Vol. 59 N° 2 - Apr/May/Jun - 1991

ORIGINAL ARTICLE

1- Is HIV infection a risk factor for leprosy?

Jorg M. Pönnighaus; Luckson J. Mwanjasi; Paul E. M. Fine; Marie-Anne Shaw; Amanda C. Turner; Susan M. Oxborrow; Sebastian B. Lucas; Peter A. Jenkins; Jonathan A. C. Sterne; Lyn Bliss


A case control study was undertaken during 1988 and 1989 within the framework of the LEPRA Evaluation Project (LEP)/Ka-ronga Prevention Trial (KPT) in Karonga District, northern Malawi, to investigate whether HIV infection is a risk factor for clinical leprosy. Cases were newly ascertained, biopsy-confirmed, incident leprosy patients older than 14 years of age. Controls were selected f rom the computer data base on over 170,000 people who form the basis of LEP/KPT. They were matched for sex, age, and area of residence. HIV seroposi-tivity rates were 1.8% (2/112) for incident leprosy cases and 2.4% (24/1011) for controls. The Mantel Haenszel odds ratio is 0.6 (95% confidence interval 0.1-3.3). Thus, no evidence for an association between HIV infection and leprosy incidence has been observed in this population. In a parallel investigation, an odds ratio of 7.4 (95% confidence interval 3.3-16.7) was found for 102 microscopy- and/or culture-confirmed, incident pulmonary tuberculosis cases in the same population during 1989, a result similar to those obtained elsewhere in Africa. Among leprosy relapses, 16.7% (2/12) were HIV positive.
Une élude cas-témoins a été entreprise en 1988 et 1989 dans le cadre du "Lepra Evaluation Project (LEP/ Karonga Prevention Trial (KPT)," dans le district de Karonga, dans le Nord du Malawi, pour étudier si l'infection VIH est un facteur de risque pour la lèpre clinique. Les cas étaient des patients lépreux nouvellement découverts et confirmés par biopsie, âgés de plus de 14 ans. Les témoins ont été sélectionnés à partir de la base de données informatisées concernant plus de 170.000 personnes qui forment la base de LEP/KPT. Ils ont été appariés pour le sexe, l'âge, et le lieu de résidence. Les taux de séropositivité VIH étaient de 1.8% (2/112) pour les nouveaux cas de lèpre et 2.4% (24/1011) parmi les témoins. L'odds ratio selon la méthode de Mantel Hanszel est de 0.6 (intervalles de confiance à 95%: 0.1-3.3). En conséquence, on n'a observé aucun signe d'association entre l'infection VIH et l'incidence de la lèpre dans cette population. Au cours d'une recherche parallèle, un odds ratio de 7.4 (intervalle de confiance à 95%: 3.3-16.7) fut trouvé parmi 102 nouveaux cas de tuberculose pulmonaire confirmés par microscopic et/ou culture dans la même population en 1989, un résultat similaire à ceux obtenus ailleurs en Afrique. Parmi les récidives de lèpre, 16.7% (2/12) étaient positifs pour le VIH.
Durante 1988 y 1989 se efectuó un estudio de control de casos en el Distrito de Karonga en Malawi del norte para investigar si la infección por el virus de la in-munodeficiencia humana (H1V) es un factor de riesgo para la lepra cínica, el estudio se realizó dentro del marco del Proyecto de Evaluación de LEPRA (LEP)/ Ensayo de Prevención de Karonga (KPT). Los pacientes fueron casos nuevos, mayores de 14 años de edad, con lepra confirmada por biopsia. Los controles, apareados en cuanto a sexo, edad y área de residencia, se seleccionaron a partir de un banco de datos de 170,000 gentes del LEP/KPT. Los grados de seropositividad para HIV fueron del 1.8% (2/112) para los casos de lepra incidente y de 2.4% (24/1011) para los controles. La relación entre grupos de Mantel Haenszel fue de 0.6 (95% de confianza en el intervalo 0.1-3.3). Así, no se observó ninguna asociación entre la infección por HIV y la incidencia de lepra en esta población. En un estudio paralelo durante 1988, se encontró una relación de 7.4 (95% de confianza en el intervalo 3.3-16.7) para 102 casos nuevos de tuberculosis confirmada por microscopía o cultivo, en la misma población, un resultado similar a los obtenidos en Africa. Entre los casos recurrentes de lepra, 16.7% (2/12) fueron HIV positivos.

