Vol. 60 N° 2 - Apr/May/Jun - 1992

ORIGINAL ARTICLE

1- Relapses in leprosy patients after release from dapsone monotherapy; experience in the leprosy control program of the all Africa Leprosy and Rehabilitation Training Center (ALERT) in Ethiopia

Marijke Becx-Bleumink


Before implementation of multidrug therapy (MDT), leprosy patients who were clinically inactive, skin-smear negative and had been treated with dapsone monotherapy for at least 5 years (paucibacillary patients) or for at least 10 years (multibacillary patients) were released from treatment.
An analysis was made of self-reporting relapses in 1081 paucibacillary (PB) patients and 1123 multibacillary (MB) patients who had been released in Addis Ababa and two rural districts of the leprosy control program of the All Africa Leprosy and Rehabilitation Training Center (ALERT). During an average period of 6.6 years after stopping dapsone, 44 relapses were diagnosed among the PB patients and 148 relapses among the MB patients. The overall relapse rate was 4.1 % or 7.2 per 1000 patient-years after release from treatment for PB patients and 13.2% and 24.8, respectively, for MB patients. The annual relapse rate in PB patients did not differ significantly from year to year. However the relapse rate for MB patients was significantly lower during the fifth to seventh years after stopping treatment compared with the first 4 years. Based on clinical findings there was a strong suspicion of relapse with dapsone-resistant bacilli in 40.4% of MB relapses. It is concluded that the relapse rate for PB patients is acceptable. However, the relapse rate for MB patients is considered too high. It is strongly recommended to administer to all MB patients, including those who have been on long-term treatment with dapsone and have become clinically and bacteriologically inactive, a 2-year course of MDT.
Les malades de la lèpre qui étaient cliniquement inactifs, présentaient des frottis cutanés négatifs et avaient été traités par une monothérapie à la dapsone pendant au moins 5 ans (paucibacillaires) ou au moins 10 ans (multibacillaires) ont été libérés du traitement avant l'application de la polychimiothérapie (PCT).
On a analysé les rechutes notifiées spontanément chez 1081 patients paucibacillaires (PB) et 1123 multibacillaires (MB) qui avaient été libérés du traitement à Addis Abeba et deux districts ruraux du programme de lutte contre la lèpre du "All África Leprosy and Rehabilitation Training Center" (ALERT). Durant une période moyenne de 6.6. ans après l'arrêt de la dapsone, 44 rechutes ont été diagnostiquées parmi les patients PB et 148 rechutes parmi les MB. Le taux global de rechute était de 4.1% ou 7.2 pour 1000 personneannées après l'arrêt du traitement pour les patients PB et 13.2% et 24.8, respectivement pour ls patients MB. Le taux annuel de rechute des patients PB ne variaitpas significativement d'année en année. Cependant, le taux de rechute des patients MB était significativement plus faible de la 5è à la 7è année après l'arrêt du traitement que durant les 4 premières années. Des observations cliniques ont fait suspecter fortement une rechute avec des bacilles résistant à la dapsone chez 40.4% des rechutes MB. On en conclut que le taux de rechute des patients PB est acceptable. Cependant, le taux de rechute des patients MB est considéré comme trop élevé. Il est fortement recommandé d'administrer un traitement PCT de 2 ans à tous les patients MB, y compris ceux qui ont eu un traitement de longue durée à la dapsone et sont devenus cliniquement et bactériologiquement inactifs.
Antes de la implementación de la terapia con multiples drogas (MDT), los pacientes que eran clínicamente inactivos, baciloscopicamente negativos en los extendidos de linfa cutánea, y que se habían tratado con monoterapia con dapsona cuando menos durante 5 años (pacientes paucibacilares) o durante 10 años (pacientes multibacilares), eran dados de alta y liberados del tratamiento.
Se hizo un análisis del número de recaídas observado en 1081 pacientes paucibacilares (PB) y 1123 pacientes multibacilares (MB) que habían sido dados de alta en Addis Ababa y en 2 distritos rurales supervisados por el programa de control de la lepra del All África leprosy and Rehabilitation Training Center (ALERT). Durante un periodo promedio de 6.6 años después de haberse liberado del tratamiento con dapsona, se diagnosticaron 44 recaídas entre los pacientes PB y 148 recaídas entre los pacientes MB. El grado global de recaída fue de 4.1% o 7.2 por 1000 pacientes-años para los pacientes PB y del 13.2% y 24.8, respectivamente, para los pacientes MB. El grado anual de recaída en los pacientes PB no varió significativamente de año a año. Sin embargo, el índice de recaída para los pacientes MB fue significativamente menor entre el quinto y el séptimo año después de haber suspendido el tratamiento y mayor durante los primeros 4 años. Basados en los hallazgos clínicos, hubo una fuerte sospecha de recaída con bacilos resistentes a la dapsona en el 40% de las recaídas MB. Se concluye que el grado de recaída para los pacientes PB es aceptable. Sin embargo, el grado de recaída para los pacientes MB se considera muy elevado. Por esta razón, se recomienda administrar a todos los pacientes MB, incluyendo a aquellos que han estado en tratamiento con dapsona durante mucho tiempo y que se han declarado clínicay bacteriológicamente negativos, un tratamiento de 2 años con MDT.

