Vol. 59 N° 1 - Jan/Feb/Mar - 1991

ORIGINAL ARTICLE

1- Multibacillary leprosy presenting as a solitary skin lesion; report of three cases and its significance in control programs

V. Ramesh; Uma Saxena; R. S. Misra; Ashok Mukherjee; S. Ravi


Three patients with solitary skin lesions showing the cardinal signs of leprosy were seen and clinically classified among the paucibacillary cases. Initially, they were treated with two drugs (rifampin and dapsone) as recommended by the WHO Expert Committee. On the first visit of their follow-up, they were seen to be histopathologically either in the borderline (BB) or borderline lepromatous (BL) group, and acid-fast bacilli were demonstrated in the sections. Later they were put on three drugs (rifampin, dapsone and clofazimine) as given for multibacillary cases, and therapeutically they also behaved like bacilliferous leprosy. Such cases are rare and the reasons for the occurrence are not clear. Further studies on the subtle relationship between the local host factors and the virulence of the organisms grown from these lesions may offer an explanation. In light of these cases and previous reports of even lepromatous leprosy presenting as a single skin lesion, field workers-including both medical and paramedical workers-should carefully perform and interpret slit-skin smears from clinically diagnosed paucibacillary cases so that such unusual presentations of the disease are treated appropriately and not missed.
Trois patients avec une lésion cutanée unique et montrant les symptômes cardinaux de la lèpre ont été examinés et classifiés cliniquement comme paucibacillaires. Initialement, ils furent traités avec deux médicaments (rifampicine et dapsone), comme le recommand e le Comité d'Experts de l'OMS. A leur première visite de contrôle, ils furent diagnostiqués du point de vue histopathologiquc comme appartenant soit au groupe borderline (BB) soit au groupe borderline lépromateux, et des bacilles acido-résistants ont été trouvés dans les coupes. On leur a ensuite administré trois médicaments (rifampicine, dapsone et clofaziminc), comme indiqué pour les cas multibacillaires, et du point de vue thérapeutique ils se sont également comportés comme des cas de lèpre bacillifôrc. De tels cas sont rares, et les raisons de leur survenue ne sont pas claires. Des études ultérieures pourraient apporter une explication sur la relation subtile entre les facteurs locaux de l'hôte et la virulence des organismes issus de ces lésions. Au vu de ces cas et de rapports antérieurs de lèpre même lépromateuse avec une seule lésion cutanée, le personnel -y compris médical et paramédical - devrait réaliser et interpréter avec soin les frottis cutanés prélevés chez des malades diagnostiqués cliniquement comme paucibacillaires afin que de telles présentations inhabituelles de la maladie soient correctement traitées et n'échappent pas au diagnostic.
Se estudiaron 3 pacientes con lesiones solitarias de la piel que mostraban los signos cardinales de la lepra y se clasificaron clínicamente como casos paucibacilares. Los pacientes se trataron inicialmcnte con dos drogas (rifampina y dapsona), según las recomendaciones del Comité de Expertos de la OMS. En el primer examen de su seguimiento, los pacientes se clasificaron histopatológicamente dentro del grupo intermedio (BB) o intermedio-lepromatoso (BL), encontrándose bacilos ácido-resistentes en las secciones. Más tarde, los pacientes se trataron con 3 drogas (rifampina, dapsona y clofazimina), como se hace con los casos multibacilíferos. Terapéuticamente, los pacientes también se comportaron como casos bacilíferos. Tales casos son raros y difíciles de explicar. Los estudios más detallados sobre las sutiles relaciones entre los factores locales del huésped y la virulencia de los microorganismos que proliferan en las lesiones podrían ofrecer alguna explicación. Considerand o estos casos y las comunicaciones previas sobre casos lepromatosos que presentan lesiones únicas, se recomienda a los médicos y a los paramédicos la preparación, la observación y la interpretación cuidadosa de los extendidos de linfa cutánea de los casos clasificados clinicamente como paucibacilares, para asegurar que tales casos raros de la enfermedad sean detectados y tratados apropiadamente.

2- Persistent reduced solubilization of immune complexes in lepromatous leprosy patients with reactions