2- Effect of BCG on the risk of leprosy in an endemic area: a case control study

Jayaprakash Muliyil; Kenrad E. Nelson; Earl L. Diamond


The effect of BCG on the risk of leprosy was measured using a case-control design in an area endemic for the disease. In this study, 397 newly diagnosed cases and 669 controls matched for age, sex and locality were selected f rom a defined population. Information on exposure to BCG, contact with another case of leprosy, and relevant socioeconomic variables were obtained f rom the subjects. Having infectious (multibacillary) and noninfectious (paucibacillary) contacts in the household increased the risk of disease 11.7 times (p < 0.001) and 2.7 times (p < 0.001), respectively. Overall, the protection offered by BCG was not significant (odds ratio = 0.8; p = 0.17). However, BCG appeared to increase the risk for indeterminate leprosy (adjusted odds ratio = 2.7; p = 0.09) while protecting against borderline disease (adjusted odds ratio = 0.39; p = 0.03). It is possible that BCG causes a shift in the overall cell-mediated immune response, thus increasing the risk for milder and transient forms of leprosy while protecting against more serious forms. These findings may have important implications for the design and interpretation of vaccine trials. Namely, trials should be designed to measure the protective efficacy of vaccines against the more serious forms of leprosy, which have the greatest public health significance.
L'influence du BCG sur le risque de lèpre a été mesuré par une étude de type cas-témoin dans une région endémique pour la maladie. Dans cette étude, 397 cas nouvellement diagnostiqués et 669 témoins appariés pour l'âge, le sexe et la localité ont été sélectionnés à partir d'une population définie. Des informations sur l'exposition au BCG, un contact avec un autre cas de lèpre, et des variables socio-économiques pertinentes ont été récoltées chez ces personnes. Le contact domiciliaire avec un malade infectieux (multibacillaire) ou non-infectieux (paucibacillaire) augmentait le risque de maladie respectivement de 11.7 fois (p < 0.001) et 2.7 fois (p < 0.001). Dans l'ensemble, la protection offerte par le BCG n'était pas significative (odds ratio = 0.8; p = 0.17). Cependant, le BCG semblait accroître le risque pour la lèpre indéterminée (odds ratio ajusté = 2.7; p = 0.09), mais protégeait contre la forme borderline de la maladie (odds ratio ajusté = 0.39; p = 0.03). Il est possible que le BCG provoque une modification dans la réponse immunitaire de type cellulaire, augmentant done le risque pour une forme plus bénigne et transitoire de lèpre, mais protégeant contre les formes plus sévères. Ces observations peuvent avoir des implications importantes pour la conception et l'interprétation de'essais de vaccination. Plus précisément, des essais devraient être conçus pour mesurer l'efficacité protectrice des vaccins contre les formes plus sévères de la lèpre, qui ont la plus grande signification du point de vue de la santé publique.
Usando un programa diseñado para el control de casos en un área endémica de lepra, se midió el efecto del BCG sobre el riesgo de desarrollar la enfermedad. Para el estudio, se seleccionaron 397 casos recién diagnosticados y 669 individuos control similares en cuanto a edad, sexo y localidad. De los participantes se obtuvo información sobre exposición al BCG, contacto con otros casos de lepra, y aspectos socioeconómicos relevantes. Los resultados señalaron que el tener contactos infecciosos (multibacilares) y no infecciosos (paucibacilares) dentro de los convivientes, aumentó el riesgo de la enfermedad 1 1.7 veces (p = 0.001) y 2.7 veces (p = 0.001), respectivamente. Aunque en lo general, la protección conferida por el BCG no fue significativa (relación entre grupos = 0.8; p = 0.17), el BCG pareció incrementarei riesgo para lepra indeterminada (relación = 2.7; p = 0.09) al mismo tiempo que pareció proteger contra formas intermedias de la enfermedad (relación = 0.39; p = 0.03). Es posible que el BCG cause un cambio en la respuesta inmune celular general, aumentando el riesgo para las formas leves y transitorias de la lepra y protegiendo contra las formas más severas. Estos hallazgos pueden tener importantes implicaciones en el diseño y en la interpretación de los resultados de los programas de vacunación; esto es, los ensayos de campo deben diseñarse para medir la eficacia protectora de las vacunas contra las formas severas de la lepra, las de mayor importancia en salud pública.

3- Fixed duration MDT in paucibacillary leprosy

Rachel Mathai; Soshamma George; Mary Jacob


The World Health Organization (WHO) has recommended a fixed duration of multidrug therapy (MDT) for paucibacillary leprosy which is currently widely implemented in India. A clinico-pathological study was initiated in 1984 to assess the efficacy of this regimen. The clinical and histological responses of the patients to MDT were assessed at the end of 6 months, when their treatment was stopped, and at 2½ years, when they were released f rom surveillance, and compared with the responses of a matched patient group to conventional dapsone (DDS) monotherapy during the same period. Of 28 patients who completed the MDT schedule, there was less than 60% improvement in 33% of them when treatment was stopped at the end of 6 months and in 20% of them at the end of 2½ years. Of 26 patients receiving DDS monotherapy, 37% showed less than 60% improvement at the end of 6 months but only 8.8% had less than 60% improvement at 2xh years. It is concluded that MDT for paucibacillary leprosy as recommended by WHO may not have a major advantage over DDS monotherapy, since about 20% of those patients on MDT continue to have evidence of active disease when discharged f rom surveillance.
L'Organisation Mondiale de la Santé (OMS) a recommandé une durée fixe de traitement par polychi-miothérapie (PCT) pour la lèpre paucibacillairc, et cette recommandation est largement mise en pratique en Inde. Une étude clinico-pathologique fut mise en route en 1984 pour évaluer l'efficacité de ce régime. Les réponses cliniques et histologiques des patients à la PCT furent évaluées à la fin des 6 mois, c'est-à-dire à l'arrêt du traitement, et après deux ans et demi, c'est-à-dire à la fin de la période de surveillance. Ces réponses furent comparées à celles d'un groupe de patients recevant une monothérapic conventionnelle à la dapsone durant la même période. Parmi les 28 patients qui ont terminé leur traitement par PCT, il y a eu une amélioration de moins de 60% chez 33% d'entre eux à l'arrêt du traitement après 6 mois, et chez 20% d'entre eux après 2 ans et demi. Parmi les 26 patients qui ont reçu une monothérapie à la dapsone, 37% ont montré moins de 60% d'amélioration après 6 mois, mais seulement 8.8% avaient moins de 60% d'amélioration après deux ans et demi. On en conclut que la PCT pour la lèpre paucibacillaire telle que recommandée par l'OMS ne paraît pas présenter d'avantage important par rapport à la monothérapie à la dapsone, puisqu'environ 20% de ces patients sous PCT continuent à montrer des signes d'activité de la maladie à la fin de la période de surveillance.
La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha recomendado una duración fija del tratamiento con múltiples drogas (TMD) para los casos de lepra pauciba-cilar. En 1984 se inició un estudio clínico-patológico para evaluar la eficacia de este tratamiento en la India. Las respuestas clínicas e histológicas de los pacientes al TMD se midieron al final de los 6 meses, cuando el tratamiento fue suspendido, y a los 2 años y medio, cuando los pacientes fueron liberados del seguimiento. Los resultados se compararon con los obtenidos en pacientes tratados sólo con dapsona (DDS) durante el mismo periodo de tiempo. Dentro del grupo de 28 pacientes que completaron el tratamiento, 33% de ellos mostraron menos del 60% de mejoría al final de los 6 meses de tratamiento, mientras que al final de los 2 años y medio, el 20% de ellos mostró ese grado de mejoría. De los 26 pacientes que recibieron la mono-terapia con DDS, 37% mostraron menos del 60% de mejoría al final de los 6 meses pero sólo el 8.8% tuvieron menos del 60% de mejoría al final de los 2 años y medio. Se concluye que la TMD recomendada por la OMS para la lepra paucibacilar no presenta muchas ventajas sobre la monoterapia con DDS puesto que cerca del 20% de los pacientes bajo TMD continúan teniendo evidencias de enfermedad activa cuando son puestos fuera del programa de seguimiento.