2- Occurrence of reactions, their diagnosis and management in leprosy patients treated with multidrug therapy; experience in the Leprosy Control Program of the all Africa Leprosy and Rehabilitation Training Center (ALERT) in Ethiopia

Marijke Becx-Bleumink; Debrezion Berne


This paper reports on reactions in leprosy patients who were treated with multidrug therapy (MDT) in the leprosy control program of the All Africa Leprosy and Rehabilitation Training Center (ALERT) in Ethiopia. Only those reactions which occurred in patients who had not been treated with dapsone before MDT and which required treatment with prednisolone were included. Until the end of the second year of MDT a reversal reaction had been diagnosed in 43.6% of 266 borderline lepromatous (BL) patients and in 19.2% of 109 lepromatous leprosy (LL) patients, and an erythema nodosum leprosum (ENL) reaction in 2.7% and 11.1% of the patients, respectively. The reversal reactions were observed in 4.9% of the BL patients and in 0% of the LL patients at the time of diagnosis of leprosy, in 26.3% and 12.8% of the patients during the first year of MDT, and in 12.4% and 6.4% during the second year of MDT. ENL reactions were seen in 0.8% of BL patients at diagnosis, 1.1% in the first year and 0.8% in the second year and 2.8% at diagnosis, 5.5% in the first year, and 2.8% in the second year for LL patients. During a 3½-year period, a total of 405 reactions were diagnosed among multibacillary (MB) patients on MDT; 365 of these reactions (90.1 %) were reversal reactions and only 40 (9.9%) were ENL reactions. The point in time of the reversal reactions showed that the risk of reversal reaction is highest during the first year of MDT. Thereafter there is a gradual decline, although reactions were still observed during the fifth year of MDT. A reversal reaction was diagnosed in 21.0% of 438 BT patients; in 3.4% of the patients the reaction was present at the time of diagnosis of leprosy; in 10.3% it occurred during MDT, and in 7.3% during the first year after release from MDT.
During a period of 3½ years a total of 183 reversal reactions were diagnosed among BT patients. The point in time showed a declining trend in the risk of reversal reaction after starting MDT. The risk is highest during MDT, followed by the first 6 months after stopping MDT. However, reactions, although few, still occurred during the fourth year after stopping MDT .
The analysis of the results of prednisolone treatment in 161 patients who were treated for nerve function loss in the field showed that 142 patients (88.2%) regained complete or partial recovery of the nerve function(s), while no improvement was observed in 19 patients (11.8%). With the criteria defined for field treatment of reactions, about 85% of the patients could be treated with standard courses of prednisolone in the field. The main reasons for referral to the hospital were severe ENL reactions, associated med ical problems whether or not related to leprosy, examination for a possible relapse, recurrent reactions, and deterioration of nerve function. It was estimated that during the period in which all patients who needed prednisolone were required to be hospitalized, less than one third of the patients who developed a reaction were treated for it.
In addition to the finding that substantially more patients will be treated for their reactions if prednisolone is given in the field, other advantages of field treatment over hospital treatment are: a) it is much more convenient and economical for the patients, b) it has a positive effect on the credibility of the leprosy control services, c) it motivates the staff to do regular sensory and voluntary muscle testing, and d) it is substantially less expensive.
Cet article concerne les réactions chez les malades de la lèpre qui ont été traitées par polychimiothérapic (PCT) dans le programme de lutte contre la lèpre du "Ail Africa Leprosy and Rehabilitation Training Center (ALERT)" en Ethiopie. Seules les réactions survenues chez des patients qui N'avaient pas été traités par dapsone avant la PCT et qui nécessitaient un traitement par prednisolone ont été pris en compte. Jusqu'à la FIN de la deuxième année de PCT, une réaction d'inversion a été diagnostiquée chez 43.6% de 266 patients borderline lépromatcux (BL) et 19.2% de 109 patients lépromatcux (LL), et une réaction d'érythème noueux lépromatcux (ENL) chez respectivement 2.7% et 11.1% des patients. Des réactions d'inversion ont été observées chez 4.9% des patients BL et 0% des patients LL au moment du diagnostic de lèpre, chez 26.3% et 12.8% des patients durant la première année PCT, et chez 12.4% et 6.4% durant la deuxième année, contre 2.8% au diagnostic, 5.5% durant la première année et 2.8% durant la deuxième année pour les patients LL.
Durant une période de 3½ ans, un total de 405 réactions ont été diagnostiquées parmi des patients multibacillaires (MB) sous PCT; 365 de ces réactions (90.1%) étaient des réactions d'inversion et seulement 40 (9.9%) étaient des réactions ENL. Le risque de réaction réverse est le plus élevé durant la première année de PCT. Par après, il y a une diminution progressive, bien que des réactions ont encore été observées durant la cinquième année de PCT.
Une réaction d'inversion a été diagnostiquée chez 21.0% de 438 patients BT; chez 3.4% des patients, la réaction était présente au moment du diagnostic de lèpre; chez 10.3% elle survint durant la PCT, et chez 7.3% durant la première année après l'arrêt de la PCT. Durant une période de 3½ ans, un total de 183 réactions d'inversion ont été diagnostiquées parmi les patients BT. Le risque de réaction réverse avait tendance à diminuer après le début de la PCT. Le risque est le plus élevé durant la PCT, puis durant les 6 premiers mois après l'arrêt de la PCT. Cependant des réactions, bien que peu nombreuses, sont encore survenues au cours de la quatrième année après l'arrêt de la PCT.