V. D. Ramanathan; Padmawati Tyagi; Usha Ramanathan; Kiran Katoch; Utpal Sengupta; Gopal Ramu


It is held that immune complexes (IC) play a vital role in the pathogenesis of some of the reactions in leprosy. The complement system is known to solubilize and render IC innocuous. We have previously shown that patients undergoing lepra reactions had lowered complement-mediated IC solubilization (CMS). We, therefore, undertook a prospective study of untreated multibacillary leprosy patients and monitored their CMS levels sequentially while on therapy. In addition, the concentrations of the complement component C3d, immunoglobulins G, A and M, and circulating immune complexes (CIC) were also estimated. A total of 26 patients were included in the study and were investigated at 3-month intervals for 3 years. Thirteen of the 14 patients who did not develop reactions at all had normal CMS values, although all of them showed elevated CIC. From the inception of treatment, 10 of the 12 patients who developed lepra reactions had low CM S values which remained below normal levels even after evidence of complement activation disappeared and long after the subsidence of reaction. It is suggested that this defective CMS acts as a predisposing cause of lepra reactions.
Il est admis que les complexes immuns (CI) jouent un rôle vital dans la pathogénèse de certaines réactions observées dan la lèpre. Le système du complément est connu pour rendre soluble et inoffensif les complexes immuns. Nous avons montré précédemment que les patients présentant des réactions lépreuses avaient une diminution de la solubilisation des CI sous la médiation du complément (SMC). De ce fait, nous avons entrepris une étude prospective de lépreux multibacillaires non traités et suivi leurs taux de SMC dans le temps au cours du traitement. De plus, les concentrations du composant C3d du complément, les immunoglobulines G, A et M, et les complexes immuns circulants (CIC) ont été également mesurés. Un total de 26 malades ont été inclus dans l'étude et furent examinés à intervalles de 3 mois pendant 3 ans. Treize des 14 patients qui n'ont pas développé de réaction avaient des valeurs de SMC normales, bien que tous montraient des CIC élevés. Depuis le début du traitement, 10 des 12 patients qui ont développé des réactions lépreuses avaient des valeurs basses de SMC, et celles-ci restèrent inférieures à la normale même après que les signes d'activation du complément aient disparu et longtemps après la fin de la réaction. Ceci suggère que cette SMC déficiente agit comme un facteur prédisposant aux réactions lépreuses.
Se acepta que los complejos inmunes (CI) juegan un papel importante en la patogénesis de algunas de las reacciones de la lepra. Se sabe que el complemento solubiliza y hace inocuos a los CI. Previamente, se ha demostrado que los pacientes que presentan reacciones leprosas tienen disminuida su capacidad de solubilización de CI mediada por complemento (CSMC). Con esta base, empezamos un estudio prospectivo de pacientes con lepra multibacilar sin tratamiento previo en los cuales cuantificamos su CSMC en función del tratamiento. También se cuantificaron sus niveles de C3d, de inmunoglobulinas G, A y M, y de complejos inmunes circulantes (CIC). Se incluyeron 26 patientes que fueron investigados a intervalos de 3 meses durante 3 años. Trece de los 14 pacientes que no desarrollaron reacciones tuvieron valores normales de CSMC, aunque todos mostraron niveles elevados de CIC. A partir del inicio del tratamiento, 10 de los 12 pacientes que desarrollaron reacciones leprosas tuvieron una baja CSMC, que permaneció por debajo de lo normal aún después de que desaparecieron las evidencias de activación del complemento y mucho después de la remisión de la reacción. Se sugiere que esta defectuosa CSMC actúa como causa predisponente de las reacciones leprosas.

3- Indeterminate leprosy: histopathologic and histochemical predictive parameters involved in its possible change to paucibacillary or multibacillary leprosy

M. Denise Takahashi; Heitor F. Andrade Jr.; Alda Wakamatsu; Sheila Siqueira; Thales De Brito


In an attempt to find clinical, bacteriological, histopathological, and immunohistochemical parameters to predict the progress of indeterminate leprosy patients to either paucibacillary (PB) or multibacillary (MB) leprosy, skin biopsies from 51 patients with indeterminate leprosy were retrieved from the files of the São Paulo Health Institute (Brazil). All of these patients had progressed to either PB or MB leprosy over a period of time which varied from 2 months to 24 years. Clinical records were examined, and new sections were cut from the paraffin blocks and stained by hematoxylin-eosin and Fite-Faraco stains; the avidin-biotin peroxidase technique was used with primary antibodies to detect bacillary antigens (anti-BCG serum) and nerve branches (antiS-100 protein anti-serum). A moderate (++) or strongly positive (+ + +) Mitsuda skin test was observed in some patients progressing to PB leprosy. Noteworthy is that even patients initially Mitsuda negative may evolve to PB leprosy, a) A 2+ bacterial index and /or the presence of bacilli, even though few in number, in various dermal structures; b) multiple positive antigen sites as detected by anti-BCG anti-serum; and c) dermal nerve involvement, when evaluated as single parameters, correlated with a progression of indeterminate to MB leprosy. An index resulting from the summation of the above three parameters identified 13 (72%) of 18 of these cases which progressed to MB leprosy.
Dans une tentative de trouver des paramètres cliniques, bactériologiques, histopathologiques et immunohistochimiques pour prédire l'évolution de patients présentant une lèpre indéterminée vers une lèpre soit paucibacillaire (PB), soit multibacillairc (MB), les biopsies cutanées de 51 patients présentant une lèpre indéterminée ont été recherchées dans les dossiers de l'Institut de la Santé de São Paulo (Brésil). Tous ces patients avaient évolué vers une lèpre soit PB soit MB au cours d'une période variant de 2 mois à 24 ans. Les dossiers cliniques furent examinés, et de nouvelles coupes furent faites à partir des blocs de paraffine et colorées à l'hématoxyline-éosine et au Fite-Faraco; la technique de l'avidine-biotine peroxydase fut utilisée avec des anticorps primaires pour détecter les antigènes bacillaires (sérum anti-BCG) et les filets nerveux (antiserum vis-à-vis des protéines anti-S-100). Un test cutané de Mitsuda modéré (++) à fortement (+ + +) positif a été observé chez certains patients évoluant vers la lèpre PB. Il faut noter que même des patients avec un Mitsuda initialement négatif peuvente évoluer vers une lèpre PB. Un index bactérien de 2+ et/ou la présence de bacilles, même en nombre réduit, dans différentes structures dermiques (a); des sites antigéniques positifs multiples comme détectés par l'anti-sérum anti-BCG (b); et un envahissement des nerfs du derme (c), évalués comme paramètres isolés, étaient córreles à une progression de la lèpre indéterminée vers la lèpre MB. Un index résultant de la somme des 3 paramètres ci-dessus identifia 13 (72%) des 18 cas qui ont évolué vers la lèpre MB.
Se reexaminaron las biopsias de piel de 51 pacientes con lepra indeterminada mantenidas en los archivos del Instituto de Salud del estado de Sao Paulo (Brasil), con la intención de encontrar parámetros clínicos, bacteriológicos, histopatológicos, e inmunoquimicos, que pudieran ayudar a predecir el progreso de la enfermedad indeterminada hacia las formas paucibacilar (PB) o multibacilar (MB) de la lepra. Todos estos pacientes habían progresado a la forma PB o MB de la lepra en un periodo que osciló de 2 meses a 24 años. Se examinaron los registros clínicos y se prepararon nuevas secciones de los bloques de parafina las cuales se tiñeron por las técnicas de hematoxilina-eosina y de Fite-Faraco. La técnica de la avidina-biotina-peroxidasa se usó con anticuerpos primarios para detectar antigenos bacilares (con un suero anti-BCG) y ramificaciones nerviosas (con un suero anti-proteína S-100). En algunos de los pacientes que progresaron a la forma PB de la lepra se observó una reacción de Mitsuda moderada (++) o fuertemente positiva (+ + +). Un hallazgo notable fue que aún los pacientes inicialmente Mitsuda negativos pueden evolucionar a la forma PB de la lepra. Los siguientes parámetros: (a) un indice bacteriano de 2 + y/o la presencia de bacilos (aun cuand o sean escasos) en varias estructuras dérmicas, (b) múltiples sitios positivos para antígeno, y (c) afección de nervios, correlacionaron con la progresión de la lepra intermedia a la forma MB de la misma. La suma de los 3 parámetros permitió identificar a 13 (72%) de 18 estos casos que evolucionaron a la forma MB de la lepra.