4- A case of relapse with drug-susceptible M. leprae after multidrug therapy

Monique Constant-Desportes; Claire-C้cile Guelpa-Lauras; Jean-Claude Carolina; Andr้ L้oture; Jacques H. Grasset; Hubert Sansarricq


A male born in 1930 was diagnosed as smear-positive borderline leprosy in 1971, and was treated with dapsone and/or sul-famethoxypyridazine f rom 1972 to 1980 with clinical improvement. However, new skin lesions with smears strongly positive appeared in August 1980, and he was diagnosed as having downgraded to lepro-matous (LL) leprosy, but the bacilli recovered f rom the skin biopsy were fully susceptible to both dapsone and rifampin by mouse foot pad technique. Between 1981 and 1983, the patient was treated with 24 months of rifampin 600 mg and dapsone 100 mg daily, supplemented with prothion-amide 500 mg daily during the initial 3 months, and his skin lesions gradually improved during treatment with the combined regimen. Afterward, the patient was kept under surveillance without treatment. f rom 1984 to 1986, his skin smears were negative, and no bacilli could be found f rom a skin biopsy taken in 1985. Then in 1987, 52 months after stopping treatment, new skin lesions appeared with a high concentration of Mycobacterium leprae (2 x 106/mg tissue). The drug-susceptibility test again demonstrated that the organisms were fully susceptible to both dapsone and rifampin. Apparently the relapse was due to re-multiplication of drug-susceptible persisters.
Un cas de lèpre borderline à frottis cutané positif a été diagnostiqué en 1971 chez un homme né en 1930. Sous traitement par dapsone et/ou sulfamethoxypyri-dazine de 1972 à 1990, il s'est cliniquement amélioré. Mais de nouvelles lésions, à frottis positifs, sont apparues en Août 1980 et ont fait considérer que la lèpre avait évolué vers la forme lépromateuse. Les bacilles prélevés par biopsie cutanée et inoculés à la souris se sont montrés totalement sensibles à la rifampicine et à la dapsone. De 1981 à 1983, le malade a reçu quotidiennement pendant 24 mois 600 mg de rifampicine et 100 mg de dapsone, plus 500 mg d'éthionamide pendant les trois premiers mois du traitement. Les lésions cutanées se sont progressivement améliorées durant le traitement. Ensuite le malade a été gardé en observation sans traitement. Entre 1984 et 1986 les frottis cutanés ont été négatifs et une biopsie cutanée faite en 1985 a, elle aussi, été négative. Toutefois en 1987, 52 mois après l'arrêt du traitement, de nouvelles lésions cutanées sont apparues avec une forte teneur en bacilles (2 x 106 bacilles/mg de tissu). L'antibiogramme fait chez la souris a montré que les bacilles étaient restés totalement sensibles à la dapsone et à la rifampicine. Vraisemblablement la rechute a été due à la remultiplication de bacilles persistants sensibles.
Un hombre nacido en 1930 fue diagnosticado con frotis positivo de lepra dimorfa en 1971, y fue tratado con dapsona y/o sulfametoxipiridazina desde 1972 hasta 1980 con mejoramiento clínico. Sin embargo, lesiones de la piel nuevas con frotis fuertemente positivos aparecieron en agosto 1980; y fue diagnosticado como haberse bajado a lepra lepromatosa (LL) pero los bacilos recuperados de la biopsia de la piel estaban completamente susceptibles a ambas dapsona y rifampicina por la técnica del pie del ratón. Entre 1981 y 1983, el paciente fue tratado con rifampicina 600 mg por 24 meses y con dapsona 100 mg diarios, suplementado por protionamida 500 mg diaria durante los iniciales 3 meses; y lesiones de la piel gradualmente mejoradas durante el tratamiento con el régimen combinado. Después, el paciente fue puesto bajo vigilancia sin tratamiento. Desde 1984 a 1986, los frotis de piel estaban negativos, y no se podía encontrar ningún bacilo de una biopsia de la piel tomada en 1985. Entonces en 1987,52 meses después de parar el tratamiento, nuevas lesiones de la piel aparecieron de nuevo con concentración alta de Mycobacterium leprae (2 x l06/mg tejido). El examen de susceptibilidad a drogas demonstró de nuevo que los organismos estaban completamente susceptibles a ambas dapsona y rifampicina. Aparentemente la recaída fue debida a la re-multiplicación de los bacilos persistentes droga-susceptibles.