L'analyse des résultats du traitement à la prednisolone chez 161 patients traités sur place pour perte de fonction nerveuse a montré que 142 patients (88.2%) ont récupéré totalement ou partiellement leur(s) fonction(s) nerveuse(s) tandis qu'aucune amélioration N'a été observée chez 19 patients ( 11.8%). EN se basant sur les critères établis pour le traitement sur place des réactions, environ 85% des patients pouvaient être traités sur place avec des schémas standards de prednisolone. Les raisons principales pour référer à l'hôpital étaient des réactions sévères d'ENL associées à des problèmes médicaux en rapport ou non avec la lèpre, un examen pour une rechute possible, des réactions récidivantes et une détérioration de la fonction nerveuse. Il a été estimé que durant la période au cours de laquelle tous les patients nécessitant de la prednisolone devaient être hospitalisés, moins d'un tiers des patients qui ont développé une réaction ont été traités pour celle-ci.
En plus du fait que significativement plus de patients sont traités pour leurs réactions si la prednisolone est administrée sur place, il y a d'autres avantages à ce traitement de terrain par rapport à l'hospitalisation: a) c'est beaucoup plus pratique et économique pour les patients, b) cela a un effet positif sur la crédibilité des services de lutte contre la lèpre; c) cela motive le personnel à tester régulièrement la sensibilité et les muscles volontaires, et d) c'est significativement moins cher.
Este trabajo se refiere a las reacciones en los pacientes con lepra que fueron tratados con terapia multidroga (MDT) durante el programa de control de la lepra del All Africa Leprosy and Rehabilitation Training Center (ALERT) en Etiopia. Se incluyeron solo aquellos casos de reacciones ocurridas en los pacientes que no habian sido pretratados con dapsona y que requirieron del tratamiento con prednisolona. Hasta el final del segundo año de MDT se había diagnosticado una reacción reversa en el 43.6% de 266 pacientes lepromatosos subpolares (BL) y en el 19.2% de 109 pacientes con lepra lepromatosa (LL), y una reacción tipo eritema nodoso leproso (ENL) en el 2.7% y 11.1% de los pacientes BL y LL, respectivamente. Las reacciones reversas se observaron en el 4.9% de los pacientes BL y en el 0% de los pacientes LL al momento del diagnóstico de la enfermedad, en el 26.3% (BL) y 12.8% (LL) durante el primer año de MDT, y en el 12.4% (BL) y 6.4% (LL) durante el segundo año de MDT. Las reacciones ENL se observaron en el 0.8% de los pacientes BL al tiempo del diagnóstico, 1.1% en el primer año y 0.8% en el segundo año; en los pacientes LL, en el 2.8% en el tiempo del diagnóstico, 5.5% en el primer año, y 2.8% en el segundo año.
Durante un periodo de 3.5 años, se diagnosticaron un total de 405 reacciones entre los pacientes multibacilares (MB) bajo MDT; 305 de estas (90.1%) fueron reacciones reversas y solo 40 (9.9%) fueron reacciones ENL. El análisis de los resultados indicó que el riesgo de las reacciones reversas es mayor durante el primer año de MDT. Después hay una disminución gradual, aunque aun se observaron reacciones durante el quinto año de MDT.
En el caso de la lepra tuberculoide subpolar (BT), se diagnosticaron reacciones reversas en el 21.0% de 438 pacientes BT; en 3.4% de los pacientes la reacción se presentó hacia el tiempo del diagnóstico, en el 10.3% de los casos la reacción apareció durante la MDT, y en el 7.3% de los mismos durante el primer año después de suspenderse el tratamiento. Durante un periodo de 3.5 años se diagnosticaron 183 reacciones reversas entre los pacientes BT. El análisis de los datos indicó que el riesgo de desarrollar una reacción reversa tendió a declinare después de empezar el tratamiento. El riesgo es mayor durante la MDT y menor durante los 6 meses siguientes a la suspensión del tratamiento, aunque algunas reacciones todavía ocurrieron durante el cuarto año después de haber suspendido la MDT.
El análisis de los resultados obtenidos en un grupo de 161 pacientes que fueron tratados con prednisolona por pérdida de función nerviosa, mostró que 142 pacientes (88.2%) recuperaron completa- o parcialmente la función nerviosa perdida mientras que no se observó ninguna mejoría en 19 de los pacientes (11.8%). Con los criterios definidos para el tratamiento ambulatorio de las reacciones, cerca del 85% de los pacientes pudieron ser tratados con esquemas estándar de prednisolona. Las razones principales para hospitalizar a los pacientes fueron reacciones ENL severas, problemas médicos asociados relacionados o no con la lepra, examen de una posible recaída, reacciones recurrentes, y deterioro de la función nerviosa. Se calculó que menos de ⅓ de los pacientes en reacción que necesitaban tratamiento con prednisolona, accedieron a hospitalizarse para recibir el tratamiento.
Además del hallazgo de que substancialmente más pacientes en reacción podrían ser tratados con prednisolona si esta se administra de manera ambulatoria, otras ventajas de este tratamiento sobre el tratamiento intrahospitalario son: (a) que es mâs conveniente para cl paciente, (b) que tienen un efecto positivo sobre la credibilidad de los scrvicios de control de la Lepra, (c) que motiva al Personal para realizarpruebasde funciôn nerviosa de manera regular, y (d) que es mucho mâs barato.

