Vol. 68 N° 2 - Apr/May/Jun - 2000

ORIGINAL ARTICLE

1- Mycobacterium leprae typing by genomic diversity and global distribution of genotypes

Masanori Matsuoka; Shinji Maeda; Masanori Kai; Noboru Nakata; Gue-Tae Chae; Thomas P. Gillis; Kazuo Kobayashi; Shinzo Izumi; Yoshiko Kashiwabara


The genetic diversity and related global distribution of 51 Mycobacterium leprae isolates were studied. Isolates were obtained f rom leprosy patients f rom 12 geographically distinct regions of the world and two were obtained f rom nonhuman sources. Polymerase chain reaction (PCR) followed by DNA sequencing was performed targeting the rpoT gene of M. leprae. Isolates were classified into two groups based on the number of tandem repeats composed of 6 base pairs in the rpoT gene. Isolates f rom Japan (except Okinawa) and Korea belonged to one group, while those f rom Southeast Asian countries, Brazil, Haiti and Okinawa in Japan belonged to a second genotype. M. leprae obtained f rom two nonhuman sources (an armadillo and a mangabey monkey) revealed the latter genotype. These results demonstrate the genetic diversity of M. leprae and the related genotype-specific distribution in the world.
La diversité génétique et la distribution géographique globale correspondante de 51 isolais de Mycobacterium leprae furent étudiées. Les isolats furent obtenus à partir de patients lépreux provenant de 12 régions géographiquement distinctes et deux isolats furent obtenus de source non-humaine. La réaction de polymerase en chain (PCR) suivie par le séquençage des produits obtenus fut réalisée sur le gène rpoT de M. leprae. Les isolats furent classés en deux groupes basés sur le nombre de motifs répétés 2 par 2 (tandem repeats) composés de 6 paires de bases au sein du gène rpoT. Les isolats du Japon (excepté Okinawa) et Corée appartenaient à un groupe, alors que ceux provenant de l'Asie du Sud-Est, du Brézil, d'Haïti et d'Okinawa au Japon appartenaient au second genotype. M. leprae provenant des deux sources non humaines (un tatou à neuf bandes et un signe mangabey) révélèrent ce dernier génotype. Ces résultats démontrent la diversité génétique de M. leprae et la distribution mondiale reliée au génotypes spécifiquement étudiés ici.
Se estúdio la diversidad genctica y la distribution global de 51 aislados de Mycobacterium leprae. Los aislados se obtuvieron de pacientes con lepra de 12 regiones geográficas distintas del mundo y de dos fuentes no humanas. El análisis se hizo por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y por secuenciación del DNA de la region correspondiente al gene rpo T de M. leprae. Los aislados se clasificaron en dos grupos con base en el número de "secuencias tandem" compuestas por 6 pares de bases en el gene rpo T. Los aislados de Japón (excepto Okinawa) y Korea correspondieron a un genotipo, mientras que los aislados de los países del sudeste asiático, Brazil, Haiti, y Okinawa en Japon, correspondieron a un segundo genotipo. Los aislados de M. leprae obtenidos de dos fuentes no humanas (un armadillo y un mono mangabey) mostraron el sugundo genotipo. Estos resultados muestran la diversidad genética de M. leprae y la distribution de los genotips de M. leprae en el mundo.

2- Trials of daily, long-term minocycline and rifampin or clarithromycin and rifampin in the treatment of borderline lepromatous and lepromatous leprosy