5- Clinical and bacteriological progress of highly bacillated BL-LL patients discontinuing treatment after different periods of MDT

Kiran Katoch; Mohan Natarajan; Ashok Bagga; Vishwa M. Katoch


Highly bacillated lepromatous patients (BL/LL) with an initial bacterial index (BI) of 4 to 6+ are being treated with a modified World Health Organization-recommended multiple-drug therapy (WHO/MDT) regimen consisting of rifampin 600 mg once a month, clofazimine 100 mg on alternate days, and dapsone 100 mg daily. The clinical and bacteriological profiles of the patients who had discontinued treatment at different durations have been compared with patients who took the same treatment until attainment of smear negativity. All six of the patients who had discontinued treatment at 12-18 months had worsened clinically and bacteriologically, and viable bacilli could be demonstrated in those tested for ATP. In four patients who had stopped treatment at 24-30 months, the BI continued to fall and there was no clinical or bacteriological worsening in 1 to 2 years of follow-up. The fall in the BI in five cases who had discontinued treatment at 36-44 months was comparable to those on continuous treatment, and there was no worsening. These observations indicate that with the conventional MDT regimen it is not advisable to stop treatment at 12 and 18 months. It appears that treatment should be continued for at least 2 years, and longer in the untreated highly bacillated cases. Prospective clinical trials with a sufficient number of cases and long-term follow-up need to be carried out to ascertain the optimum duration.
Des patients lépromateux fortement bacillifères (BL/ LL) avec un indice bactérien initial (IB) de 4 à 6 + sont traités par un régime polychimiothérapeutique modifié par rapport à celui recommandé par l'Organisation Mondiale de la Santé. Ce régime consistait en rifam-picine 600 mg une fois par mois, clofazimine 100 mg un jour sur deux, et dapsone 100 mg par jour. Les profils cliniques et bactériologiques des patients qui avaient arrêté leur traitement après différentes durées ont été comparés aux patients qui ont suivi le même traitement jusqu'à la négativation des frottis. Tous les 6 patients qui avaient arrêté leur traitement après 12-18 mois s'étaient détériorés du point de vue clinique et bactériologique, et des bacilles viables pouvaient être mis en évidence chez ceux qui ont été testés pour l'ATP. Chez 4 patients qui avaient arrêté leur traitement après 24-30 mois, l'IB continua à diminuer et il n'y eut aucune détérioration clinique ou bactériologique au cours du suivi de 1 à 2 ans. La diminution de l'IB chez les 5 patients qui avaient arrêté leur traitement après 36 à 44 mois était comparable à ceux poursuivant leur traitement, et il n'y avait aucune détérioration. Ces observations indiquent qu'avec le régime PCT conventionnel, il n'est pas à conseiller d'arrêter le traitement après 12 ou 18 mois. Il semble que le traitement doit être poursuivi pour au moins deux ans, et plus chez les malades fortement bacillifères non encore traités. Des essais cliniques prospectifs concernant un nombre suffisant de malades et un suivi à long terme doivent être entrepris pour déterminer la durée optimale de traitement.
Se están tratando pacientes lepromatosos (BL/LL) multibacilares (con índices bacteriológicos, IB, iniciales de 4+ a 6+), con un esquema de tratamiento modificado del propuesto por la Organización Mundial de la Salud, con múltiples drogas. El tratamiento consta de 600 mg de rifampina una vez al mes, 100 mg de clofazimina en dias alternados, y 100 mg diarios de dapsona. Los perfiles clínicos y bacteriológicos de los pacientes que han suspendido el tratamiento en diferentes etapas, se han comparado con aquellos de los pacientes que siguieron el tratamiento hasta que se hicieron bacteriológicamente negativos. Los 6 pacientes que descontinuaron el tratamiento a los 12-18 meses de su inicio, han empeorado clínica - y bacteriológicamente y en ellos, la prueba del ATP ha revelado la presencia de bacilos viables. En 4 pacientes que suspendieron el tratamiento a los 24-30 meses, el IB continuó bajando y no hubo empeoramiento clínico o bacteriológico al año o a los 2 años de seguimiento. La caída en el IB en 5 casos que habían suspendido el tratamiento a los 34-36 meses, fue comparable a la observada en aquellos pacientes que no abandonaron el tratamiento y no hubo empeoramiento. Estas observaciones indican que con el tratamiento convencional con múltiples drogas no es recomendable suspender el tratamiento a los 12-18 meses. El tratamiento debe continuarse cuando menos durante 2 años, o más en los casos muy baciliferos sin tratamiento. Se necesitan más ensayos clínicos, con un mayor número de casos y mayores tiempos de seguimiento, para establecer la duración óptima del tratamiento.

6- Four-year follow-up results of a WHO-recommended multiple-drug regimen in paucibacillary leprosy patients in Malawi