3- Intravascular hemolysis and acute renal failure following intermittent rifampin therapy

Aswani Gupta; Vinay Sakhuja; Krishan Lai Gupta; Kirpal S. Chugh


La insuficiencia renal es una rara complicación asociada con el uso de rifampina. También son extre + ND + madamente raros los casos de hemolisis intravascular que conducen a la insuficiencia renal en los pacientes tratado con este fármaco. En esta comunicación, reportamos el caso de 2 pacientes con lepra que desarrollaron hemolisis c insuficiencia renal aguda como consecuencia de su tratamiento con rifampina.
L'insuffisance rénale est une complication rarement associée à l'utilisation de la rifampicinc. L'hémolyse intravasculaire menant à une insuffisance rénale aigüe suite à un traitement par rifampicinc est extrêmenent rare. On rapporte deux patients lépreux ayant développé une hémolyse et une insuffisance rénale aigüe à la suite d'un traitement par rifampicine.
La insuficiencia renal es una rara complicación asociada con el uso de rifampina. También son extre + ND + madamente raros los casos de hemolisis intravascular que conducen a la insuficiencia renal en los pacientes tratado con este fármaco. En esta comunicación, reportamos el caso de 2 pacientes con lepra que desarrollaron hemolisis c insuficiencia renal aguda como consecuencia de su tratamiento con rifampina.

4- Preliminary study of cellular immunity to Mycobacterium leprae protein in contacts and leprosy patients

Elsa M. Rada S.; Carlos Santaella; Nacarid Aranzazu; Jacinto Convit


Because of the good results obtained in the mononuclear cell (T lymphocyte) proliferative response in tuberculoid leprosy patients and family contacts and healthy Mitsuda-positive volunteers using Mycobacterium leprae soluble extract, we prepared different protein fractions from the soluble extract. We used the T-cell Western blot technique with separation by electrophoresis in SDS-polyacrylamide gels and transfer onto nitrocellulose membranes. Each unstained blot was converted into 18 fractions of antigen-bearing particles and tested with peripheral blood mononuclear cells from 21 individuals including Mitsuda-positive contacts, vaccinated lepromatous leprosy (LL) patients, borderline tuberculoid (BT) patients, and unvaccinated lepromatous patients. The stimulation index (SI) of the contacts was higher to the different fractions in comparison with the leprosy patients. They showed four peaks of stimulation to fractions 66-55, 45-29, 22-18, and 14 kDa. The second highest responders were BT patients, followed by vaccinated LL patients. The unvaccinated patients did not respond significantly to any of the fractions (SI <' 1).
A cause des bons résultats obtenus dans la réponse proliferative des cellules mononucléaires (lymphocytes T) à un extrait soluble de Mycobacterium leprae chez des patients présentant une lèpre tuberculoide et des contacts familiaux et des volontaires en bonne santé positifs au test de Mitsuda, nous avons préparé différentes fractions protéiques à partir de l'extrait soluble. Nous avons utilisé la technique de Western blot des cellules T avec séparation par électrophorèse en gel de SDS-polyacrylamide et transfert sur membrane de nitrocellulose. Chaque "blot" non teinté fut converti en 18 fractions de particules porteuses d'antigènes et testé avec des cellules mononucléaires du sang périphérique de 21 personnes y compris des contacts positifs pour le Mitsuda, des patients lépromateux (LL) vaccinés, des patients borderline tuberculides (BT), et des lépromateux non vaccinés. L'index de stimulation des contacts (IS) était plus élevé pour les différentes fractions par rapport aux malades de la lèpre. Ils ont montré quatres pics de stimulation pour les fractions 66-55, 45-29, 22-18 et 14-kDa. Le deuxième groupe à présenter la réponse la plus forte était les patients BT, suivis par les patients LL vaccinés. Les patients non vaccinés n'ont répondu de manière significative à aucune des fractions (IS < 1).
Las células mononucleares (linfocitos T) de pacientes con lepra tubereuloide, de sus contactos sanos, y de voluntarios sanos no relacionados, proliferan en respuesta al estímulo con un extracto soluble del Mycobacterium leprae. En este estudio se analizó el efecto de diferentes fracciones proteicas del extracto soluble del M. leprae sobre la respuesta proliferativa de las células. El extracto soluble se fraccionó por clectroforésis en poliacrilamida-SDS, las fracciones se transfirieron a membranas de nitrocelulosa, y de cada membrana se prepararon 18 suspensiones de partículas de NC con diferentes fracciones antigénicas. Las partículas se probaron con las células mononueleares de la sangre de 21 individuos (contactos Mitsuda-positivos, pacientes lepromatosos vacunados y no vacunados, y pacientes con lepra tuberculoide subpolar). En general, el índice de estimulación (IE) de los contactos fue mayor que el de los pacientes con lepra. Los contactos mostraron 4 picos de respuesta con las fracciones de 66-55,45-29, 22-18, y 14 kDa. Los segundos mejores respondedores fueron los pacientes con lepra tuberculoide subpolar, seguidos por los pacientes lepromatosos vacunados. Los pacientes lepromatosos no vacunados no respondieron significativamente a ninguna de las fracciones (IE < 1).

