Leprosy

1- Effectiveness of bacillus Calmette-Guerin (BCG) vaccination in the prevention of leprosy; a case-finding control study in nagpur, India

Sanjay P. Zodpey; Sunanda N. Shrikhande; Atul D. Salodkar; Bhagirath R. Maldhure; Shyam W. Kulkarni

A hospital-based, pair-matched, case-control study was carried out at Government Medical College Hospital in Nagpur in central India to estimate the effectiveness of BCG vaccination in the prevention of leprosy. The study included 314 incidence cases of leprosy [diagnosed by World Health Organization (WHO) criteria] below the age of 32 years. Each case was pair matched with one control for age, sex and socioeconomic status. Controls were selected f rom subjects attending this hospital for conditions other than tuberculosis and leprosy. A significant protective association between BCG and leprosy was observed (OR 0.29, 95% CI 0.21-0.41). The vaccine effectiveness (VE) was estimated to be 71 % (95% CI 59-79). The BCG effectiveness against multibacillary and paucibacillary leprosy was 79% (95% CI 60-89) and 67% (95% CI 45-78), respectively. It was more effective during the first decade of life (VE 74%; 95% CI 38-90), among females (VE 82%; 95% CI 64-90), and in the lower socioeconomic strata (VE 75%; 95% CI 32-92). The prevented fraction was calculated to be 51% (95% CI 38-62). In conclusion, this study has identified a benericial role of BCG vaccination in the prevention of leprosy in central India.

Une étude basée sur un hôpital, à partir de paires associant cas et contrôles, a été enterprise au Centre Hospitalier Universitair Gouvernemental de Nagpur, en Inde centrale, pour estimer l'efficacité de la vaccination par le BCT à prevenir la lèpre. L'étude a inclu 314 nouveaux cas de lèpre [diagnostiques selon les critères utilisés par l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS)] de moins de 32 ans. Chaque cas a été comparé à un contrôle d'âge, de sexe et de statut socioéconomique similaire. Les contrôles ont été sélectionnés à partir de sujets hospitalisés pour des maladies autres que lèpre et tuberculose. Une association de type protection, statistiquement significative, a été observée entre le BCG et la lèpre [OR 0.29, intervalle de confiance à 95% (IC 95%) 0.21-0.41]. L'efficacité vaccinale (EV) fut estimée à 71% (IC 95% 59-79). L'efficacité du BCG contre la lèpre multibacillaire et paucibacillaire était de 79% (IC 95% 60-89) et 67% (IC 95% 45-78), respectivement. Elle était la plus convaincante durant les 10 premières années de vie (EV 74%; IC 95% 38-90), pour le genre féminin (EV 82%; IC 95% 64-90) et parmi les catégories socioéconomiques basses (EV 75%; IC 95% 32-92). La fraction protégée fut déterminée être 51% (IC 95% 38-62). Pour conclure, cette étude montre qu'il existe un effet bénéfique de la vaccination par le BCG pour prévenir l'apparition de la lèpre dans le région centrale de l'Inde.

Se realizó un estudio controlado para evaluar la eficiencia de la vacunación con BCG en la prevención contra la lepra, en el Hospital del Colegio de Medicina del Gobierno en Nagpur, India. El estudio incluyó 314 casos de lepra (diagnosticados según lose criterios de la Organización Mundial de la Salud, OMS) de menos de 32 años de edad. Cada caso fue "apareado" en edad, sexo y estado socioeconómico, con un caso control. Los controles fueron seleccionados de entre los sujetos atendidos en el hospital por problemas diferentes a la lepra o la tuberculosis. Se observó una significante asociación proectora entre el BCG y la lepra (OR 0.29, 95% CI 0.21-0.41). La efectividad de la vacuna (EV) fue del 71% (95% CI 59-79). La efectividad del BCG contra la lepra rnultibacilar y la paucibacilar fue del 79% (95% CI 60-89) y 67% (95% CI 45-78), respectivamente. Fue más efectiva durante la primera década de la vida (EV 74%; 95% CI 38-90), entre las mujeres (EV 82%; 95% CI 64-90). y en el estrato socioeconómico más bajo (EV 75%; 95% CI 32-92). Se calculó que la fracción protegida fue del 51% (9% CI 38-62). En conclusión, este estudio ha identificado un efecto benéfico de la vacuna BCG en la protección contra la lepra en la India Central.