Thomas H. Rea


Daily, long-term treatment with minocycline 100 mg and rifampin 600 mg was initiated in 24 previously untreated borderline lepromatous (BL) and lepromatous (LL) patients for a total of 646 patient-months, averaging 26.9 months per patient. The same regimen was started in 12 BL and LL patients having a bacteriologic relapse for a total of 379 patient-months, averaging 32.5 months per patient, and in 12 patients judged to be at high risk for relapse for a total of 354 patient-months, averaging 29.5 months per patient. Daily, long-term treatment with clarithromycin 500 mg and rifampin 600 mg was initiated in 8 previously untreated BL and LL patients for a total of 174 patient-months, averaging 21.8 months per patient. The results in these 56 patients were compared to those obtained in 34 previously untreated BLand LL patients who were treated concurrently receiving daily, long-term dapsone 100 mg and rifampin 600 mg. No evidence of dangerous drug reactions or bone marrow, kidney or liver toxicity was seen in any of these five patient groups. Drug intolerance in 10 of the 90 patients studied necessitated discontinuing the chosen regimen, 4 f rom rifampin, 3 f rom dapsone, 2 f rom minocycline and 1 of undetermined attribution. The use of either minocycline or clarithromycin in conjunction with rifampin appears to pose no great risk when used long term.
Un traitement journalier au long cours associant 100 mg de minocycline et 600 mg de rifampine fut administre' chez 24 patients lépromateux (LL) et lépro- matcux borderline (BL), totalisant 646 patients x mois, soit une moyenne de 26,9 mois par patients. Le même traitement fut initié I ) chez 12 patients BLet LL ayant montré une rechute, prouvée à l'examen bactério- scopique, totalisant 379 patients x mois, soit une moyenne de 32.5 mois par patients et 2) chez 12 patients jugés être à fort risque de rechute, totalisant 354 patients x mois, soit une moyenne de 29.5 mois par patients. Un traitement, également caractérisé par des doses journalières associant 500 mg de clarithro- mycine et 600 mg de rifampine fut administré en premier traitement chez 8 patients BL et I.L, totalisant 174 patients x mois, soit 21.8 mois en moyenne par patient. Les résultats de ces 56 patients furent comparés avec ceux obtenus à partir de 34 patients traités en première intention par des doses journalières à long terme associant 100 mg de dapsone et 600 mg de rafampine. Aucun signe de réactions médicamenteuses sérieuses on de toxicité médullaire, rénale ou hépatique ne fut détecté, quelque soit le groupe étudié. Une intolérance médicamenteuse, observée chez 10 de ces 90 patients étudiés, a nécessité l'interruption du traitement sélectionné. 4 provenant d'une intolérance à la rifampine, 3 à la dapsone, 2 à la minocycline et 1 intolerance d'origine indéterminée. L'utilisation de la minocycline ou de la clarithromycine en complément de la rifampine ne semble pas poser de risque séerieux, lorsquie utilisé à long terme.
Diariamente se administraron 100 mg de minociclina y 600 mg de rifampina a 24 pacientes con lepra lepromatosa subpolar (BL) o lepra lepromatosa (LL) sin tratamiento prévio, por un total de 646 paciente-meses (26.9 meses por paciente). El mismo tratamiento fue administrado a 12 pacientes BL y LL con evidencias bacteriológicas de racaída, por un total de 379 paciente-meses (32.5 meses por pacient), y a 12 pacientes en alto riesgo de recaída, por un total de 354 paciente-meses (29.5 meses por paciente). Por otro lado, diariamente se adminstraron 500 mg de claritro- micina y 600 mg de rifampina a 8 pacientes BL y LL sin tratamiento prévio, por un total de 174 paciente- meses y un promedio de 21.8 meses por paciente. Los resultados en estos 56 pacientes fueron comparados con los obtenidos en 34 pacientes BLy LLque fueron tratados con 100 mg de dapsona y 600 mg de rifampina. por períodos similares de tiempo. En ninguno de estos 5 grupos de pacientes se observaron evidencias de reacciones peligrosas, ni de toxicidad en medula ósea, rinón o hfgado. Sin embargo, 10 de los pacientes estudiados mostraron intolerância a alguna de las drogas utilizadas. Los casos de intolerância fueron a la rifampina (cuatro), a la dapsona (tres), a la minociclina (dos), y uno de atribución indeterminada. El uso de minociclina o de claritromicina junto con rifampina parece no representar mayor riesgo cuando se usa en tratamientos de larga duración.

3- Induction of lepromin positivity and immunoprophylaxis in household contacts of multibacillary leprosy patients: a pilot study with a candidate vaccine, Mycobacterium w

Pankaj Sharma; Hemant K. Kar; Harvinder Kaur; Radhey S. Misra; Ashok Mukherjee; Rama Mukherjee; Rajni Rani