4- Serum zinc/copper ratio in subtypes of leprosy and effect of oral zinc therapy on reactional states

Joseph George; V. N. Bhatia; S. Balakrishnan; G. Ramu


Serum zinc and copper levels and zinc/ copper ratios were studied in 86 healthy controls, 45 cases of borderline tuberculoid (BT), 31 cases of borderline lepromatous (BL), 117 cases of lepromatous (LL) leprosy patients, 16 cases with severe erythema no dosum leprosum (ENL) reaction, and 16 cases with EN L reaction receiving oral zinc therapy. A significant reduction in serum zinc levels was noticed in all types of leprosy, the maximum decrease being seen in cases with EN L reaction. Conversely, the copper levels were significantly increased from BT to LL cases with EN L reaction in a progressive manner. A very good negative correlation (r = -0.998) was noticed between mean serum zinc and copper levels from healthy controls to active LL cases with EN L reaction. After oral zinc therapy, the serum zinc levels were significantly increased in all of the 16 LL patients with ENL reaction. In contrast, the copper levels were not decreased, indicating that oral zinc therapy can restore normal zinc levels in leprosy patients but is unable to reduce the increased copper levels.
Les taux de zinc et cuivre sériques et les ratios zinc/ cuivre ont été étudiés chez 86 témoins, 45 cas de lèpre borderlinc tuberculoïde (BT), 31 cas de lèpre borderlinc lépromatcuse (BL), 1 17 patients présentant une lèpre lépromatcusc (LL), 16 cas ayant une réaction sévère d'érythème noueux lépreux (ENL) et 16 cas avec un ENL recevant un traitement à base de zinc par voie orale. Une diminution significative des taux de zinc sérique fut notée pour tous les types de lèpre, la diminution maximale étant vue parmi les cas de réaction ENL. Au contraire, les taux de cuivre étaient augmentés de manière signficative et progressivement depuis les cas BT jusqu'aux LL présentant une réaction ENL. Une très bonne corrélation négative (r = -0, 998) fut trouvée entre les taux sériques moyen de zinc et de cuivre depuis les témoins en bonne santé jusqu'aux malades LL actifs avec une réaction ENL. Après traitement au zinc par voie orale, les taux sériques de zinc étaient significativement augmentés chez, tous les 16 patients LL avec une réaction ENL. Par contraste, les taux de cuivre n'étaient pas diminués, indiquant qu'un traitement au zinc par voie orale peut rétablir des taux normaux de zinc chez les malades de la lèpre, mais ne peut faire diminuer les taux augmentés de cuivre.
Se estudiaron los niveles de zinc y cobre, y la relación zinc/cobre, en 86 controles sanos, 45 casos de lepra intcrmcdia-tubcrculoide (BT), 31 casos lepromatosos subpolares (BL), 117 casos lepromatosos (LL), 16 casos con severa reacción tipo eritema nudoso leproso (ENL), y 16 casos con reacción ENL bajo tratamiento con zinc oral. En todos los casos se observó una significante reducción en los niveles séricos de zinc pero ésta fue máxima en los casos con reacción ENL. Por el contrario, los niveles de cobre aumentaron significativa-y progresivamente de los casos BT a los casos LL con reacción ENL. Yendo de los controles sanos a los casos LL activos con reacción ENL, se notó una buena correlación negativa (r = -0.998) entre los niveles medios de zinc y cobre séricos. Después de la terapia con zinc oral, los niveles séricos de zinc estuvieron significativamente elevados en los 16 pacientes LL con reacción ENL pero sus niveles de cobre no estuvieron disminuidos. Esto indica que que la terapia con zinc oral puede restaurar los niveles normales de zinc en los pacientes con lepra pero es incapaz de reducir los niveles de cobre sérico.

5- Detection of phenolic glycolipid-I antigen and antibody in sera from new and relapsed lepromatous patients treated with various drug regimens

Sang-Nae Cho; Roland V. Cellona; Tranquilino T. Fajardo Jr.; Rodolfo M. Abalos; Eduardo C. dela Cruz; Gerald P. Walsh; Joo-Deuk Kim; Patrick J. Brennan