2- Delayed-type hypersensitivity reactions followed by erythema nodosum leprosum

Thomas H. Rea; Peter A. Sieling

Reported herein are 13 borderline lepromatous (BL) or subpolar lepromatous (LLs) patients who presented with or developed delayed-type hypersensitivity (DTH) reactions after initiation of antibacterial therapy, but who subsequently developed erythema nodosum leprosum (ENL), the DTH to ENL group. During the same time, three LLs patients had ENL followed by relapse-associated DTH, a significant (p <0.05) difference in sequence of the two conditions. The DTH to ENL group had statistically significant higher biopsy indexes at the time of diagnosis of the DTH reaction compared with two DTH control groups, 7 multibacillary patients presenting with DTH reactions and 15 BL or LLs who developed DTH reactions after starting treatment but had no ENL. DTH-associated histologic changes were less well developed in the DTH to ENL group than in either of the two control groups. In the DTH to ENL group, 77% required prednisone in addition to thalidomide to achieve a complete remission in contrast to only 10% of 21 ENL clinical controls. In the DTH to ENL group, the classical histologic ENL pattern was present in only 31 % of these patients, in contrast to 88% of 33 ENL histologic controls. In 9 of 9 of the DTH to ENL patients studied, after the ENL remitted, Mycobacterium leprae-sonicate-stimulated lymphocyte transformation tests gave stimulation indexes within the range of our tuberculoid (TT) and borderline tuberculoid (BT) patients, in contrast to absent responses in 6 ordinary, longterm-treated patients who had had ENL.

Nous rapportons ici 13 patients lépromateux borderlines (BL) ou lépromateux (LLs) qui présentaient au premier examen clinique ou ont développé une hypersensitibilité retardée (HSR) après l´administration du traitement antibactérien, et qui one ensuite développé un érythème noueux lépreux (ENL), le groupe HSR-ENL. Durant le même temps, trois patients LLs ont eu un ENL suivi d'une HSR associée à une rechute, une différence significative (p <0.05) dans la séquence de ces deux conditions. Le groupe HSR-ENL avait un index de biopsie statistiquement plus élevé au moment du diagnostic de HSR que 2 groupes contrôles HSR. représentés par 7 patients miultibacillaires qui présentaient des réactions de type HSR et 15 BL ou LLs qui ont développé une HSR après le début du traitement mais n'ont pas souffert d'ENL. Les lésions histologiques associées à l'HSR du groupe HSR-ENL étaient moins importantes que celles observées dans les 2 groupes contrôles. Parmi le groupe HSR-ENL. 77% ont dû être traités par de la prednisone en plus de la thalidomide pour obtenir une rémission complète. Cela contraste avec seulement 10% parmi 21 contrôles souffrant cliniquement d'ENL. L'aspect histologique classique de l'ENL n'était d'aspect classique parmi 33 contrôles histologiques ENL. Des tests de transformation lymphoblastiques à partir de stimulations par des sonicats de Mycobacterium leprae ont été effectués chez neuf cas d'HSR-ENL, après rémission de l'ENL. Les indexs de stimulation obtenus à partir de cas 9 cas étaient de l'ordre de grandeur de ceux obtenus chez les patients tuberculoides (TT ) et borderline truberculoïdes (BT), se démarquant des réponses négligeables observées chez 6 patients traités au long cours qui avaient développé un ENL.