5- Sero-lmmunoreactivity of cloned protein antigens of Mycobacterium leprae

Mahfuz B. Khan; Rajashri G. Deshpande; Sandra K. Davidson; Ram G. Navalkar


Sera f rom 173 leprosy patients with various types of disease (tuberculoid = TT, borderline tuberculoid = BT, borderline lepromatous = BL, and lepromatous = LL), 12 intrafamilial contacts, and 40 normal healthy individuals were assayed in an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using Mycobacterium leprae antigens. Recombinant clones carrying M. leprae antigens, namely, Y3184 (12 kDa), Y3179 (18 kDa), Y3164 (28 kDa), Y3180 (36 kDa), and Y3178 (65 kDa) and a cell sonicate f rom armadillo-derived M. leprae were used for the study. A high degree of reactivity with the 65-kDa, 36-kDa, and 28 kDa protein lysates was observed in most of the sera f rom multibacillary patients, with a low degree of positivity with 18 kDa and 12 kDa. Only a few sera f rom paucibacillary patients showed positive reactions. The majority of the contacts' sera tested showed no reactivity with these antigens.
Les serums de 173 patients lépreux présentant différents types de la maladie (tuberculoide = TT, borderline tuberculoide = BT, borderline lépromateux = BL et lépromateux = LL), 12 contacts intrafamiliaux, et 40 individus normaux en bonne santé ont été titrés par un test enzymatique indirect (ELISA) utilisant des antigènes de Mycobacterium leprae. Des clones recombinants porteurs des antigènes de M. leprae Y3184 ( 12 kDa), Y3179 (18 kDa), Y3164 (28 kDa), Y3180 (36 kDa), et Y3178 (65 kDa) et un sonicat cellulaire de M. leprae de tatou ont été utilisés pour cette étude. Un haut degré de réactivité a été observé avec les protéines de 65-kDa, 36-kDa et 28-kDa dans la majorité des serums de patients multibacillaires, et un degré faible de positivité pour les protéines de 18 kDa et 12 kDa. Seuls quelques sérums de patients paucibacillaires ont montré des réactions positives. La majorité des sérums de contacts n'a montré aucune réaction avec ces antigènes.
Usando un inmunoensayo enzimático (ELISA) con antígenos de Mycobacterium leprae se analizaron los sueros de 173 pacientes con diferentes tipos de lepra (tuberculoide, TT; tuberculoide subpolar, BT; lepromatosa subpolar, BL; y lepromatosa, LL), los sueros de 12 contactos familiares y los de 40 individuos sanos no relacionados. Para el estudio se usaron las siguientes clonas recombinantes portadoras de antígenos del M. leprae; Y3184 (12 kDa), Y3179 (18 kDa), Y3164 (28 kDa), Y3180 (36 kDa), y Y3178 (65 kDa), además de un sonicado de M. leprae cultivado en armadillo. En la mayoría de los pacientes con lepra multibacilar se observó un alto grado de reactividad con los lisados conteniendo las proteínas 65 kDa, 36 kDa, y 28 kDa, y un bajo grado de reactividad con las proteínas 18 kDa y 12 kDa. Sólo unos cuantos sueros de los pacientes paucibacilares mostraron reacciones positivas. La mayoría de los sueros de los contactos probados no mostraron reactividad con estos antígenos.

6- Antibody responses to the 18-kDa Protein of Mycobacterium leprae in leprosy and tuberculosis patients