We screened 487 household contacts of multibacillary (MB) patients for evidence of disease and their lepromin status. From the 444 results available, 302 (68.02%) were lepromin positive and 142 (31.98%) were lepromin negative on initial testing. The initial lepromin status as assessed in the group of 54 contacts having disease at the outset showed 24 out of 46 (52.2%) to be lepromin positive and 22 of 46 (47.8%) to be lepromin negative. In the same group, among 24 lepromin positives, 22 (91.7%) had paucibacillary (PB) and 2 (8.3%) had multibacillary (MB) disease; among the lepromin negatives, 12 (54.5%) had PB and 10 (45.5%) had MB disease. Out of 72 initially lepromin-negative contacts administered Mycobacterium w vaccine and followed up. the cumulative percentages show that 53 (73.6%) converted lo positivity after a single dose, 10 (87.5%) after a second dose and 67 (93.1%) after the third dose. The incidence of new cases with leprosy was 8 out of 231 (3.46%) among Iepromin- positive contacts and 5 out of 93 (5.38%) among lepromin-negative contacts administered Mycobacterium w vaccine. Among 231 lepromin-positive contacts, the new cases occurred in those with a 1+ and 2+ lepromin response only, and no case occurred among 51 contacts with a 3+ lepromin response. The incidence among lepromin-positive contacts in this study (3.46%) was similar to the observations in two other studies: 3.2% by Dharmendra, et al. and 6.9% by Chaudhary, et at. However, the incidence among lepromin-negative contacts administered Mycobacterium w vaccine was significantly lower than that observed among lepromin-negative contacts not administered any vaccination in the other two studies (14.1 % by Dharmendra, et al. and 29.0% by Chaudhary, et al.). To conclude, although a study of small sample size, the preliminary evaluation indicates that administration of Mycobacterium w vaccine seems to have the potential lo reduce the incidence of leprosy among household contacts of leprosy patients. More explicit results about the vaccine will be available f rom the ongoing field trials in Kanpur Dehat in the near future.
Nous avons étudie 487 personnes habitant sous le même toil que tics patients multibacillaires (MB) pour la présence de signes tic la maladie et le status tie ces patients via-à-vis tie la lépromine. A partir tic 444 données disponibles. 302 (68.02%) étaient positifs a la lépromine, et 142 (31.98% ) étaient négatives lors du premier test. Le statut vis à vis de la lépromine. évalué chez, le groupe de 54 personnes contactes montrant des signes de lèpre au début de l'étude, était de 24/46 (52.2%) positifs et 22/46 (47.8%) négatif à la lépromine. Chez ce même groupe, parmi les 24 cas positifs à la lépromine, 22 (91.7%) souffraient de lèpre pau- cibacillaire (PB) et 2 (8.3%) souffraient de lèpre multi- baeillaire (MB); entre les négatives à la lépromine, 12 (54.5%) souffraient de lèpre paueibacillaire (PB) et 10 (45.5%) souffraient de lèpre MB. Parmi les 72 personnes contactes initialement négatives à la lépromine, chez lesquelles un vaccin utilisant Myœbaclerium vf fut administré, les pourcentages cumulés pendant le suivi ont montré que 53 (73,6%) devenaient positifs au test à la lépromine après la première injection, 63 (87,5%) après la deuxième imjection et 67 (93,1%) après l'injection de la troisième dose. L'incidence de nouveau cas de lèpre était de 8 sur 231 (3,46%) parmi les contacts positifs a la lépromine et 5/93 (5,38%) chez les contacts négatifs à la lépromine chez lesquels un vaccin à