Se reportan 13 pacientes con lepra pre-lepromatosa (borderline, BL) o lepromatosa subpolar (LLs) que desarrollaron reacciones de hipersensibilidad tip tardio (DTH) después de iniciar el tratamiento antileproso y que luego desarrollaron eritema nodoso leproso (ENL). Este grupo se describe como el grupo DTH a ENL. En el mismo lapso del estudio, tres pacientes LLs presentaron ENL y luego desarrollaron DTH asociada a una recaída. El grupo DTH a ENL tuvo índices de biopsia significativamente más altos al tiempo del diagnóstico de la reacción DTH que los índices de biopsia encontrados en 2 grupos DTH control: 7 pacientes multibacilares que presentaron reacciones DTH y 15 pacientes BL o LLs quienes desarrollaron reacciones DTH después de iniciar el tratamiento pero que no tuvieron ENL. Los cambios histológicos asociados a DTH estuvieron menos desarrollados en el grupo DTH a ENL que en cualquiera de los 2 grupos control. En el grupo DTH an ENL el 77 % de los pacientes requirieron prednisona además de talidomida para alcanzar la remisión completa, en contrast con sólo el 10 % de 21 controles con ENL clínico. En el grupo DTH a ENL el patrón histológico clásico del ENL estuvo presente solo en el 31 % de los pacientes, en contraste con el 88 % de 33 controles con ENL histológico. En 9 de los 9 pacientes DTH a ENL estudiados, se encontró, después de que el ENL hubo remitido, que la estimulación de lifoeitos con un sonicado de Mycobacterium leprae dio índices de estimulación dentro del rango encontrado en los pacientes tuberculoides (TT) y pre-tuberculoides (BT), en contraste con la ausencia de respuesta en 6 pacientes con lepra tratada por mucho tiempo que sólo habían tenido ENL.

3- The nose in leprosy: immunohistology of the nasal mucosa

Wytske J. Fokkens; Gijs J. Nolst Trenite; Marcus Virmond; Alex KleinJan; Vera L. G. Andrade; Nino G. van Baar; Ben Naafs

A detailed study of the nose was undertaken in 40 leprosy patients with different classifications of leprosy and different durations of disease at two hospitals in Brazil. This manuscript describes the immunohistochemical data on cellular infiltrates in the nasal biopsies of those patients. It was surprising that the damage to the whole depth of the nasal mucosa, epithelium and lamina propria was considerable, as was the case in the nasal mucosa which looked relatively normal during clinical inspection. The epithelium showed large holes which looked like very extended goblet cells. Very obvious was the lack of vasoconstriction after cocaine application, and the vessels also showed a lack of staining with factor VIII, possibly indicating a disruption of the endothelium. The number of neurofilaments was extensively reduced in all leprosy groups compared to normal controls. As in the skin, an increased number of CD68+ cells was found in the lamina propria of the nasal mucosa of the lepromatous patients. Contrary to findings in the skin, in the nasal mucosa of the borderline/lepromatous patients the number of CD4+ cells was increased and the number of CD8+ cells was decreased compared to normal controls. The number of CD8+ cells tended to be more reduced when the history of leprosy was longer. It is not clear as yet whether the reduced numbers of CD8+ cells are acquired during infection or whether persons with a low number of CD8+ cells in the nose might have a higher risk of acquiring leprosy.

Une étude détaillée des lésions nasales a été enterprise chez. 40 patients issus de deux hôpitaux brésiliens et atteints de lèpre de durée d'évolution et de classification variable. Cet article décrit les données inimuno histochimiqu.es des infiltrats inflammatoires observés à partir des biopsies nasales de ces patients. Il fut surprenant de constater l'importance des lésions de la muqueuse, à la fois de I'épithélium et de la lamina propria, même lorsque la muqueuse nasale semblait relativement normale à l'inspection clinique. L'epithelium montrait de grands trous qui ressemblaient à des cellules à mucus hypertrophiées. Il y avait une absence très évident de vasoconstriction après l'administration locale de cocaine, et les vaissaux montraient une absence de marquage par le facteur VIII, suggérant une atteinte de l'endothélium. Le nombre de neurolilments était nettement rtkliut dans chaque groupe atteint de lèpre, en comparaison de contrôles normaux. Comme dans la peau, la lamina propria de la muqueuse nasale des patients lépromateux avaient un nombre important de cellules CD68+. A l'opposé, contrastant avec les données cutanées, un nombre plus important de cellules CD4+ et un nombre moins important de cellules CD8+ par rapport aux contrôles, étaient présents dans la muqueuse nasale des patients borderline/lépromateux. Le nombre de cellules CD8+ aviat tendance à être d'autant plus réduit que la durée d'évolution de la lèpre était longue. Il reste cependant à determiner si le nombre réduit de cellules CDS+ est acquis en cours d'infection ou si les individus avec un nombre réduit de cellules CD8+ dans le nez one un risque plus important de développer la lèpre.