Gjalt Boerrigter; Jorg M. Ponnighaus; Paul E. M. Fine; Rosamund J. Wilson


An evaluation of a World Health Organization-recommended multidrug therapy (WHO/MDT) in 499 paucibacillary leprosy patients is described. Patients were followed for 48 months after completion of treatment. Overall relapse rates after treatment were found to be 6.5 per 1000 person years (95% confidence interval 3.4-11.4). There were 12 relapses. A relative lack of cell-mediated immunity, as suggested by number of lesions, clinical classification and lepromin test results, and poor compliance with the dapsone component of WHO/MDT, appeared to be associated with a marginally increased risk of relapse. Severe type 1 reactions after completion of treatment occurred in 17 (3.5%) patients, 15/17 during the first 12 months of follow-up. Overall, 12 (2.5%) patients developed new disabilities during or after WHO/MDT.
On décrit ici une évaluation de la polychimiothé-rapie telle que recommandée par l'Organisation Mondiale de la Santé (PCT/OMS) réalisée chez 499 patients atteints de lèpre paucibacillaire. Les patients furent suivis durant 48 mois après l'arrêt du traitement. Le taux global de rechute observé après traitement fut de 6.5 pour 1000 personnes-années (intervalle de confiance à 95%: 3.4-11.4). Il y eut 12 rechutes. Un manque relatif d'immunité cellulaire, comme le suggéraient le nombre de lésions, la classification clinique et les résultats du test à la lépromine, ainsi qu'une acceptation faible de la composante dapsone du régime PCT/OMS, semblent être associés à un risque légèrement accru de récidives. Des réactions sévères de type 1 apparurent chez 17 patients (3.5%) après l'arrêt du traitement (dans 15 cas sur 17 au cours des premiers 12 mois du suivi). Globalement 12 (2.5%) patients ont développé de nouvelles incapacités durant ou après la PCT/OMS.
Se describe una evaluación del programa de tratamiento con múltiples drogas recomendado por la Organización Mundial de la Salud (TMD/OMS) aplicado en 499 pacientes con lepra paucibacilar. Los pacientes fueron vigilados durante 48 meses después de completar su tratamiento. Hubieron 12 recaídas, encontrándose que el índice global de recaídas después del tratamiento fue de 6.5 por 1000 personas/año (95% de confianza en el intervalo 3.4-11.4). La falta relativa de inmunidad celular sugerida por el número de lesiones, la clasificación clínica y los resultados de la prueba de la lepromina, así como el pobre cumplimiento con el componente dapsona del TMD/OMS, parecieron estar asociados con el riesgo marginalmente incrementado de recaída. En 17 pacientes (3.5%) ocurrieron severas reacciones de tipo I después de completar el tratamiento, en 15 de los 17 pacientes las reacciones ocurrieron durante los primeros 12 meses de seguimiento. Doce pacientes (2.5%) desarrollaron nuevas incapacidades durante o después del TMD/OMS.

7- Determination of in vivo and in vitro drug effects of mycobacteria f rom the mass spectrometric analysis of single organisms

Monika Haas; Buko Lindner; Martin Dietz; Yemane Berhan Tebebe; Ulrich Seydel


Laser microprobe mass analysis of single bacterial organisms allows the determination of their intrabacterial ratio of sodium-to-potassium ions and the registration of fragment ions originating f rom their organic bacterial cell matrices as mass fingerprint spectra. It has been established previously that the intrabactcrial cation ratio provides information on the physiological state of an individual bacterial cell. In the present experiments it is also shown, with different cultivable mycobacterial species and strains (drug sensitive and resistant) exposed to various drugs, that data derived f rom the evaluation of the mass fingerprint spectra reflect changes in the degree of impairment. The analysis of Mycobacterium leprae derived f rom a limited number of skin biopsies of lepromatous/borderlinc lepromatous leprosy patients under World Health Organization-recommended multiple-drug therapy (WHO/MDT) showed impairment of the organisms with both of the methods of measurement in proportion to the duration of treatment except in one case. In one M. leprae population f rom a patient who had been treated for 19 months, the fingerprint evaluation gave the first evidence for an insufficient response to treatment. This was further confirmed by the unusual frequency distribution of the Na+,K+ ratios which revealed the existence of two subpopulations, one impaired and one unimpaired.
L'analyse de masse par microsonde laser d'organismes bactériens isolés permet la détermination du ratio intrabactérien des ions sodium/potassium, et l'enregistrement de fragments ioniques originaires de leurs matrices cellulaires organiques en tant qu' empreintes digitales du mélange obtenues par spectrométrie de masse. Il a été établi auparavant que le ratio des cations intrabactériens fournit des informations sur l'état physiologique d'une cellule bactérienne individuelle. L'expérimentation présente montre également en utilisant difiêrcntcs espèces et souches (sensibles et résistantes aux médicaments) de mycobactérics cultivables, que les données obtenues par l'évaluation des empreintes digitales obtenues par spectrométrie de masse reflètent difiérents degrés d'altération. L'analyse de Mycobacterium leprae obtenus à partir d'un nombre limité de biopsies cutanées de patients présentant une lèpre lé-promateusc/borderlinc lépromatcusc soumis à une polychimiothérapie telle que recommandé par l'OMS (PCT/OMS) a montré une altération des organismes avec les deux méthodes de mesure, et ceci proportionnellement à la durée de traitement, à l'exception d'un cas. Dans une population de M. Ieprae d'un patient qui avait été traité pour 19 mois, l'évaluation par empreintes fut la première à mettre en évidence une réponse insuffisante au traitement. Ceci fut confirmé par la suite par la distribution de fréquences inhabituelle des ratios NA+ et K+, qui révéla l'existence de deux sous-populations, l'une altérée, et l'autre non.
El microanálisis de masas con rayos laser de organismos bacterianos individuales, permite la determinación de su relación sodio/potasio y el registro del espectro de los fragmentos iónicos que se originan de la matriz orgánica celular. Ya antes se estableció que la relación de cationes proporciona información sobre el estado fisiológico de una célula bacteriana individual. En el presente estudio se muestra que el micro-análisis de masas con rayos laser revela también el grado de alteración inducido por varias drogas en diferentes micobacterias cultivables, sensibles y resistentes a los drogas. El análisis de las células de Mycobacterium leprae aisladas de un número limitado de biopsias de piel de pacientes LL/BL sujetos al tratamiento con múltiples drogas recomendado por la Organización Mundial de la Salud (OMS), demostró la alteración de los microorganismos, por los dos métodos de medición, en proporción a la duración del tratamiento, excepto en un caso. El microanálisis de masas dio la primer evidencia de una insuficiente respuesta al tratamiento en un paciente que había sido tratado durante 19 meses. Esto fue posteriormente confirmado por la anormal distribución de la relación Na+, K+, que reveló la existencia de 2 subpoblacioncs, una dañada y otra no alterada.