My- cobacterium w a été administré. Parmi les 231 contacts positifs à le lépromine, les nouveau cas ont été observés chez ceux montrant une réponse faible ( 1+) à modérée (2+). Aucun nouveau cas ne fut enregistré parmi les contacts montrant une fort réponse (3+). Dans cette étude, l'incidence de lèpre (3.46%) parmi les contacts positifs à la lépromine est comparable à celles observées dans deux autres études: 3.2% pour celle de Dharmen- dra et coll. et 6.9% pour celle de Chaudhary et coll. Cependant, l'incidence parmi les contacts négatifs à la lépromine chez qui un vaccin à Mycobacterium w fut administré était significativement plus basse que celles observées parmi les contacts négatifis à la lépromine n'ayant pas reçu de vaccination (14.1% pour celle de Dharmendra et coll. et 29.0% pour celle de Chaudhary et coll.). Pour conclure, cette étude préliminaire, quoique de faible échantillonnage, indique que l'administration du vaccin basé sur Mycobacterium w semble présenter le potentiel de rédnire l'incidence de la lèpre parmi les personnes vivant sous le même toit que des patients lépreux. Des résultats plus définitifs sur l'impact de ce vaccin seront publiés prochainement à partir d'essais vaccinaux sur le terrain, en cours dans la province de Dehat Kanpur.
Se investigo la presencia de enfermedad y la reactividad a la lepromina en 487 contactos familiares de pacientes con lepra multibacilar (MB). I)e los 444 resultados con los que se puilo contar, 302 (68.02% ) lucrou lepromino-posilivos y 142 (31.98% ) lepromino- negativos en la prueba inicial. Entre los contactos coil evidencias de enfermedad, 24 de 46 (52.2% ) fueron lepromino-posilivos y 22 de 46 (47.8%) lueron lepromino-negativos. En el mismo grupo. 22 de 24 (91.7%) fueron paucibacilers (PB) y 2 (8.3%) lueron multibacilers (MB): entre los lepromino-posilivos. 12 de 24 (54.5%) pacientes lepromino-posilivos lueron paucibacilers (PB) y 10 (45.5%) fueron multibacilares (MB). De 72 contados inicialmente lepromino-negativos. a quienes se vacunó con Mycobacterium w. 53 se tornaron lepromino-posilivos después de una dosis de la vacuna (73.6% ). 10 después de la segunda dosis (87.5% acumulativo), y 4 después de la torcera dosis (93.1 % acumulativo), l.a incidência de nuevos casos do lapra lue del 3.46% (8 do 231 ) entre los contactos lepromino-posilivos y del 5.38% (5 de 93) entre los contactos lepromino-negativos vacunados con Mycobacterium w. Entre los 231 contactos lepromino-posilivos. los casos nuevos ocurrieron solo en aquellos contactos con una respuesta débil a la lepromin (1+ y 2+). Ningún caso nuevo ocurrió entro los 51 contactos con respuostas fuertos a la lepromina (3+). l.a incidência de la enfermedad entre los contactos lepromino-posilivos en este estúdio (3.46%) lue similar a la observada en oiros tios estúdios: 3.2Vi por Dharmendra. et al. y 6.9% por Chaudhary. et al. Sin embargo, la incidência entre los contactos lepromino-negativos vacunados con Mycobacterium w, lue significativamente más haja que la observada entre los contactos lepromino-negativos que no fueron vacunados on los oiros dos estúdios (14.1% por Dharmendra, et al. y 29.0% por Chaudhary, et al.) En conclusion, aunque el estúdio se hizo con una población pequeña, los resultados preliminares indican que la vacunación con Mycobacterium w parece lener cl potencial de reducir la incidência de lepra entre los contactos familiares de los pacientes. Actualmente se realizan estúdios de campo en Kanpur Dehat que darán resultados más explícitos sobre la vacuna.