Se realizó un estudio detallado de la nariz, de 40 paeientes con diferentes tipos de lepra y eon diferentes tiempos de evolución de la enfermedad en 2 hospitales de Brasil. En este manuscrito se describen los hallazgos inmunohistoquímieos de los infiltrados celulares en las biopsias nasales de los paciente. Fue sorprendente encontrar que el daño de toda la mucosa nasal, incluyendo el epitelio y la lámina propia, fue considerable, a pesar de que la mucosa pareció relativamente normal en la inspección clínica. El epitelio mostró hoyos grandes que pareceieron como células globosas muy extendidas. Fue muy obvia la falta de vasoconstricción después de la applicación de cocaína. Los vasos también mostraron la ausencia de tinción para factor VIII, quizá por la ruptura del endotelio. Todos los pacientes mostraron un número extremadamente reducido de neurofilanientos. Como en la peil, en la lámina propia de la mucosa nasal, los pacientes con lepra lepromatosa tuvieron números elevados de células CD68+. Comparados con los controles sanos, los pacientes lepromatosos y pre-lepromatosos tuvieron números elevados de células CD4+ y números reducidos de células CD8+; esto fue contrario a lo observado en la piel. El número de células CD8+ tendió a ser más reducido cuando la evolución de la enfermedad fue más larga. No está claro si los números reducidos de células CD8+ son el resultado de la infección o si las personas con números bajos de células CD8+ en la nariz tienen mayor riesgo de adquirir la enfermedad.

4- Contribution of type 1 reactions to sensory and motor function loss in borderline leprosy patients and the efficacy of treatment with prednisone

Paul W. Roche; Wim J. Theuvenet; Joseph W. Le Master; C. Ruth Butlin

The changes in nerve function tests in 297 new leprosy patients over an average period of 30 months were measured. The impact of type 1 reactions (T1R) on sensory and voluntary muscle function was measured by standard tests. Sensory function was improved in patients with single episodes of cutaneous T1R, but not improved in patients with neural T1R or with multiple episodes of either kind of T1R. Patients over 40 years of age improved less than younger patients, and patients admitted for treatment of T1R improved more than those treated as outpatients. These data point to a need to find better regimens for the treatment of nerve damage in T1R.

Les variations observées à partir des tests neurologiques fonctionnels de nerfs périphériques ont été mesurées chez 297 nouveaux patients atteints de lèpre sur une période moyenne de 30 mois. L'importance des réactions de type 1 (RT1) sur la fonction sensorielle et musculaire volontaire a été évaluée en utilisant les résultats obtenus à partir de tests standards. La fonction sensorielle s'est améliorée chez les patients présentant des épisodes uniques de RT1 cutanées. Elle ne s'est pas améliorée chez les patients souffrant de RT1 nerveuses ou d'épisodes multiples de chaque type de RT1. Les patients de plus de 40 ans ont présenté une amélioration moins nette que les patients plus jeunes, et les patients hospitalisés pendant leur traitement contre la RT1 ont joui d'une amélioration plus importante que ceux qui ont été traités à la maison. Ces données suggèrent qu'il y a un besoin pressant de trouver de meilleures modalités pour le traitement des atteintes nerveuses associées aux RT1.