8- Essential fatty acids in plasma of patients with leprosy

Stephen Wright; Nancy Morse; Mehar S. Manku


We have investigated the fatty-acid composition of plasma phospholipids in 61 patients with leprosy of various clinical types with either a short or long duration of treatment. All patients had significantly decreased levels of linoleic acid and alpha-linoleic acid, the parent fatty acids of the n-6 and n-3 families, respectively. Patients with a treatment duration of more than 6 months had significantly low levels of arachidonic acid and eicosapentaenoic acid compared to controls or to patients with a treatment duration of less than 6 months. There were no differences in the fatty-acid composition between multibacillary patients and paucibacillary patients. We conclude that dietary supplementation with essential fatty acids may be indicated in patients with leprosy, particularly in those with a long treatment duration.
Nous avons étudié la composition en acides gras des phospholipides plasmatiques de 61 patients présentant une lèpre de divers types cliniques et soumis à un traitement de courte ou de longue durée. Tous les patients avaient des niveaux diminués d'acide linoléique et al-pha-linoléique, les acides gras ";pères"; respectivement des familles n-6 et n-3. Les patients ayant suivi un traitement de plus de 6 mois avaient des niveaux si-gnificativement bas d'acide arachidonique et d'acide eicosapentanoique, comparés aux témoins ou aux patients ayant suivi un traitement de moins de 6 mois.
Investigamos la composición en ácidos grasos de los fosfolípidos del plasma en 61 pacientes con diferentes tipos clínicos de lepra y diferentes tiempos de tratamiento. Todos los pacientes tuvieron niveles significativamente disminuidos de los ácidos linoleico y alfa-linoleico, los ácidos grasos progenitores de las familias n-6 y n-3, respectivamente. Comparados con los controles o con los pacientes con menos de 6 meses de tratamiento, aquellos pacientes tratados por más de 6 meses tuvieron niveles significativamente bajos de los ácidos araquidónico y cicosapentacnoico. No hubieron diferencias en la composición de ácidos grasos entre los pacientes multibacilares y los paucibacilares. Concluímos que es conveniente administrar una dicta suplementada con ácidos grasos esenciales a los pacientes con lepra, particularmente a aquellos con tiempos prolongados de tratamiento.

9- Differential handling of bacterial antigens in macrophages infected with Mycobacterium leprae as studied by immunogold labeling of ultrathin sections