4- Distinct Patterns of Microvasculature in the Cutaneous Lesions of Leprosy

Gomes Antunes; Ester Motta; Sonia Maria Rocha de Almeida; Maria Eugenia Gallo; Jose Augusto da Costa Nery; Henrique Leonel Lenzi


This work is an investigation on the microvasculature of the cutaneous infiltrates of leprosy witli the immunohistochemical staining of endothelial cells in cutaneous biopsies. Anti-Factor Vlll-related antigen antibody (anti-FVIII-ra) and Ulex Europaeus-1 lectin (UFA-1) binding were utilized as endothelial cell markers. Thirtynine patients grouped according to the Ridley-Jopling classification (14 borderline tuberculoid, 18 borderline lepromatous, 6 lepromatous, and 1 indeterminate leprosy) were selected for this study. Two microvascular architectural patterns could be clearly distinguished: lepromatous lesions presented a dense and tortuous mesh of microvessels among the Mycobacterium leprae-glutted macrophages; whereas the microvessels in the tuberculoid lesions were restricted to the periphery of the granulomas and were not seen among the central epithelioid cells. We were able to distinguish three basic morphological kinds of infiltrate distribution related to the microvessels: micronodules, cords and macronodules. Intensifications of the FVIII-ra immunoreactivity and UEA-1 binding capacity were observed in the endothelial cells of microvessels involved by the inflammatory infiltrate. A distinct cytokine expression profile at the leprosy poles and the role of mast cells in angiogenesis were speculated as factors contributing to these distinct patterns. Growth of the lesion and systemic dissemination of M. leprae in the bipolar spectrum of leprosy may hypothetically be influenced by the vascular-infiltrate relationship. The detection of angiogenesis in the cutaneous lesions of leprosy may bring about alternate and/or additional strategies for leprosy treatment.
Ce travail examine, à partir de biopies cutanées, la microvasculature présente an sein d'inliltrats de lèpre au moyen du marquage immuno-histochimique îles cellules endothéliales. Des anticorps anti-antigènes liés au facteur VIII (anti-FVIIIra) et al lecrine numéro 1 dérivée de Ulex Europaeus (EUA-I) furent utilisés comme marqueurs des cellules endothéliales. Trenteneuf patients, groupés selon la classification de Ridley et Jopling (14 tuberculoïdes borderlines, 18 lépromateux borderlines, 6 lépromateux et une lèpre indéterminée), furent sélectionnés pour cette étude. Deux aspects architecturaux d'arrangement de la microvasculature, clairement séparés, furent identifiés: les lésions lépromateuses montraient un lacis dense et tortueux parmis les macrophages gorgés de Mycobacterium leprue, en revanche, la microvasculature des lésions tuberculoïdes était limitée à le périphérie des granulomes et absente de la zone central composée de cellules épithélioïdes. Nous avons pu distinger, basé sur les microvaisseaux. toris formes morphologiques principales de distribution des infiltrats: des micronodules, des cordons et des macronodules. L'immuno-réactivité de FVIlIra et al capacité de UEA-1 à sc lier aux cellules endothéliales étaient plus intenses lorsque ces dernières formaient I a microvasculature des infiltrais inflammatoires. Les profils très distincts d'expression de cytokines, présents aux pôles du spectre d'expression de la lèpre, ainsi que le rôle des mastocytes dans l'angiogenèse, lurent évoqués comme facteurs possibles contribuant à la présence de ces microvasculatures d'aspect très différent. La croissance de la lésion et la dissémination hématogène de M. leprae en rapport avec le spectre bipolaire de la lèpre pourraient être influencées par la relation vaisseaux-infiltrat. La détection d'angiogenèse dans les lésions cutanées de lèpre pourrait suggérer des stratégies alternes et/ou additionnelles pour le traitement de la lèpre.
En este trabajo se hace una investigation sobre la microvasculatura de las lesiones cutâneas de la lepra, utilizando tinciones histoqiiímicas para células endoteliales. Se utilizo un anticuerpo contra cl antígeno relacionado con cl factor VIII (anti-FVIlIra) y la lectina de Ulex Europaeiis-I (UEA-I ). Dentro de los 39 pacientes incluídos en cl estúdio estuvieron 14 tubereuloides subpolares, 18 leproniatosos subpolares, 6 lepromatosos, y I indeterminado (clasilicación de Ridley y Jopling). Sc ohservaron dos patrones vasculares perfectamente distinguibles: las lesiones lepromatosas presentaron una densa y tortuosa red de vasos microscópicos entre los macrófagos saturados de bacilos mientras que en las lésions tuberucloides la mierofasculatura estuvo restringida a la periferia de los granulomas y no se observo entre las células epitelioides centrales. También pudimos distinguir très tipos básicos de distribución de los infiltrados en las lesiones: micronódulos, cordones y macronódulos. La reactividad más intensa con anti-FVIIIra y con EUA-1, se observo en las células endoteliales de los vasos afectados por cl infiltrado inflamatório. Se propone que los distintos patrones de inliltración y angiogenesis obedeceu a la diferente expresión de citocinas y a la diferente participación de las células cebadas en cada forma polar de la lepra. Hl crecimiento de la lésion y la diseminación sistémica de M. leprae en cl espectro bipolar de la lepra podríaii, hipotéticaniente, verse inlluenciados por la relación entre la microvasculatura y cl infiltrado. La detección de angiogénesis en las lesiones cutâneas de la lepra podría llevar a nuevas estratégias para cl tratamiento de la enfermedad.

5- Epithelioid granuloma in the Iris of a lepromatous leprosy patient; an unusual finding

Ebenezer Daniel; Gigi J. Ebenezer; Timothy J. Ffytche; Arunthathi Sigamani; Charles K. Job