So midieron los cambios en las pruebas de función nerviosa en 297 pacientes con lepra, durante un periodo de 30 meses. El impacto de las reacciones tipo 1 (RT1) sobre las funciones sensorial y de los músculos volutarios se midió utilizando pruebas estándar. La función sensorial mejoró en los pacientes con episodios únicos de RT1 cutáneas pero no mejoró en los pacientes con RT1 neural es o con episodios múltiples de RT1 de cualquier tipo. Los pacientes de más de 40 años de edad mejoraron menos bien que los pacientes más jóvenes y los pacientes admitidos para tratamiento de RT1 mejoraron más que los tratados como pacientes externos. listos datos señalan la necesidad de encontrar mejores esquemas para el tratamiento del daño a nervios en las RT1.

5- Quantitative assessment of facial sensation in leprosy

Ramaswamy Premkumar; Ebenezer Daniel; Sujai Suneetha; Paramanandam Yovan

The trigeminal and great auricular nerves which supply sensation to the face are affected in leprosy. No objective sensory testing methods have been devised for testing sensation in the face. Testing for corneal sensation to ascertain trigeminal nerve or visualization and palpation of the great auricular nerve alone may not be enough to establish the involvement of these nerves.
In a sample of leprosy patients, face sensation threshold measurements were done using a set of three Semmes-Weinstein (SW) monofilaments that gave a force of 0.05-0.07, 0.2 and 2 g. Sensation was tested by three examiners and intra- and inter-observer testing was used as a means to validate the findings.
Within the limitations of this study, the results indicate that use of SW monofilaments is a fairly reliable and repeatable method for sensory testing in the face. During follow up, a single filament with a force of 0.5-0.7 g (2.83 marking number in SW filament or any other filament with a corresponding gram force) could be used to assess sensation. A simple procedure of quantifying sensation in these nerves is suggested. A method to incorporate trigeminal or great auricular nerve sensory testing into the existing sensory assessment charts is also discussed.

Les nerfs sensitifs trijumeaux et grands auriculaires sont souvent affectés durant l'évolution de la lèpre. Un test objectif de sensibilité n'a pas encore été développé pour évaluer la fonction nerveuse sensitive du visage. L'évaluation du nerf trijumeau en testant la sensibilité coméenne ou las visualisation et la palpation du nerf grand auriculair ne sont peut-être pas suffisant pour démontrer l'atteinte de ces nerfs.
A partir d'un échantillon de patients atteints de lèpre, des mesures de sensibilité minimale du visage furent effectuées en utilisant un ensemble de trois monofilaments de Semmes-Weinstein (SW) qui produisent une force de 0,05-0.07; 0.2 et 2 g. La sensibilité fut testée par trois examinateurs et des tests intra- et in ter-observateurs furent utilisés pour valider les données observées.
Malgré les limitations de cette étude, les résultats suggèrent que l'utilisation de monofilaments de SW est une méthode tout à liât fiable, ayant une bonne répétabilité, [?| pour tester la sensibilité du visage. Durant le suivi, un seul filament avec une force de 0,5-0,7 g (type 2,83 pour les filaments de SW ou n'importe quel autre filament ayant une force en grammes correspondante) pourrait être utilisé pour évaluer la sensibilité. Une procédure simple pour quantifier la sensibilité de ces nerfs est proposée. Une méthode est aussi discuttée pour intégrer les tests de sensibilité des nerfs trijumeau et grand auriculaire dand les schémas déjà existants d'évaluation de la sensibilité.