Since phenolic glycolipid-I (PGL-I) is an unequivocal marker of Mycobacterium leprae, the antigen has been a good cand idate for the serodiagnosis and monitoring the effectiveness of leprosy chemotherapy. As an effort to define the kinetics of the PGL-I antigen and its antibodies in leprosy patients, this study was initiated to examine the serum specimens obtained serially from lepromatous patients under chemotherapy trials. PGL-I was detectable in 64 (94.1%) of 68 new lepromatous (bacterial index, BI = 3.2 to 5.8) and in 26 (78.8%) of 33 relapsed lepromatous patients (BI = 3.0 to 5.3). Meanwhile, virtually all of the new and relapsed patients were strongly seropositive to PGL-I. PGL-I was not detectable in any of the patients about 18 months after chemotherapy was initiated; however, anti-PGL-I reactivity declined by 50% at 2 years and by about 70% at 5 years after chemotherapy regardless of the drug regimens under study. Considering the rapid disappearance of the PGL-I antigen and steady decrease in anti-PGL-I IgM antibodies following chemotherapy, the PGL-I-bascd serology may be useful for monitoring the effectiveness of treatment, at both the early and late stages, in leprosy patients whose initial sera contain a significant level of PGL-I antigen or antibodies.
Puisque le glycolipide phénolique-I (PGL-I) est un marqueur spécifique du Mycobacterium leprae, cet antigène a été un cand idat valable pour le diagnostic sérologique et la surveillance de l'efficacité de la chimiothérapie de la lèpre. Dans un effort pour définir la cinétique de l'antigène PGL-I et de ses anticorps chez les malades de le lèpre, cette étude a été entreprise pour examiner les échantillons de sérum obtenus en série chez des patients lépromatcux participant à des essais thérapeutiques. PGL-I a été détecte parmi 64 (94, 1%) de 68 nouveaux lépromatcux (indice bactériologique IB de 3, 2 à 5, 8) et 26 (78, 8%) de 33 cas de rechute lépromatcusc (IB de 3,0 à 5, 3). De même, pratiquement tous les nouveaux cas et les rechutes étaient fortement séropositifs vis-à-vis du PGL-I. Le PGL-I ne put être détecté chez aucun des malades environ 18 mois après le début de la chimiothérapie; cependant la réactivité vis-à-vis du PGL-I a diminué de 50% après 2 ans et d'environ 70% après 5 ans de chimiothérapie, quel que soit le régime thérapeutique étudié. Considérant la disparition rapide de l'antigène PGL-I et la diminution régulière des anticorps IgM anti-PGL-I après la mise sous traitement, la sérolgic vis-à-vis du PGL-I pourrait être utile pour suivre l'efficacité du traitement, aussi bien au début que par la suite, chez des malades de la lèpre dont le sérum initial contient des taux significatifs d'antigènes PGL-I ou d'anticorps.
Puesto que el glicolipido fenólico-I (PGL-I) es un marcador inequívoco del Mycobacterium leprae, este antigeno ha sido un material adecuado para el scrodiagnóstico de la lepra y para el seguimiento de la efectividad de la quimioterapia antileprosa. Con al intención de definir la cinética del PGL-I y de sus anticuerpos en los pacientes con lepra, se inició un estudio en el cual se examinaron las muestras de suero obtenidas en forma seriada de pacientes lepromatosos bajo tratamiento. El PGL-I fue detectable en 64 (94.1%) de 68 casos lepromatosos nuevos (Índice bacteriano, IB, de 3.2-5.8) y en 26 (78.8%) de 33 pacientes lepromatosos recurrentes (IB = 3.0-5.3). Prácticamente todos los casos nuevos y recurrentes fueron fuertemente seropositivos para PGL-I. El PGL-I no fue detectable en ninguno de los pacientes a los 18 meses de iniciado el tratamiento; sin embargo, la reactividad anti-PGL-I disminuyó un 50% a los 2 años y un 70% a los 5 años después de la quimioterapia, y ésto fue independiente del esquema de tratamiento. Considerand o la rápida desaparición del antigeno PGL-I y la disminución gradual de los anticuerpos IgM anti-PGL-I consecuentes a la quimioterapia, la serologia basada en el PGL-I puede ser útil en el seguimiento de la efectividad del tratamiento tanto en las etapas tempranas como en las tardias, sobre todo en aquellos pacientes cuyos sueros iniciales contienen niveles significantes de antigeno PGL-I o de anticuerpos.

6- On the value of sequential serology with a Mycobacterium leprae-specific antibody competition ELISA in monitoring leprosy chemotherapy

Vinita Chaturvedi; Sudhir Sinha; Bhawneshwar K. Girdhar; Utpal Sengupta


The Mycobacterium leprae-specific antibody assays-a serum antibody competition test (SACT-ELISA) for the epitope on the 35-kDa protein, and an enzyme immunoassay for the disaccharide epitope of phenolic glycolipid-I (PGDS-ELISA)-were evaluated as tools for the serological monitoring of chemotherapy in 20 lepromatous and 6 tuberculoid leprosy patients. In addition to estimates for M. leprae-speciñe antibodies, assessments of the bacterial index (BI) and clinical activity of the disease were also carried out prospectively in these patients on two to four occasions over a period of 19 months. In most cases, a decline in the BI, clinical scores, and antibody levels was observed during the course of treatment. The relative rate of decline was steepest and least variable with the SACT-ELISA, followed by the PGDS-ELISA and the BI. In some patients who showed a static or even an increased BI, despite marked clinical improvement, the antibody levels decreased. These data indicate that, unlike the BI, there is a greater dependence of specific antibody levels on the viability of M. leprae. This, combined with the fact that antibody titers would reflect the antigen load in the whole body, makes M. leprae-specific serology a promising tool for monitoring che motherapy in leprosy patients.
Les tests pour les anticorps spécifiques vis-á-vis du Mycobacterium leprae- un test de competition pour les anticorps sériques (SACT-ELISA) vis-á-vis de l'épitope de la protéine de 35 kDa et un test immunoenzymatique pour l'épitope disaccharidique du glycolipidc phcnolique-I (PGDS-ELISA) -ontété evalúes en tant qu'instruments pour la surveillance sérologique de la chimiothérapie chez 20 malades lépromateux et 6 tuberculoïdes. En plus de la recherche des anticorps spécifiques vis-à-vis de M. leprae, des évaluations de l'indice bactérien (IB) et de l'activité clinique de la maladie ont été réalisées de manière prospective chez ces patients de deux à quatre reprises au cours d'une période de 19 mois. Dans la plupart des cas, une diminution de l'indice bactérien, des scores cliniques et des taux d'anticorps ont été observés au cours du traitement. Le taux relatif du déclin était le plus fort et le moins variable avec le SACT-ELISA, suivi par le PGDS-ELISA et l'indice bactérien. Chez certains patients qui ont montré un IB stable ou même en augmentation, malgré une amélioration clinique marquée, les taux d'anticorps ont diminué. Ces données indiquent que, au contraire de l'indice bactérien, il y a une plus grand e dépendance des taux d'anticorps spécifiques vis-à-vis de la viabilité de M. leprae. Ceci, combiné au fait que les titres d'anticorps refléteraient la charge antigénique dans l'ensemble de l'organisme, fait de la sérologie spécifique vis-à-vis de M. leprae un instrument prometteur pour la surveillance de la chimiothérapie chez les malades de la lèpre.
Se evaluaron, comparativamente, dos ensayos para determinar anticuerpos específicos contra Mycobacterium leprae: una prueba de competencia de anticueros por el epitope de la proteína de 35 kDa (SACT-ELISA), y un ensayo enzimático para el disacárido del glicolípido fenólico I (PGDS-ELISA). Los ensayos se usaron para visualizar el efecto de la quimioterapia en 20 pacientes lepromatosos y en 6 pacientes tuberculoides. Adicionalmentc se establecieron el indico bacteriano (IB) y la actividad clínica de la enfermedad de cada paciente en 2 a 4 ocasiones dentro de un periodo de 19 meses. Durate el curso del tratamiento, en la mayoría de los pacientes se observó una declinación en el IB, en los parámetros clínicos y en los niveles de anticuerpos. El grado relativo de declinación fue mas progresivo y menos variable cuand o se analizó por SACT-ELISA que por PGDS-ELISA o por el IB. En algunos pacientes que mostraron un IB estático o incluso incrementado, a pesar de una marcada mejoría clínica, los niveles de anticuerpos disminuyeron. Estos datos indican que los niveles de anticuerpos específicos dependen más de la viabilidad del M. leprae, que del IB. Esto, combinado con el hecho de que los títulos de anticuerpo reflejarían mejor la carga antigénica en todo el cuerpo, hacen a la scrología específica para M. leprae, una herramienta promisoria para visualizar la eficacia de la quimioterapia en los pacientes con lepra.