This case report depicts a case of histopathologically confirmed polar lepromatous (LL) leprosy with a bacterial index of 4+. He experienced recurrent episodes of erythema nodosum leprosum (ENL) in the first 5 years after diagnosis. Skin smears became negative after 6 years of dapsone monotherapy and have remained negative since that time. At 23 years after diagnosis, the patient had developed cataracts and underwent intracapsular cataract extractions with broad- based iridectomies. In one of the iris specimens, histopathologic examination revealed a focal granuloma composed of epithelioid cells. Subsequently a lepromin skin test showed a positive Mitsuda reaction with a borderline tuberculoid histopathology. This clearly illustrates the immunological upgrading of a polar lepromatous patient, perceived first in the iris tissue.
Ce cas clinique décrit un exemple confirmé d'un patient atteint de lèpre lépromateuse polaire (LL), avec un index bactérioscopique 4+. E patient a connu des périodes à répétition d'érythème noueux lépreux (ENL) dans les 5 années qui ont suivi le diagnostic. L'examen du suc dermique devint négatif après 6 années de monothérapie à l'aide de dapsone et est resté négatif depuis lors. Vingt-trois années après le diagnostic, ce patient a développé une cataracte bilatérale qui a nécessité une extraction intra-capsulaire des 2 cristallins, accompagnée d'une iridectomie large. Dans l'une des biopsies d'iris, il a été trouvé à l'examen histopathologique un granulome composé de cellules épithélioïdes. Il a été ensuite effectué un test cutané à la lépromine, qui a montré une réaction de Mitsuda caractérisée par des lésions de type tuberuloïde borderline. Ce cas illustre clairement l'amélioration de l'immunité à médiation cellulaire d'un patient lépro- mateux polaire, découvert fortuitement en premier dans le tissu irien.
En esta comunicación se presenta el caso de un paciente con lepra lepromatosa polar (LL) histopatológicamente confirmada, con un índice bacilar de 4+ al momento del diagnóstico. En los primeras 5 anos siguientes a su diagnóstico el paciente presentó vários episódios récurrentes de eritema nodoso leproso (ENL). Los extendidos de linfa cutânea se hicieron negativos después de 6 anos de tratamiento con dapsona y así han permanecido desde entonces. Veintrités anos después, el paciente desarrolló cataratas intracapsulares que le fueron extraídas con iridectomías de base amplia. En uno de los especimenes de iris, el examen hitopatológico revelo un granuloma focal compuesto por células epitelioides. Una prueba con lepromina praeticada después, dio una reacción de Mitsuda positiva, con histopatología tuberculoide subpolar. Los resultados indican una clara conversion immunlógica del estado lepromatoso al estado tuberculoide en este paciente que fue percibida primero en el tejido del iris.

6- Experimental Mycobacterium leprae infection in BALB/c mice: effect of BCG administration on TNF-α production and granuloma development

Fernando Monteiro Aarestrup; Elizabeth Pereira Sampaio; Milton Ozorio de Moraes,4,; Edson C. A. Albuquerque; Ana Paula V. Castro; Euzenir Nunes Sarno