Paul W. Roche; Ross L. Prestidge; James D. Watson; Warwick J. Britton


The 18-kDa protein of Mycobacterium leprae, as recognized by the monoclonal antibody L5, has a restricted species distribution, being confined to M. leprae and M. habana. We have developed a solid-phase ELISA using purified, recombinant M. leprae 18-kDa protein and compared the serological responses of Nepali leprosy and tuberculosis patients and endemic control subjects to the protein and the M . leprae phenolic glycolipid-I (PGL-I). Few control subjects had anti-18-kDa antibodies. A small proportion of paucibacillary (PB) leprosy and 42% of multibacillary (MB) leprosy patients had IgG anti-M leprae antibodies. A similar proportion (47%) of Nepali tuberculosis (TB) patients were seropositive, and IgG anti-18-kDa antibody levels were significantly higher in MB and TB patients than in control subjects. By comparison, IgM anti-PGL-I antibodies were detected in 88% of MB leprosy patients and only 7% of TB patients. The possible reasons for the 18-kDa protein seroreactivity in TB patients are discussed, and the anti-18-kDa assay is compared with other antibody assays for protein and nonprotein antigens of M. leprae. It is concluded that the sensitivity and specificity of the anti-M. leprae 18-kDa ELISA are insufficient for the assay to be of clinical utility in leprosy patients.
La protéine de 18-kDa de Mycobacterium leprae, telle que reconnue par l'anticorps monoclonal L5, a une distribution restreinte pour l'espèce, ne se retrouvant que pour M. leprae et M. habana. Nous avons développé un ELISA en phase solide utilisant la protéine de 18-kDa de M. leprae, purifiée et recombinée, et nous avons comparé les réponses sérologiqucs de patients lépreux et tuberculeux du Népal et des témoins de pays endémiques vis-à-vis de la protéine et du glycolipide phénolique-I (PGL-I). Peu de témoins avaient des anticorps vis-à-vis de la protéine de 18-kDa. Une petite proportion des lépreux paucibacillaires (PB) et 42% des lépreux multibacillaires (MB) avaient des IgG anti-.M. leprae. Une proportion similaire (47%) de patients tuberculeux Népalais (TB) étaient séropositifs, et les taux d'anticorps IgG vis-à-vis de la protéine de 18-kDa étaient significativement plus élevés chez les patients MB et TB que chez les témoins. En comparaison, des anticorps IgM anti-PGL-I ont été détectés chez 88% des patients lépreux MB et seulement 7% des patients TB. Les raisons possibles de la séroréactivité de la protéine de 18-kDa chez, les patients TB sont discutées, et le test vis-à-vis de la protéine de 18kDa est comparé avec d'autres tests pour anticorps visà-vis d'antigènes protéiques et non protéiques de M. leprae. On en conclut que la sensibilité et la spécificité de l'ELISA pour les anticorps anti-18kDa de M. leprae sont insuffisants pour que le test ait une utilité clinique chez les malades de la lèpre.
La proteína de 18 kDa del Mycobacterium leprae reconocida por el anticuerpo monoclonal L5 tiene una distribución restringida y se encuentra confinada al M. leprae y al M. habana. En este estudio, utilizando una técnica inmunoenzimática (ELISA), hemos comparado la reactividad de los sueros de pacientes Nepalences con lepra of con tuberculosis, y de controles sanos de área endémica, con este antigeno recombinante de 18 kDa y con el glicolipido fenólico 1 (PGL-I) del M. leprae. Encontramos que muy pocos individuos control tuvieron anticuerpos anti-18 kDa. Una pequeña proporción de los pacientes con lepra paucibacilar (PB) y 42% de los pacientes multibacilares (MB) tuvieron anticuerpos IgG anti-,M. leprae. Una proporción similar (47%) de los pacientes con tuberculosis (TB) fueron scropositivos, y los niveles de anticuerpo IgG anti-18 kDa fueron significativamente mayores en los pacientes MB y TB que en los sujetos control. Comparativamente, el 88% de los pacientes con lepra MB y solo el 7% de los pacientes TB, tuvieron anticuerpos IgM anti-GLP-1. Se discuten las posibles razones de la seroreactividadade los pacientes TB con la proteína de 18 kDa y se compara el ensayo usando esta proteína, con ensayos para otros anticuerpos contra antígenos proteicos y no proteicos del M. leprae. Se concluye que por su baja sensibilidad y especificidad, el ELISA con la proteína de 18 kDa no resulta de ninguna utilidad clínica para los pacientes con lepra.

7- Relationships between titers of antibodies immunoreacting against glycolipid antigens f rom Mycobacterium leprae and M. tuberculosis, the mitsuda and mantoux reactions, and bacteriological loads: implications in the pathogenesis, epidemiology and serodiagnosis of leprosy and tuberculosis

Hugo L. David; Fernand Papa; Philippe Cruaud; Henry-Christine Berlie; Maria de Fatima Maroja; Julia Ignez Salem; Maria Francisca Costa