7- Effect of glucocorticoids and interferon-γ on the oxidative responses of monocytes f rom leprosy patients and normal donors

Mona Vachula; Timothy J. Holzer; Kenrad E. Nelson; Burton R. Andersen


Leprosy patients suffering f rom erythema nodosum leprosum are frequently treated with glucocorticosteroids. The role glucocorticosteroids and interferon-gamma (IFN-γ) play in regulating the interaction of phagocytic cells with Mycobacterium leprae was examined. Monocytes f rom leprosy patients receiving prednisone therapy responded to lower concentrations of IFN-γ in vitro with enhanced superoxide anion release when challenged with M. leprae or M. bovis BCG than did monocytes f rom healthy subjects and other leprosy patients. Although the number of patients was small and the population heterogeneous, the data suggested that prednisone could alter IFN-γ efficacy and led to the examination of the effect of glucocorticosteroids on IFN-γ activation of monocytes. IFN-γ treatment following in vitro dexamcthasone pretreatment of monocytes f rom healthy subjects resulted in a greater enhancement of superoxide anion generation than that observed with IFN-γ treatment alone. These findings are important considerations in evaluating patient immune function because IFN-γ is being used in a number of clinical trials with leprosy patients.
Les malades de la lèpre présentant un crythème noueux lépreux sont fréquemment traités avec des glycocorticostcroïdes. Le rôle que jouent les glycocorlicostéroïdes et l'interfcron-gamma (IFN-γ) dans la régulation de l'interaction des cellules phagocytaires avec Mycobacterium leprae a été examiné. Des monocytes de malades de la lèpre recevant un traitement á la prednisone répondaient in vitro à des concentrations plus faibles d'IFN-γ avec une augmentation de la libération d'anion superoxide en présence de M. leprae ou de BCG de M. bovis que des monocytes en provenance de sujets sains ou d'autres malades de la lèpre. Bien que le nombre de patients était limité et la population hétérogène, les données suggèrent que la prednisone pourrait modifier l'efficacité de l'IFN-γ et ont conduit á examiner l'effet des glycocorticostéroïdes sur ('activation des monocytes par l'IFN-γ. Le traitement par l'IFN-γ suivant un pré-traitement in vitro àla dexaméthasone des monocytes de sujets sains a résulté dans une augmentation de la production d'anion superoxide par rapport à celle observée suite à un traitement par l'IFN-γ seul. Ces observations sont importantes pour l'évaluation de la fonction immunitaire des malades parce que l'IFN-γ est utilisé dans un certain nombre d'essais cliniques avec des malades de la lèpre.
Los pacientes con eritema nudoso leproso frecuentemente son tratados con glucocorticocsteroides. Aquí se examina el papel que juegan los glucocorticocsteroides y el interferon gamma (IFN-γ) en la respuesta de las células fagocíticas al interaccionar con Mycobacterium leprae. Los monocitos de pacientes con lepra bajo tratamiento con prednisona, respondieron in vitro con la producción y liberación de anión superóxido (estimulada con M. leprae o con ,U. bovis. BCG) a concentraciones más bajas del IFN-γ que los monocitos de personas sanas o de otros pacientes con lepra. Aunque el número de pacientes fue pequeño y la población heterogénea, los datos sugirieron que la prednisona podría alterar la eficiencia del IFN-γ. Esto condujo al examen del efecto de los glucocorticocsteroides sobre la activación de los monocitos por el IFN-γ. El tratamiento con IFN-γ posterior al pretratamiento in vitro de los monocitos de individuos sanos con dexametasona, dio como resultado un mayor incremento en la generación de anión superóxido que el incremento observado cuand o el tratamiento fue con IFN-γ solo. Estos hallazgos pueden ser importantes porque el IFN-γ actualmente se está utilizand o en un buen número de ensayos clínicos con pacientes con lepra.