Los nervios trigémino y gran auricular que proporcionan sensibilidad a la cara están afectados en la lepra. Sin embargo, hasta ahora no se han desarrollado métodos objetivos para medir la sensibilidad de la cara. Las pruebas de sensibilidad de la córnea para establecer la función del trigémino y la palpación del nervio gran auricular pueden resultar ¡nsulicientes para establecer la afección de estos nervios.
En este estudio se midió el umbral de sensibilidad de la cara en un grupo de pacientes con lepra usando una serie de 3 monolilamentos de Semmes-Weinstein (SW) calibrados para ejercer una presión de 0.05-0.07. 0.2 y 2 g. La sensibilidad se probó por 3 examinadores y los resultados y variaciones entre ellos se usaron para validar las mediciones.
Dentro de las limitaciones del estudio los resultados indicaron que el uso de los monolilamentos de SW constituye un método confiable para medir la sensibilidad de la cara. Durante el seguimiento, la sensibilidad podría establecerse usando un solo filamento con una fuer/a de 0.5 a 0.7 g (filamentos SW o cualquier otro del número 2.83). Se sugiere un método simple para medir la sensibilidad de estos nervios y se discute la posibilidad de incorporar la prueba sensorial de los nervios trigémino y gran auricular dentro de las pruebas de sensibilidad existentes.

6- Assessment of anti-PGL-I as a prognostic marker of leprosy reaction

Mariane M. A. Stefani; Celina M. T. Martelli; Otaliba L. Morais-Neto; Pierpaolo Martelli; Mauricio B. Costa; Ana Lucia S. S. de Andrade

The anti-phenolic glycolipid-I (PGL-I) assay as currently applied for leprosy is conceived as an early marker of asymptomatic infection, early disease diagnosis and cure monitoring. Its use as a prognostic marker of reaction is still a matter of controversy. We conducted a case-control study to investigate whether IgM and IgG anti-PGL-I antibodies could discriminate patients at increased risk of developing reactions. Eligible cases were untreated leprosy patients at the onset of type 1 and type 2 reactions recruited f rom among 600 concurrent, newly detected, untreated leprosy patients attending an outpatient clinic in central Brazil. For the patients with reaction, approximately the same number of leprosy cases without reaction matched as to bacterial index (BI), age and gender were randomly selected. Individuals without clinical leprosy were evaluated as healthy controls. Sera f rom type 1 reaction (N = 43) and type 2 reaction (N = 26) patients were tested by an ELISA using PGL-I synthetic disaccharide-BSA antigen and 1:300 sera dilution (cut-off point >0.2 OD). Antibody profiles were evaluated by exploratory data analysis and reverse cumulative distribution curves. The IgG anti-PGL-I response did not have a defined pattern, being detected only at low levels. Our results indicate that leprosy patients, independently of their reactional status, produce high levels of IgM anti-PGL-I, demonstrating a strong correlation between the magnitude of antibody response and the BI. Patients with a higher BI were at least 3.4 times more prone to produce an antibody response compared to healthy controls.

Un marqueur précoce d'infection asymptômatique. une aide au diagnostic précoce de la maladie et au suivi de guérison représentent les applications communes actuelles, en ce qui concerne la lèpre, du test in vitro évaluant les anticorps anti-glycolipides phénoliques de type I (PGL-I). Son utilisation comme marqueur prognostique des réactions est encore sujet à controverses. Nous avons, de ce fait, mené une étude de cas contrôlés, afin de savoir si les niveaux d'anticorps, de type IgM et IgG, anti-PGL-I pouvaient permettre de détecter les patients susceptibles de développer des réactions. Les cas sélectionnés étaient des patients non-traités souffrant de lèpre, en début de réactions de type 1 ou de type 2, sélectionnés à partir de 500 patients lépreux non-hospitalisés nouvellement détectés, encore non-traités, se présentant à la consultation d'une clinique localisée dans la partie centrale du Brésil. Il fut sélectionné au hasard un nombre approximativement identique de cas de lèpre san réaction à l'index bactérioscopique (Bl). à l'âge et au genre comparables aux patients avec réactions. Des individus sans lèpre clinique furent évalués comme contrôles sains. Les sérums provenant de patients souffrant de réactions de type 1 (N = 43) et de réactions de type 2 (N = 26) furent testés par un ELISA utilisant l'antigène BSA-PGL-I disaccharide synthétique et und dilution à 1:300 du sérum (point limite de positivité 20.2 OD). Les profiles d'anticorps furent analysés en utilisant une analyse de données de type exploratrice des courbes de distribution cumulatives inverses. La réponse d'IgG anti-PGL-I ne montrait pas de profil bien défini, n'étant détectée qu'à de faibles niveaux. Nos résultats indiquent que les patients atteints de lèpre, indépendeniment de leurs états réactionnels, produisent de hauts niveaux d'IgM anti-PGL-I, mettant en évidence une forte corrélation entre l'importance de la réponse en anticorps et le BL Les patients ayant un haut Bl avaient au moins 3,4 fois plus de chance de produire lien réponse en anticorps que les contrôles en bonne santé.