In the present study, the experimental model of Mycobacterium leprae infection in the foot pads of BALB/c mice was used to investigate the effects of BCG administration on tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) production and granuloma development. It was observed that mice intravenously infected with BCG 7 months after M. leprae inoculation into the foot pads presented a more effective mycobacteria clearance, revealed by a significant reduction of BCG-colony forming units in the spleen and by the reduction of acid-fast bacilli (AFB) in the foot pads. BCG infection at the peak of M. leprae infection also modulated the granulomatous response to M. leprae by converting mononuclear granulomas into an epithelioid-cell granuloma. Furthermore, lower TNF-α serum levels were detected in M. leprae-infected mice when compared to mice infected with M. leprae + BCG. An analysis of the TNF-α gene expression in the spleen by semiquantitative reverse transcription-polymerase chain reactions (RT-PCR) demonstrated that co-infection with BCG induced an earlier expression of TNF-α mRNA than in M. leprae-infected mice. The numbers of TNF-α-positive cells and apoptotic cells were also enhanced in epithelioid versus non-epithelioid granulomas. As a whole, the data suggest that co-infection of M. leprae-infected mice with BCG modulates TNF-α synthesis which, in turn, leads to induction of protective epithelioid granuloma formation in the foot pads and subsequent mycobacterial clearance. Macrophage differentiation into epithelioid cells, in association with the enhancement of TNF-α production at the granuloma site, may represent a triggering signal that induced apoptosis in these cells, leading to mycobacterial elimination. Moreover, the rate of apoptosis in epithelioid granulomas may well be related to the extent of immunopathologically mediated tissue damage.
Dans cette étude, le modèle expérimental de l'infection de la patte de souris de souches BALB/e par Mycobacterium leprae fut utilisé pour évaluer les effets de l'administration de bCG sur la production de tumeur necrosis facteur alpha (TNF-α) et le développement de granulomes. Il a été observé que l'infection par voie intra-veineuse de souris par le BCG. 7 mois après l'inoculation de M. leprae dans leurs pattes, favorisait l'élimination des mycobactérics, comme en témoigne une réduction significative du nombre de d'unités de BCG isolées à partir de la rate et capables de former des colonies, ainsi que du nombre de bacilles acido-alcoolo-résistants (BAAR) dans les pattes. L'infection par le BCG au moment du pic d'infection par M. leprae a entraîné la modification de le réponse granulo- mateuse contre M. leprae, de granulomes à cellules mononucléées à des granulomes à cellules de type ép- ithélioïde. De plus des niveaux sériques plus bas en TNF-α furent détectés chez les souris infectées avec M. leprae seule, comparés aux souris infectées par M. leprae et BCG. Une analyse de l'expression du gène TNF-α dans la rate par transcription inverse-réaction de polymérase en chaîne (RT-PCR) a montré une expression plus précoce de l'ARNm de TNF-α chez les souris co-infectées avec le BCG que chez les souris infectées par M. leprae seule. Le nombre de cellules positives pour TNF-α et de cellules en apoptose était aussi augmenté dans les granulomes de type épithélioïdes en comparaison des granulomes non-épithélioïdes. En conclusion, les données suggièrent que la co-infection par le BCG de souris infectées par M. leprae module la synthèse de TNF-α, qui, en retour, conduit à l'induction de granulomes épithélioïdes protecteurs et à l'élimination des mycobactéries. La différentiation des macrophages en cellules épithélioïdes, en association avec l'augmentation de la production de TNF-α au site des granulomes, pourrait représenter un signal clé pour l'induction de l'apoptose de ces derniers, conduisant à l'élimination des mycobactéries. De plus, le taux d'apoptose dans les granulomes épithélioïdes pourrait bien être relié au degré de dommage tissulaïre à médiation immunopathologique.
Se utilizó el modelo de la infeccion de la almo- hadilla plantar del raton BALB/c con Mycobacterium leprae para investigar el efecto del BCG sobre la production de factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y el desarrollo del granuloma. Se observó que los ratones infectados intravenosamente con BCG, siete meses antes de la inoculacion de M. leprae en la almohadilla plantar, presentaron una eficiente depuracion de M. leprae, una reduccion significativa en el numero de unidades formadoras de colonias de BCG en el bazo, y una reduccion en el numero de bacilos acido- resistentes (BAAR) en la almohadilla plantar. La infeccion con BCG en el pico de infeccion con M. leprae tambien modulo la respuesta granulomatosa a M. leprae al convertir los granulomas mononucleares en granulomas epitelioides. Ademas, los niveles de TNF-α en suero fueron más bajos en los animales infectados con M. leprae que en los animales inoculados con BCG y M. leprae. El análisis por RT-PCR de la expresión del gene TNF-α en el bazo mostro que la expresión de mRNA-TNF-α fue más temprana en los ratones coinfectados con BCG que en los animales infectados sólo con M. leprae. En los granulomas epitelioides se encontraron células TNF-α-positivas y células apoptóticas, en números mayores que los encontrados en los granulomas no epitelioides. Los datos sugieren que la coinfección de los ratones con M. leprae y BCG modula la sintesis de TNF-α, lo cual, a su vez, promueve la formación de granulomas epiteliodes protectores en las almohadillas plantares, y la depuración eficiente de las micobacterias. La diferenciación de los macrófagos en células epitelioides, asociada con cl aumento en la producción de TNF-α en el sitio del granuloma, podría representar un senal induetora de apoptosis en estas células que finalmente también con- duciría a la eliminación de Ias micobacterias. Además, la frecuencia de apoptosis en los granulomas epitelioides podría estar relacionada con el grado de dano tisular mediado pro mecanismos inmunopatológicos.

7- Histological assessment of dermal nerve damage occurring during multidrug therapy for leprosy