8- Major histocompatibility complex restriction of T-cell suppression of immune response to mycobacteria

Khushroo E. Shroff; Krishna Balaji Sainis; Satya Ranjan Sengupta; Ramesh S. Kamat


In earlier work, intraperitoneal (i.p.) immunization with Mycobacterium vaccae was shown to generate a T-suppressor (Ts) response but intradermal (i.d.) immunization did not. We have now studied the major histocompatibility complex (MHC) restriction of this Ts response. The ability of C57BL/6 (H-2b), BALB/c (H-2d), and the (C57BL/6 x BALB/c) F1 mice to generate suppression after i.p. immunization with 10skilled M. vaccae was investigated. The BALB/c and the F1 mice generated suppression, but the C57BL/6 mice failed to do so. The suppression could be ascribed to Lyt-2 +, L3T4- antigen-specific T cells. The F1 suppressors generated after i.p. immunization could suppress the generation of T-cell responses to i.d. immunization with M. vaccae in the parental BALB/c but not in the C57BL/6 mice. Monoclonal anti-I-A antibody could suppress the antigen-induced proliferative response of mice primed i.d. with M. vaccae. In contrast, monoclonal anti-I-E antibody enhanced antigen-specific proliferation of spleen cells primed i.p. with M.vaccae. The suppressors generated by i.p. priming of mice with M. vaccae could also suppress the in vitro antigen-induced proliferative response of i.d.-primed spleen cells; the suppression could be blocked by anti-I-E antibody. Thus, the T-cell-mcdiated suppression in the above experimental model was I-E restricted. The inability of the C57BL/6 mice to generate suppression after i.p. immunization with M. vaccae was ascribed to the lack of I-E expression by mice of H-2b strain.
Au cours de travaux antérieurs, on a montré que l'immunisation intrapéritonéalc par Mycobacterium vaccae engendrait une réponse des T suppresseurs (Ts), mais l'immunisation intradermique ne le faisait pas. Nous avons à présent étudié la restriction du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) à cette réponse Ts. La capacité des souris C57BL/6 (H-2b), BALB/c (H-2d), et (C57BL/6 x BALB/d) F1 de produire une suppression après immunisation intra-péritonéalc avec 10 M. vaccae tués a été examinée. Les souris BALB/c et F1 ont montré une suppression mais les souris C57BL/6 ne l'ont pas fait. La suppression pouvait être attribuée aux cellules T spécifiques pour les antigènes Lyt-2+ et L3T4-. Les suppresseurs F1 produits après immunisation intra-péritonéale pouvaient supprimer les réponses par les cellules T à l'immunisation intra-dermique avec M. vaccae chez la souche BALB/c mais pour les souris C57BL/6. Les anticorps monoclonaux anti-IA pouvaient supprimer la réponse proliferative induite par l'antigène des souris infectées en intra-dermique avec M. vaccae. Par contre, les anticorps monoclonaux anti-IE augmentaient la prolifération, spécifique pour l'antigène, des cellules spléniques après injection intra-péritonéale de M. vaccae. Les suppresseurs produits par l'injection intra-péritonéalc des M, vaccae à des souris pouvaient aussi supprimer in vitro la réponse proliferative de cellules spléniques à une injection intra-dermique de l'antigène; la suppression pouvait être bloquée par les anticorps anti-IE. Donc, la suppression due à la médiation des cellules T dans le modèle expérimental ci-dessus était restreinte par les I-E. L'incapacité des souris C57BL/6 de produire une suppression après immunisation intra-péritonéalc avec M. vaccae était attribuée au manque d'expression des I-E par les souris de la souche H-2b.
En un trabajo previo, se demostró que mientras que la inmunización intraperitoneal (i.p.) con Mycobacterium vaccae condujo a la generación de células T-supresoras (Ts), la inoculación intradérmica (i.d.) no lo hizo. Ahora hemos estudiado la restricción genética (complejo mayor de histocompatibilidad) de esta respuesta. Se investigó la capacidad de los ratones C5713L/6 (H-2b), BALB/c (H-2J) y de los F1 (C57BL/6 x BALB/ c), para generar supresión después de la inmunización M. vaccae muertos. Los ratones BALB/c y los F| generaron supresión pero los C57B1/6 no lo hicieron. La supresión pudo adscribirse a células T Lyt2 +, L3T4-, específicas para el antígeno. Las células supresoras F1 generadas después de la inmunización i.p., suprimieron las respuestas de las células T a la inmunización i.d. con M. vaccae en los ratones BALB/c pero no en los C57BL/6 paternos. El anticuerpo monoclonal anti-IA pudo suprimir la respuesta proliferativa de los esplenocitos de ratones preestimulados i.d. con M. vaccae. En contraste, el anticuerpo monoclonal anti-I-E aumentó la proliferación inducida por antígeno de las células de bazo estimuladas i.p. conM. vaccae. Las células supresoras generadas por la preinoculación i.p. de los ratones con M. vaccae, también suprimieron in vitro la respuesta proliferativa inducida por antígeno de las células de bazo generadas por inmunización i.d; la supresión pudo bloquearse por anticuerpo anti-I-E. Asi, la supresión mediada por células T en este modelo experimental fue restringida por I-E. La incapacidad de los ratones C57BL/6 para generar supresión después de la inmunización i.p. con M. vaccae, se adscribió a la falta de expresión de I-E por las células de los ratones de la cepa H-2b

9- Proliferative response to seven affinity purified mycobacterial antigens in eight strains of inbred mice