Analysis of cell-mediated immunity [(CMI) as judged f rom the Mantoux, Fernandez, and Mitsuda reactions and the presence of granulomas in biopsy material] against humoral immunity (measurements of anti-PGL-I, PGL-Tbl, and SL-IV IgG and IgM antibody titers by ELISA) were performed in selected human populations. The investigations yielded data indicating that humoral (B-cell) responses preceded protective CMI in both tuberculosis and leprosy. The B-cell responses were unrelated to (unfavorable) cell-mediated delayedtype hypersensitivity (DTH). Notwithstanding the difficulty in inferring sequential events f rom studies in humans, it was shown that in humoral responses there was an initial rise of specific IgM immunoglobulins that switched afterward to IgG production during subclinical tuberculosis and leprosy infections. In patent tuberculosis disease the IgM-to-IgG switch was observed in the majority of patients; in patent leprosy disease the switch was impaired in the majority of patients. The clinical, immunological, and laboratory data indicated that the B-cell responses were suppressed as protective CMI was re-established in the patients during the protracted subclinical infection. According to the data, the diagnosis of subclinical tuberculosis and leprosy may be accomplished using ELISA. The yearly risk of tuberculosis in apparently healthy persons but with significant antibody titers was estimated at 44%; the yearly risk for leprosy has not yet been established. The clinical, epidemiologic, and diagnostic implications of these findings are discussed.
L'analyse de l'immunité à médiation cellulaire (CMI) évaluée à partir des réaction de Mantoux, Fernandez, et Mitsuda, et de la présence de granulomes dans le matériel de biopsie comparée à l'immunité humorale (mesure des titres d'anticorps IgG et IgM, vis-à-vis du PGL-I, PGL-Tbl, et SL-IV par ELISA) a été réalisée dans des populations humaines sélectionneées. Les recherches ont fourni des données indiquant que les responses humorales (cellules B) précédaient la protection de l'immunité cellulaire dans la tuberculose et la lèpre. Les réponses des cellules B n'étaient pas associées à une hypersensibilité retardée (défavorable) à médiation cellulaire. Malgré la difficulté de comprendre dès événements successifs à partir d'études dans les populations humaines, on a montré qu'il y avait une augmentation initiale, dans les réponses humorales, des immunoglobulines IgM spécifiques, qui évolue dans la suite vers une production d'IgG durant les infections subeliniques tuberculeuse et lépreuse. Durant la phase de tuberculose-maladie, le glissement d'IgM en IgG a été observé dans la majorité des patients; ce changement était altéré chez la majorité des patients présentant une lèpre symptômatique. Les données cliniques, immunologiques et de laboratoire ont montré que les réponses cellulaires B étaient supprimées tandis que l'immunité cellulaire protectrice était rétablie chez les patients au cours de l'infection subclinique prolongée. D'après les données, le diagnostic de tuberculose et lèpre subcliniques peut être établi par l'ELISA. Le risque annuel de tuberculose chez des personnes apparemment en bonne santé mais avec des titres significatifs d'anticorps a été estimé à 44%, le risque annuel pour la lèpre n'a pas encore ètè déterminé. Les implications cliniques, épidémiologiques et diagnostiques de ces observations sont discutées.
Se analizó la inmunidad mediada por células, CMI (reacciones de Mantoux, de Fernández y de Mitsuda, y presencia de granulomas en biopsias de piel), y la inmunidad humoral (anticuerpos IgG c IgM anti-PGL-I, anti-PGL-TBl, y anti-SL-IV, por ELISAs), en grupos de individuos seleccionados. Los resultados indicaron que las respuestas humorales (células B) precedieron a las respuestas celulares protectoras tanto en lepra como en tuberculosis. Las respuestas de las células B no estuvieron relacionadas con la (desfavorable) hipersensibilidad retardada mediada por células (DTH). No obstante la dificultad para inferir eventos sccuenciales a partir de estudios en humanos, se observó que inicialmente hubo una elevación en los niveles de inmunoglobulinas IgM específicas, que después cambió a la producción de IgG durante las infecciones subclínicas de la lepra y la tuberculosis. En la mayoría de los pacientes con tuberculosis se observó el cambio de IgM a IgG; en la mayoría de los pacientes con lepra este cambio no oceurrió. Los datos clinicos, inmunológicos y de laboratorio, indicaron que al reestablecerse la CMI durante la infección subclinica retardada, se suprimieron las respuestas de las células B. De acuerdo a los resultados, el diagnóstico de la tuberculosis y de la lepra subclínicas, podría hacerse usando la técnica de ELISA. Se estimó que el riesgo anual de tuberculosis en personas aparentemente sanas pero con títulos significativos de anticuerpos fue del 44%; el riesgo anual para los pacientes con lepra no se ha establecido. Se discuten las implicaciones clínicas, epidemiológicas y diagnósticas de estos hallazgos.

8- Human phagocyte respiratory burst by Mycobacterium bovis BCG and M. leprae: functional activation by BCG is mediated by complement and its receptors on monocytes

Pascal Launois; M'Bayame Niang; Alioune Dieye; Jean-Louis Sarthou; Francois Rivier; Jacques Millan