El ensayo de los anticuerpos anti-glicolípido fenólico-I (PGL-I) en la lepra se ha usado como un indicador temprano de infección asintomática, como una prueba de diagnóstico temprano y como un monitor de la evolución de la enfermedad. Sin embargo, su uso como prueba de pronóstico de la reacción leprosa es aun controversia!. Nosotros hicimos un estudio controlado para investigar si los niveles de anticuerpos anti PGL-I IgM e IgG podrían servir para detectar aquellos pacientes en riesgo de desarrollar reacciones. Los casos elegibles fueron pacientes no tratados con reacciones de los tipos I y 2, seleccionados de entre 600 casos nuevos atendidos en una clínica del centro de Brasil. También se estudió un número similar de casos de lepra sin reacción leprosa pero comparables en edad, sexo y grado de afección. Así mismo se evaluó un grupo control de individuos sanos. Los sueros de los pacientes con reacción de tipo I (n = 43) o con reacción de tipo 2 (n = 26), y los sueros de los controles sanos se probaron en un ensayo de ELISA usando como antígeno un disacárido sintético (análogo del PGL-I) acoplado a BSA, y una dilución 1:300 de los sueros (D.O. = 0.02 como valor de corte). Los perliles de anticuerpos fueron evaluados por análisis de extrapolación de datos y por las curvas reversas de distribución acumulativa. La respuesta en IgG no tuvo un patrón definido y fue de bajo nivel. Nuestros resultados indicaron que los pacientes con lepra, independientemente de su estado reacciona!, produjeron niveles elevados de IgM anti-PGL-I, y mostraron una fuerte correlación entre la magnitud de la respuesta humoral y el índice bacteriológico (BI). Los pacientes con BI elevados produjeron niveles de anticuerpos cuando menos 3.4 veces más altos que los controles sanos.

7- Mycobacterium lepraemurium, a well-adapted parasite of macrophages: I. oxygen metabolites

Oscar Rojas-Espinosa; Veronica Camarena-Servin; Iris Estrada-Garcia; Patricia Arce-Paredes; Kendy Wek-Rodriguez

We measured the release of reactive oxygen intermediaries [ROI (hydrogen peroxide and superoxide anion)] by murine peritoneal macrophages challenged in vitro with Mycobacterium lepraemurium (MLM), complement-opsonized yeast, M. bovis BCG, M. phlei. or phorbol myristate acetate (PMA). We found that except for MLM, all of the other materials provoked the release of significant amounts of hydrogen peroxide and superoxide. MLM entered the macrophages without triggering their oxidative metabolism. Pre-infection of macrophages with MLM did not alter these cells' capacity to release the normal amounts of ROI in response to other microorganisms or PMA. Killing of MLM did not revert the macrophages' failure to release ROI upon ingestion of the microorganism, nor were macrophages able to produce these toxic metabolites when pre-incubated in the presence of murine gamma interferon (IFN-γ). MLM has several attributes that allow it to survive within macrophages: a) it is a nontoxigenic microorganism (it does not harm its host), b) it resists the harsh conditions of the intraphagolysosomal milieu (a property perhaps dependent on its thick lipidie envelope), and c) it penetrates the macrophages without triggering their oxidative response (thus avoiding the generation of the toxic intermediaries of oxygen). For these attributes (and others discussed in this paper), we recognize MLM as a highly evolved, well-adapted parasite of macrophages.
In addition, the results of the present study prompted the analysis of the biochemical pathways used by MLM and M. bovis BCG to penetrate into their cellular hosts, a subject now under investigation in our laboratory.