Peter Andersen; Lene Ljungqvist; Kaare Hasløv; Michael Weis Bentzon; Iver Heron


This study compares the T-cell-stimulating ability of different mycobacterial antigens. The responses to crude culture filtrates and seven affinity-purified antigens were investigated in eight strains of inbred mice. Large differences in the stimulating abilities of the antigens were observed, and four antigens were found to give a powerful T-cell stimulation. Some antigens divided the strains into high and low responders, while a 17-kDa antigen was found to be exceedingly T-cell stimulatory in mice of all tested haplotypes. The responses of the eight strains were analyzed by comparing the response patterns of the strains. Using a statistical model based on antigen ranking, five strains were found to have a similar response pattern; three strains were found to differ. These results demonstrate the significance of the choice of mouse strain in studies of mycobacterial immunology and, furthermore, indicate that when research is conducted to develop new mycobacterial vaccines, it is important to include panels of antigens.
Cette étude compare la capacité de différents antigènes mycobacterials de stimuler les cellules T. La réponse à des filtrats de culture non purifiés ont été étudiées chez, huit souches de souris d'élevage. De grand es différences ont été observées dans la capacité stimulante des antigènes, et quatre antigènes ont montré pouvoir provoquer une stimulation puissante des cellules T. Certains antigènes provoquaient une réponse forte ou faible selon les souches de souris, mais un antigène de 17-kDa se montra extrêmement stimulant pour les cellules T chez les souris de tous les haplotypes testés. Les réponses des huit souches ont été analysées en comparant les types de réponse des souches. En utilisant un modèle statistique basé sur le classement antigénique, cinq souches ont montré un type de réponse semblable; trois souches ont montré une réponse différente. Ces résultats démontrent l'importance du choix de la souche de souris dans les études d'immunologie des mycobactéries, et de plus, indiquent que quand une recherche est menée pour développer de nouveaux vaccins vis-à-vis des mycobactéries, il est important d'y inclure de nombreux antigènes.
En este estudióse compara la capacidad de diferentes antigenos micobacterianos para estimular a las células T. Se investigaron las respuestas a filtrados de cultivos micobacterianos crudos y a 7 antigenos purificados por afinidad en 8 cepas de ratones singénicos. Se encontraron grand es diferencias en la capacidad estimulante de los antígenos pero 4 de ellos resultaron fuertemente estimulantes. Algunos antígenos permitieron dividir a las cepas en altas y bajas respondedoras: un antígeno de 17 kDa resultó ser excesivamente estimulante para las células T de los ratones de todos los haplotipos probados. Las respuestas de las 8 cepas se analizaron comparand o sus patrones de respuesta. Usand o un modelo estadístico adecuado, se encontró que 5 cepas tuvieron patrones similares de respuesta; 3 cepas difirieron de las anteriores. Estos resultados demuestran la importancia de escoger las cepas de ratones en los estudios sobre la inmunología micobacteriana y, además, indican que cuand o se hace investigación conducente al desarrollo de nuevas vacunas micobacterianas, es importante incluir varios antigenos.

10- Rifampin in drug-incorporated diet: effect of duration and temperature of storage. Relevance to drug-susceptibility testing in mice inoculated with M. leprae

Betsy Abraham; Annaiah Cariappa; Chinoy J. G. Chacko


This paper is in two parts. Plasma concentrations of rifampin were assayed at 11 time points in 24 hr in mice fed one of three dosages of rifampin, either by gavage or by dietary incorporation. The drug-mixed diets had been stored for a maximum of 3 weeks at 4C or at room temperature (30C35C). The peak concentration of rifampin produced by gavage was approximately 1Vitimes higher than the maximum plasma concentration of the corresponding dosage in fresh diet. Plasma concentrations decreased with the increasing duration of storage of the drug-mixed diet, irrespective of whether the diet was stored at 4C or at room temperature. This decrease was less when the diet was stored at 4C than at room temperature. Drug levels were also assayed in another set of mice selected f rom ongoing drug-susceptibility experiments; these mice were fed a rifampin-incorporated diet stored at room temperature.
The plasma concentrations in these mice, assayed at the time of foot pad harvest, were generally higher than in the 24-hr experiment. The harvest results f rom these mice were compared with the harvest results f rom a third set of mice, also f rom ongoing drug-susceptibility experiments, but fed a rifampin-mixed diet stored at 4C. Multiplicationof Mycobacterium leprae in mouse foot pads was prevented by rifampin mixed in the diet at a dosage of > 0. 003%, whether stored at room temperature or at 4C.
This study defines the criteria for rifampin resistance of M. leprae in the mouse foot pad by discussing methods of rifampin administration, the plasma concentration curves that result, and the effect of these on the multiplication of the organisms in the mouse foot pad.
Cet article comprend ducx parties. Les concentrations plasmatiques de rifampicine ont été dosées à 11 reprises au cours d'un intervalle de 24 h chez des souris auxquelles était administrée de la rifampicine (trois dosages différents ont été utilisés), soit par gavage, soit mélangée à la nourriture. Les aliments additionnés du médicament avaient été conservés pendant un maximum de 3 semaines à 4C, ou à température ambiante (30-35C). La concentration plasmatiquc maximale de rifampicine administrée par gavage était environ une fois et demi supérieure à celle obtenue avec un même dosage administré dans de la nourriture fraîche. Les concentrations plasmatiques diminuaient quand la durée de conservation des aliments additionnés du médicament augmentait, que la conservation ait été faite à 4C ou à température ambiante.
Les concentrations du médicament ont également été dosées chez, un autre groupe de souris qui participaient à des essais sur la susceptibilité médicamenteuse; ces souris ont reçu un régime alimentaire additionné de rifampicine et conservé à température ambiante. Les concentrations plasmatiques observées chez ces souris, dosées au moment du prélèvement du coussinet plantaire, étaient généralement plus hautes que dans l'expérimentation de 24 h. Les coussinets plantaires de ces souris ont été comparés à ceux d'un troisième groupe de souris, participant également à des essais de susceptibilité médicamenteuse, mais dont la nourriture additionnée de rifampicine était conservée à 4C. La multiplication du Mycobacterium leprae était empêchée dans le coussinet plantaire des souris dont l'alimentation était additionnée de rifampicine à une concentration supérieure ou égale à 0. 003%, que celleci ait été conservée à température ambiante ou à 4C.
Ce travail définit les critères pour l'étude de la résistance à la rifampicine de M. leprae au niveau du coussinet plantaire de la souris, en discutant les modes d'administration de la rifampicine, leur influence sur les courbes de concentration plasmatiquc, ainsi que l'influence de la concentration plasmatiquc sur la multiplication des organismes dans le coussinet plantaire de la souris.
Se administraron a ratones, por sonda gstrica o por incorporación de la droga en la dieta, 3 dosis de rifampina. Después de cada dosis se midieron las concentraciones plasmáticas de la droga en 11 ocasiones dentro de las 24 h siguientes a su administración. Las dietas adicionadas de la droga habían estado almacenadas por un máximo de 3 semanas a 4C o a temperatura ambiente (30-35C). El pico de máxima concentración de rifampina producido por sonda gástrica fue aproximadamente 1. 5 veces mayor que el obtenido por incorporación de la droga en la dieta. Las concentraciones en plasma disminuyeron cuand o se incrementó la duración del almacenamiento de la dicta con droga, independientemente de la temperatura de almacenamiento. La disminución fue menor cuand o el almacenamiento fue a 4C.
También se examinaron los niveles de la droga en otra serie de ratones seleccionados de experimentos en desarrollo sobre susceptibilidad a las drogas; estos animales se alimentaron con una dicta adicionada de rafampinaque había sido almacenada a temperatura ambiente. Las concentraciones plasmáticas de rifampina en estos animales, medidas al momento de la remosión de sus almohadillas plantares, fueron generalmente mayores que en los experimentos de 24 h. Los hallazgos en las almohadillas plantares de estos animales se compararon con los de un tercer grupo de animales alimentados con una mezcla de rifampina y dicta almacenada a 4C. La multiplicación del Mycobacterium leprae en las almohadillas plantares del ratón fue evitada por la rifampina incorporada en la dieta a una concentración igual o menor al 0. 003%, independientemente de la temperatura de almacenamiento.
Este estudio define los criterios para resistencia del M. leprae a la rifampina en la almohadilla plantar del ratón, al discutir los métodos de administración de la droga, las curvas de concentración plasmática resultantes, y el efecto de esto sobre la multiplicación de los organismos en la almohadilla plantar del ratón.