Nalin Rastogi; Sylviane Cadou; Raymond Hellio


Mycobacterium leprae were purified f rom the livers of experimentally infected armadillos, and the purity of the bacterial preparation was established by electron microscopy, immunoelectrophoresis of purified bacilli with rabbit serum raised against liver tissues f rom a noninfected armadillo, and gas chromatography. Such purified and intact bacilli were fixed and embedded by a gelatin-Lowicryl method for electron microscopy which preserved the mycobacterial antigens. Ultrathin sections were labeled with antisera raised in rabbits against the total antigens of the following species of mycobacteria: M. leprae, M. bovis BCG, M. avium, and a rapid-growing, nonpathogenic species, M. fallax. Bacteria were also labeled using serum raised against 2,3-diacyl-tre-halose-2'-sulfate (sulfolipid-IV or SLIV) isolated and purified f rom M. tuberculosis. The immunolabeling was visualized under the electron microscope (EM) by using a secondary probe (goat-antirabbit IgG, H + L, coupled to 5 nm gold particles; GAR-5). EM results showed that M. leprae bacilli were highly labeled with all of the antisera used except SLIV, which was present only in discrete amounts. All of the antisera used labeled the bacterial ";capsule,"; showing that this structure was not an artifact since it contained mycobacterial antigens. In parallel experiments, the murine J-774 macrophage cell line was infected with purified M. leprae, and fixed for EM at various time intervals for 1 week. Although the phago-cytized bacteria did not multiply during the 1-week experiment, macrophages were unable to lyse them. Immunogold labeling of bacterial antigens in ultrathin sections of infected macrophages helped us to conclude: a) bacterial death and/or lysis is not a prerequisite for processing of antigens by infected macrophages; b) there was conclusive evidence for a differential antigen handling, i.e., some antigens were rapidly released (within 2 days, mostly capsular antigens) inside infected macrophages and transported to the macrophage surface, whereas others (the majority of them located in the cell-wall skeleton and in deeper bacterial structures) remained unreleascd even after 4 to 7 days of infection; c) although relatively fewer epitopes reacting with anti-SL.v antibodies were found, they were rapidly released (within 2 days) inside macrophages, and exocytized to the macrophage surface. These novel findings are discussed in relation to leprosy and the current knowledge about the processing of bacterial antigens.
Du Mycobacterium leprae a été purifié des foies dc tatous infectés expérimentalement, et la pureté dc la préparation bactérienne a été vérifiée par microscopic électronique, immunoélectrophorèse de bacilles purifiés avec du sérum de lapin active contre les tissus hépatiques à partir d'un tatou non infecté, et par chromatographic gazeuse. Dc tels bacilles purifiés et intacts ont été fixés et inclus dans dc la gélatine-Lowicryl, méthode utilisée pour la microscopic électronique et qui préserve les antigènes mycobacteriens. Des coupes ultra-minces ont été marquées avec des anti-sérums activés chez des lapins contre des antigènes totaux des espèces suivantes dc mycobactéries: M. leprae, M. bovis B.C.G., M. avium, et une espèce non pathogène à croissance rapide, M. fallax. Les bactéries ont aussi été marquées à l'aide de sérum activé contre le 2,3-diacyl-tréhalose-2'-sulfatc (sulfolipide IV ou SLIV) isolé et purifié à partir de AI. tuberculosis. Le marquage immu-nologique a été visualisé par microscopie électronique (ME) en utilisant une sonde secondaire (IgG dc chèvre anti-lapin, H + L, couplé à des particules d'or de 5 nm; GAR-5). Les résultats de ME ont montré que les bacilles de AI. leprae étaient fortement marqués par tous les antiserums utilisés, à l'exception du SLIV, qui n'était présent qu'en quantités discrètes. Tous les antiserums utilisés ont marque la ";capsule"; bactérienne, montrant que cette structure n'était pas un artefact puisqu'elle contenait des antigènes mycobactériens. Dans des études entreprises en parallèle, la lignée cellulaire macropha-gique J-774 d'origine murine a été infectée avec du M. leprae infecté, et fixé pour ME à différents intervalles de temps pour une semaine. Bien que les bactéries phagocytées ne se sont pas multipliées durant l'expérimentation d'une semaine, les macrophages n'étaient pas capables dc les détruire. Le marquage immuno-logique des antigènes bactériens avec de l'or dans les coupes ultra-minces des macrophages infectés nous ont aidés à conclure que: a) la mort bactérienne et/ou la lysc n'est pas une condition préalable à la prise en charge des antigènes par les macrophages infectés; b) on a eu la preuve décisive d'une prise en charge différenciée des antigènes, c'est-à-dire que certains antigènes étaient libérés rapidement (dans les deux jours, surtout les antigènes capsulaires) à l'intérieur des macrophages infectés et transportés à la surface des macrophages, alors que d'autres (la majorité dc ceux localisés dans le squelette de la paroi cellulaire et dans les structures bactériennes plus profondes) n'étaient pas libérés même après 4 à 7 jours d'infection; c) bien qu'on a trouvé relativement peu d'épitopes réagissant avec les anticorps anti-SLIV, ils furent rapidement libérés (endéans les 2 jours) à l'intérieur des macrophages et expulsés à la surface du macrophage par exocytose. Ces nouvelles découvertes sont discutées dans la perspective de la lèpre et des connaissance actuelles de la prise en charge des antigènes bactériens.
Se purifico Mycobacterium leprae del higado de armadillos infectados experimentalmente y la pureza de la preparación bacteriana se estableció por microscopía electrónica, por inmunoelectroforésis contra un suero de conejo anti-tejido hepático dc un armadillo sano, y por cromatografía dc gases. Los bacilos purificados intactos dc lijaron y embebieron para microscopía electrónica en gclatina-Lowicryl, un método que preserva los antigenos micobacterianos. Las secciones ultradcl-gadas se hicieron reaccionar con antisucros dc conejo dirigidos contra los antígenos totales de M. leprae, M. bovis BCG, M. avium, y M. fallax, una especie no patógena dc crecimiento rápido. Las bacterias también se hicieron reaccionar con un suero contra el 2, 3-dia-cil-trehalosa-2-sulfato (o sulfolípido IV, SLIV) del M. tuberculosis. La reactividad se visualizó al microscopio electrónico (ME) usando un anticuerpo de cabra anti-IgG dc conejo, H + L, acoplado a partículas dc oro de 5 nm; GAR-5. Los resultados al ME mostraron que los bacilos de la lepra reaccionaron intensamente con todos los antisueros, excepto con el anti-SLIV, el cual sólo estuvo presente en cantidades discretas. Todos los antisueros usados marcaron la cápsula de la bacteria, indicando que esta estructura contiene antígenos micobacterianos. En experimentos paralelos, se infectaron macrófagos murinosde la linca J-774 con M. leprae purificados y se fijaron para ME a varios intervalos de tiempo hasta completar una semana. Aunque las bacterias fagocitadas no se multiplicaron durante el experimento de 1 semana, los macrófagos fueron incapaces de lisarlas. El inmunomarcaje con oro dc los antígenos bacterianos en las secciones ultradelgadas de los macrófagos infectados, nos ayudó a concluir: (a) que ni la muerte bacteriana ni su lisis es un pre-re-quisito para el procesamiento dc antigeno por los macrófagos infectados; (b) que hay un manejo diferencial dc los antígenos, i.e., algunos antígenos, principalmente capsulares, fueron rapidamente liberados (en dos días) dentro de los macrófagos infectados y transportados a la superficie de los macrófagos, mientras que otros (la mayoría de ellos localizados en el esqueleto de la pared celular y en las estructuras bacterianas más profundas) permanecieron sin ser liberados aún después de 4 a 7 días de infección, y (c) que aunque hubieron relativamente menos epitopes reactivos con los anticuerpos anti-SLIV, ellos fueron rápidamente liberados (en dos días) dentro de los macrófagos y exo-citados a la superficie celular. Estos hallazgos novedosos se discuten en relación a la lepra y al conocimiento actual sobre el procesamiento de los antígenos bacterianos.