Nous avons mesuré la production de radicara libres intermédiaires derives de l'oxygéne (RLIO; péroxyde d'hydrogéne et anion superoxyde) á la suite de l'exposition in vitro de macrophages péritonéaux de souris par Mycobacterium lepraemurium (MLM), des levures opsonisées, M. bovis BCG. M. phlei ou l'acé-tate myristate de phorbol (AMP). Nous avons observé que, à l'exception de Ml.M, tous les autres agents élicitaienl le relarguage de quantités significatives de peroxyde d'hydrogène et d'anion superoxyde. MLM est entré dans les macrophages sans déclencher leur métabolisme oxydatif. L'infection antérieure de macrophages par MLM n'a pas altéré leur capacité à relâcher une quantité adéquate de RLIO en réponse aux autres micro-organismes ou à l'AMP. L'inactivation de MLM n'a pas abrogé l'incapacité des macrophages à relâcher des RLIO à l'occasion de la phagocytose de ces micro-organismes. De même, des macrophages pré-incubés avec de I'interferon gamma (IFN-γ) d'origine murine étaient incapables de produire ces metabolites toxiuqcs. Plusieurs propriétés de MLM lui permettent de survivre à l'intérieur du macrophage: a) c'est un micro-organisme non-toxigénique (il ne lèse pas l'hôte), b) il résiste les conditions |inhospitalières] du millieu intra-phagolysosomial (un caractère qui dépend peut-être d'une enveloppe lipidique épaisse) et c) il entre dans le macrophage sans déclencher une réponse oxydative (c'est à dire sans la production d'intermédiaires toxiques de l'oxygène). Du fait de ces propriétés (et d'autres dicuttées dans cet article), nous considérons MLM comme un parasite très évolué, parfaitement adapté aux macrophages.
De plus, les résultats de cette étude a incité à entreprendre l'analyse des voies biochimiques utilisées par MLM et M. bovis BCG lorsqu'elles pénètrent leurs hôtes cellulaires, une recherche maintenant en cours dans notre laboratoire.

Medimos la liberación de intermediarios reactivos del oxígeno, ROÍ (peróxido de hidrógeno anión superóxido) por los macrófagos peritoncales de ratón estimulados in vitro con Mycobacterium lepraemurium (MLM), levaduras opsonizadas con complemento, M. bovis BCG, M. phlei. o con el éster forbólico del ácido mirístico (PMA). Encontramos que excepto MLM, todos los otros materiales provocaron la liberación de cantidades importantes de peróxido de hidrógeno y de anión superóxido. MLM penetró en los macrófagos sin despertar en ellos el metabolismo oxidativo. La preinfección de los macrófagos por MLM no alteró su capacidad para liberar cantidades normales de ROÍ en respuesta a otros microorganismos o a PMA. Los macrófagos tampoco produjeron ROÍ cuando se trataron con MLM muerto por calor o cuando se preincubaron con interferon gamma (IFNγ). MLM tiene varios atributos que le permiten sobrevivir dentro de los macrófagos: a) es un microorganismo no toxigénico (no daña a su huésped), b) resiste las inhóspitas condiciones del medio intrafagosomal (una propiedad quizá dependiente de su gruesa estructura lipídica), y c) penetra a los macrófagos sin despertar su respuesta oxidativa (evitando así la producción de los intermediarios tóxicos del oxígeno). Por estos atributos (y otros discutidos en este trabajo), reconocemos a MLM como un parásito de los macrófagos altamente evolucionado y bien adaptado a la vida intracelular.
Los resultados del presente estudio motivaron además, el análisis de las vias bioquímicas usadas por MLM y por M. bovis BCG para penetrar en los macrófagos, un tema de investigación actual en el laboratorio.