cardiolipina y sulfátido. Los animales infectados tampoco tuvieron niveles significativos de anticuerpos contra los lípidos micobacterianos de alta y de baja polaridad, pero sí tuvieron cantidades elevadas de anticuerpos contra los antígenos liberados por sonicación del microorganismo (principalmente proteínas). Los anticuerpos contra los antígenos proteicos fueron mayoritariamente de la clase IgG mientras que los anticuerpos contra los antígenos lipidíeos fueron predominantemente IgM. No obstante que un porcentaje bajo pero significativo (1-3%) de los animales infectados desarrollan parálisis bilateral de las extremidades traseras, la autoinmunidad (por anticuerpos contra fosfolípidos y otros lípidos del huésped) no parece ser una característica de la lepra mutina.