10- Allocation of patients to paucibacillary or multibacillary drug regimens for the treatment of leprosy - a comparison of methods based mainly on skin smears as opposed to clinical methods -alternative clinical methods for classification of patients

Marijke Becx-Bleumink


This paper reports on the experience with classification of patients at the All-Africa Leprosy and Rehabilitation Training Centre (ALERT) in the Shoa Province in Ethiopia. Classification on clinical grounds is compared with classification which is primarily based on the result of skin-smear examinations. In addition, possible alternative clinical methods for the allocation of patients to the multidrug therapy (MDT) regimens arc discussed.
The analysis includes 1525 new patients. In 730 patients classified clinically as paucibacillary (PB), this classification was not confirmed by skin-smear results in only 1.5%; whereas in 795 patients classified clinically as multibacillary (MB), the classification was not confirmed in 21.1%. Possible reasons, notably for the latter discrepancy, are discussed.
Based on an assessment of the correctness of the diagnosis and the most probable classification, it was found that if classification had been based on the skin-smear results, 9.3% of the 795 patients classified as MB would have been classified incorrectly as PB. Classification based on clinical signs resulted in incorrect classification, MB instead of PB, of 8.7% of the 795 patients. Over-classification of MB patients, which was found to be supervisor related, is open to improvement by a strict application of clinical criteria for classification. The experience in the ALERT leprosy control program shows that classification which is based on clinical signs may, in particular, result in some PB patients being classified as MB, while classification based on the results of skin-smear examinations is more likely to result in some MB patients being classified as PB. It was concluded that, provided a number of requirements aimed at limiting the number of misclassified patients are introduced, patients can be classified based on clinical signs and, hence, in the absence of skin-smear services for routine classification purposes.
Cet article rapporte l'expérience concernant la classification des patients au ";All-Africa Leprosy and Rehabilitation Centre"; (ALERT) dans la province dc Shoa en Ethiopie. Une classification sur base clinique est comparée à une classification basée en premier lieu sur le résultat dc l'examen des frottis cutanés. Dc plus, des méthodes alternatives cliniques pour la répartition des patients selon les régimes de polychimiothérapic (PCT) sont discutées.
L'analyse comprend 1525 nouveaux patients. Parmi 730 patients classés cliniquement comme paucibacil-laires (PB), cette classification ne fut pas confirmée par les résultats des frottis cutanés pour seulement 1.5%; tandis que parmi 795 patients classés cliniquement comme multibacillaires (MB), la classification n'a pas été confirmée dans 21.1% des cas. Les raisons possibles, notamment pour cette dernière divergence, sont discutées.
Sur la base d'une évaluation de l'exactitude du diagnostic et dc la classification la plus probable, on a trouvé que, si la classification avait été basée sur les frottis cutanés, 9.3% des 795 patients classés comme MB auraient été incorrectement classés en PB. Une classification basée sur les symptômes cliniques résulte à un classement incorrect, MB au lieu de PB, de 8.7% des 795 patients. Un excès de classification des patients en MB, qu'on a montré comme étant dépendante du superviseur, se prête à une amélioration par l'application stricte des critères cliniques de classification. L'expérience du programme dc lutte contre la lèpre d'ALERT montre qu'une classification basée sur les symptômes cliniques peut, en particulier, résulter en une classification de quelques patients PB en MB, tandis qu'une classification basée sur les résultats des frottis cutanés résultera plus vraisemblablement dans une classification comme PB de quelques patients MB. On en conclut que, pourvu qu'une série de mesures soient introduites dans le but de limiter le nombre de patients erronement classifies, les malades peuvent être classés sur la base des symptômes cliniques, et donc en l'absence de services permettant l'examen de routine des frottis cutanés.
Este artículo se refiere a la experiencia sobre la clasificación de los pacientes en el Centro ALERT (All-Africa Leprosy and Rehabilitation Training Centre) de la Provincia de Shoa en Etiopia. La clasificación clínica se compara con la clasificación basada en los resultados de los extendidos dc linfa cutánea. Además se discuten diferentes métodos alternativos para situar a los pacientes dentro dc los programas dc tratamiento con múltiples drogas.
El análisis incluye 1525 casos nuevos. En 730 pacientes clasificados clínicamente como paucibacilares (PB), la clasificación no se confirmó por los resultados de los extendidos dc linfa cutánea sólo en el 1.5% dc los casos, mientras que en 795 pacientes clasificados clínicamente como multibacilares (MB), la clasificación no se confirmó en el 21.1% dc los casos.
Se discuten las posibles razones de las discrepancias. Con base en la exactitud del diagnóstico y en la clasificación más probable, se encontró que si la clasificación se hubiera hecho en función de los extendidos dc linfa cutánea, el 9.3% dc los 795 pacientes clasificados como MB se hubieran clasificado incorrectamente como PB. La clasificación basada sólo en los signos clínicos resultó en una clasificación incorrecta (MB en lugar de PB) del 8.7% de los 795 pacientes. La sobreclasilícación de pacientes MB, la cual se encontró relacionada con el supervisor, puede corregirse por la aplicación estricta dc los criterios clínicos de clasificación. La experiencia en el programa de control de la lepra ALERT indica que la clasificación basada en signos clínicos puede, en particular, dar como resultado que algunos pacientes PB sean clasificados como MB, mientras que la clasificación basada en los extendidos de linfa cutánea puede originar que algunos pacientes MB sean clasificados como PB. La conclusión es que manteniendo reducido el número dc factores dc error, para propósitos de clasificación dc rutina, los pacientes pueden ser clasificados basándose en los signos clínicos, y dc aquí, en ausencia de los servicios para efectuar los extendidos de linfa cutánea.

EDITORIALS

12- Polymerase chain reaction and leprosy

Thomas P. Gillis; Diana L. Williams


CORRESPONDENCE

13- Induction of lepromin positivity in monkeys by a candidate antileprosy vaccine: Mycobacterium habana

Naipal B. Singh; Anil Srivastava; Hardwar P. Gupta; Ashok Kumar; Sudhir Srivastava


16- Borderline tuberculoid (BT) leprosy confined to a tattoo

V. N. Sehgal; Sanjiv Jain; Sambit N. Bhattacharya; S. Chouhan


17- Cutaneous lipids and mast cells in murine leprosy

Oscar Rojas-Espinosa; Elba Reyes Maldonado


NEWS AND NOTES

CURRENT LITERATURE

ACKNOWLEDGMENT

2018 © International Journal of Leprosy and other Mycobacterial Diseases all right reaserved GN1