Mona Jain; Navjeevan Singh; Arati Bhatia; Vinod K. Arora


This is a prospective histomorphological assessment of dermal innervation in biopsies taken before and after multidrug therapy (MDT) f rom 41 leprosy patients: 35 borderline tuberculoid (BT), 3 borderline lepromatous (BL), 3 lepromatous (LL). Biopsies of the same lesions taken before commencement (diagnostic therapy) and at the end of therapy (check biopsy) were compared. Hematoxylin and eosin, immunoperoxidase stain for S-100 protein, and the Holmes' silver impregnation method for nerve cells and fibers were used. Skin biopsies were classified as having detectable or undetectable nerves. Of 35 patients with BT leprosy, 17 had no detectable nerves in their diagnostic biopsies; in the check biopsies of 13 of these 17, dermal nerves remained undetectable, in 2 they were S-100 positive but were Holmes negative. Identifiable dermal nerves were present in diagnostic biopsies f rom 18 patients; in the check biopsies 5 of these 18 had no detectable nerves while in the remaining 13 nerve branches could be detected. The study provides histological documentation of complete damage to dermal innervation in 62.85% (22/35) of patients with BT leprosy, of which 14.28% (5/35) occurred during MDT. Of the patients with detectable dermal innervation at the onset of MDT, 27.7% (5/18) suffered continuing damage during MDT.
Cette étude histomorphométrique prospective a pour but d'évaluer l'innervation dermique de biopsies prélevées avant et après la polychimiothérapie (PCT) chez 41 patients hanséniens: 35 tuberculoïdes borderlines (BT), 3 lépromateux borderlines (BL), 3 lépro- mateux. Les biopsies des mêmes lésions prises avant le début (biopsie diagnostique) at à la fin du traitement (biopsi de contrôle) furent comparées. Les colorations a l'hematoxylin et éosine, l'immunopéroxidase spécifique de la protéine S-100 et l'imprégnation argentique de Holmes furent utilisées pour évaluer les cellules nerveuses et les fibres. Les biopsies cutanées furent classées selon la présence ou l'absence de nerfs. Parmi 35 personnes souffrant de lèpre BT, aucun nerf n'était détectable au sein des biopsies diagnostiques chez 17 patients. Au sein de ces 17 patients sans nerf detectable au moment du diagnostique, les nerfs dermiques restèrent non détectables chez 13 patients lors de l'examen de la biopsie de contrôle. Chez deux patients, ces nerfs ne furent détectés qu'à l'immuno- histochimie pour la protéine S-100 et restèrent négatifs pour l'imprégnation argentique de Holmes. Des nerfs dermiques furent identifiés a l'examen des biopsies diagnostiques chez 18 patients. Cinq de ces 18 patients n'avaient plus de nerf détectable à l'examen de la biopsie de contrôle tandis que des rameaux nerveux pouvaient encore être détectés parmi les 13 patients restants. Cette étude apport l'illustration histopathologique de la destruction complète de l'innervation dermique chez 62.85% (22/35) des patients souffraut de lèpre BT, 14.28% (5/35) ayant eu cette destruction durant la PCT. Parmi les patients ayant une innervation dermique détectable à la mise an oeuvre de la PCT, 27.7% (5/18) ont souffert de lésions progressives durant la PCT.
Este es un estúdio histomorfológico prospectivo de la inervaeión dérmiea en biópsias de 41 pacientes con lepra tomadas antes y despue's del tratamiento con poliquimioterapia (PQT). Las biópsias correspondieron a 35 casos de lepra tuberculoide subpolar (BT), 3 de lepra lepromatosa subpolar (BL) y 3 de lepra lepromatosa (LL). Se compararon las biópsias de las mismas lesiones tomadas antes (biópsias de diagnóstico) y después (biópsias de chequeo) dei tratamiento. Las biópsias se tineron con hematoxilina y eosina, inmunoperoxidase para la proteína S-100. e impregnation argéntica de Holmes para células y fibras nerviosas. Las biópsias se clasificaron como "con nervios détectables" o como "sin nervios détectables." De los 35 pacientes con lepra BT, 17 no tuvieron nervios détectables en sus biópsias de diagnóstico; en las biópsias de chequeo 13 de estas 17 permanecieron sin nervios détectables. Dos biópsias fueron S-100 positivas pero Holmes negativas. Los nervios dérmicos estuvieron presentes en las biópsias de diagnóstico de 18 pacientes; en las biópsias de chequeo, 5 de éstas 18 biópsias no tuvieron nervios détectables, aunque estos si se observaron en las 13 biópsias restantes. El estudio proporciona documentación histológica de daño completo a la inervaeión dérmica en 62.85% (22/35) de los paciente con lepra BT. En el 14.28% (5/35) de los pacientes, el dano ocurrió durante la PQT. De los pacientes con inervaeión dérmica detectable al inicio de la PQT, 27.7% (5/18) sufrieron daiïo continuo durante el tratamiento.

EDITORIAL

8- Survey of newly diagnosed leprosy patients in native and foreign residents of Japan

Norihisa Ishii; Masahito Onoda; Yasuyuki Sugita; Masakazu Tomoda; Motoaki Ozaki


CORRESPONDENCE

10- Drs. Agrawal, et al. reply

Sudha Agrawal; Arun Joshi; Mary Jacob; Shatrughan P. Sah; Arun Agarwalla; Vijay Kumar Garg


13- Disabilities in leprosy

G. Kalla; Dilip Kachhawa; Atul Salodkar


14- Clinical and histopathological correlation in leprosy

G. Kalla; Atul Salodkar; Dilip Kachhawa


NEWS AND NOTES

CURRENT LITERATURE

ACKNOWLEDGMENT

2018 © International Journal of Leprosy and other Mycobacterial Diseases all right reaserved GN1