11- Inter- and intra-laboratory variation in the reporting of skin smears in leprosy

Betsy Abraham; Annaiah Cariappa


This paper defines the variations in the reporting of skin smears between a base and field laboratory in a leprosy control program. Ten percent of all slides read by the field laboratory in a control area were re-read by the base laboratory. There was almost no variation in the reporting of negative slides, but a variation of 1 + was present in approximately 92% of positive slides. Thus, there was agreement in approximately 8% of positive slides. This paper also defines the variations in the reporting of positive slides under ideal conditions by describing the results of a study on intraand inter-observer variations among technicians at the base laboratory. There was between 45% and 55% agreement within observers and about 36% agreement between observers. The results of both studies are compared. Simple guidelines are derived to monitor the reporting of skin smears in leprosy control programs.
Cet article décrit les variations dans les résultats des frottis cutanés rapportés par un laboratoire central et un laboratoire périphérique dans un programme de lutte contre la lèpre. Dix pourcents de toutes les lames par le laboratoire périphérique d'une région furent relues au niveau du laboratoire central. Il n'y avait pratiquement pas de différence dans les résultats rapportés pour les lames négatives, mais une différence de 1 + était présente pour environ 92% des lames positives. Il y avait donc accord pour 8% des lames positives. Cet article décrit également les variations dans la notification de lames positives dans des conditions idéales en détaillant les résultats d'une étude sur la variabilité inter- et intra-observatcurs parmi les techniciens du laboratoire central. Il y avait un accord intraobservatcurs variant de 45% à 55%, et un accord interobservatcurs d'environ 36%. Les résultats de ces deux études sont comparés. Des directives simples en sont déduites pour contrôler les résultats des frottis cutanés rapportés au niveau des programmes de lutte contre la lèpre.
Este trabajo analiza las variaciones en los reportes de los resultados de extendidos de linfa cutánea entre un laboratorio base y un laboratorio de campo, en un programa de control de la lepra. El 10% de todas las laminillas leídas por el laboratorio de campo en un área controlada fueron releídas en el laboratorio base. Aunque casi no hubieron variaciones en los reportes de las laminillas negativas, en aproximadamente el 92% de las laminillas positivas se encontró una variación de 1 +. Asi, la concordancia fue de aproximadamente el 8% en las laminillas positivas. El trabajo también describe las variaciones en los reportes de las laminillas positivas bajo condiciones ideales al analizar los resultados de un estudio sobre las variaciones intra-e inter-observadores, efectuado en el laboratorio base. La concordancia fue del 45% al 55% dentro de los observadores y de aproximadamente el 36% entre los 59, 1Abraham and Cariappa: Variation in Reporting Skin Smears 81 observadores. Los resultados de ambos estudios se compararon y de aquí se derivaron lincamientos simples para valorar los reportes sobre los extendidos de linfa cutánea en los programas de control de la lepra.

EDITORIALS

CLINICAL NOTES

15- Intralesional variations f rom lepromatous to tuberculoid histology - a case report*

Charles K. Job; Vernia Drain; Robert R. Jacobson; Robert C. Hastings


CORRESPONDENCE

17- S-100 protein marker

Maurice J. Leflord


19- Leprosy as cause of false-positive results in serological assays for the detection of antibodies to HIV-1

Vera Lucia Andrade; Joao Carlos Avelleira; Alfredo Marques; Francisco Reis Vianna; Mauro Schechter


OBITUARY

NEWS AND NOTES

BOOK REVIEWS

CURRENT LITERATURE

U. S. - JAPAN COOPERATIVE MEDICAL SCIENCE PROGRAM

ACKNOWLEDGMENT

2018 © International Journal of Leprosy and other Mycobacterial Diseases all right reaserved GN1