We have measured the role of serum components on two parameters of the phagocytosis reaction: a) the chemiluminescence (CL) response associated with the oxidative respiratory burst in response to Mycobacterium bovis BCG and M. leprae, and b) the uptake of these two mycobacteria by healthy human monocytes. Pre-incubations of fresh or heat-inactivated serum or serum containing EGTA or EDTA indicate that these two mycobacteria activate the alternative complement pathway. Monoclonal antibodies against CR1 and CR3 inhibit the responses of M. bovis BCG and M. leprae, demonstrating that complement receptors mediate the phagocytosis of these two mycobacteria. Thus, complement and its receptors on the surface of the monocytes (CR 1 and CR3) are important in the functional activation of phagocytosis of M . bovis BCG and M. leprae.
Nous avons mesuré le rôle de deux composants sériques sur les paramètres de la phagocytose: a) la réponse chemoluminescente (CL) associée à l'oxydation respiratoire en réponse au BCG de Mycobacterium bovis et au M. leprae; et b) l'ingestion de ces deux mycobactéries par des monocytes humains normaux. La pré-incubation de sérum frais ou inactivé par la chaleur ou du sérum contenant de l'EGTA ou EDTA indique que ces deux mycobactéries activent les voies alternatives du complément. Des anticorps monoclonaux vis-à-vis de CR 1 et CR3 inhibent les responses du BCG de M. bovis et de M. leprae, démontrant que les récepteurs du complément interviennent dans la phagocytose de ces deux mycobactéries. En conséquence, le complément et ses récepteurs sur la surface des monocytes (CRI et CR3) sont importants pour l'activation de la fonction de phagocytose du BCG de M. bovis et de M. leprae.
Se estudió el efecto de algunos componentes del suero sobre dos parámetros de la función fagocítica de los monocitos de personas sanas: (a) la quimioluminiscencia (CL) asociada al estallido respiratorio en respuesta al estímulo con Mycobacterium bovis BCG, y M. leprae y (b) la ingestión de estas dos micobacterias. La preincubación de las micobacterias con suero fresco o suero inactivado por calor, or con suero conteniendo EDTA o EGTA, indicó que las dos micobacterias activan la vía alterna del complemento. Los anticuerpos monoclonales contra CRI y CR3 inhiben la respuesta al M. Bovis BCG y al M. leprae, demostrando que los receptores para complemento participan en la fagocitosis de estas dos micobacterias por los monocitos humanos.

9- Polymerase chain reaction amplifying DNA coding for species-specific rRNA of Mycobacterium leprae

Stefaan R. Pattyn; Dominique Ursi; Margareta leven; Veerle Raes; Pierre Jamet


The sensitivity of the polymerase chain reaction (PCR) on the DNA coding for the species-specific fragment of 16S rRNA of Mycobacterium leprae studied on mouse foot pad harvests and human skin biopsies varies widely between 1 and 3 × 104 organisms. This is probably the result of variations in the proportions of organisms with sufficiently intact DNA suitable for PCR. Preserving human skin biopsies for 3 weeks at an ambient temperature even after boiling for 6 minutes gives rise to a 10-fold decrease in sensitivity. Fixation of tissues in formol 10% or Lowy fixative or preserving in Dubos OAA broth is very harmful to the PCR, mainly due to the enhancement of an inhibitory effect on the PCR reaction. For preservation, the best choice at the moment seems to be alcohol 70%. Sample preparation of five cycles of frcezc-boiling is simple and generally more efficient than proteinase K treatment and DNA extraction.
La sensibilité de la réaction de polymerase en chaîne (PCR) sur le décodage de l'ADN pour le fragment spécifique d'espèce de 16S rRNA de Mycobacterium leprae, étudiée sur des prélèvements du coussinet plantaire de souris et des biopsies cutanées humaines, varie largement entre 1 et 3 × 104 organismes. Ceci est probablement le résultat de variations dans les proportions d'organismes avec un ADN suffisamment intact pour la PCR. La conservation des biopsies cutanées humaines pendant 3 semaines à température ambiante, même après ebullition pendant 6 minutes, diminue la sensibilité d'un facteur de 10. La fixation des tissus dans du formol à 10% ou le fixateur de Lowy ou leur conservation dans le liquide de Dubos OAA est très mauvaise pour la PCR, principalement par la stimulation de l'effet inhibiteur sur la réaction de PCR. Pour la conservation, le meilleur choix pour le moment paraît être l'alcool à 70%. La préparation de l'échantillon en cinq cycles d'ébullition-réfrigération est simple et généralement plus efficiente que le traitement à la proteinase K et l'extraction de l'ADN.
La sensibilidad de la reacción en cadena de la RNA polímera sa (PCR) sobre cl DNA que codifica para cl fragmento de RNA 16S específico del Mycobacterium leprae (aislado de la almohadilla plantar del ratón y de biopsias de piel humana), varía ampliamente entre 1 y 3 × 104 organismos. Esto probablemente se debe a la variación en la proporción de organismos con DNA lo suficientemente intacto como para permitir el análisis por PCR. Si las biopsias de piel humana se mantienen durante 3 semanas a temperatura ambiente, la sensibilidad disminuye unas 10 veces aún después de hervir el material durante 6 min. La fijación de los tejidos en formol al 10% o en fijador de Lowy, o su preservación en caldo Dubos con OAA, también resultan muy perjudiciales para el PCR porque se aumenta el efecto inhibitorio sobre la reacción. Hasta el momento, la mejor forma de preservar el tejido parece ser su inclusión en alcohol al 70%. La preparación del material por cinco ciclos de congelación y ebullición, es simple y generalmente más eficiente que el tratamiento con proteinasa K y extracción del DNA.

10- Isolation of cultivable Mycobacteria f rom feces and lungs of armadillos infected with Mycobacterium leprae

Arvind M. Dhople; Eleanor E. Storrs; Laurie C. Lamoureux


In the past, no cultivable mycobacteria were isolated f rom armadillos captured in the state of Florida, U.S.A. But recent findings of acid-fast bacilli (AFB) in the lungs of armadillos infected with Mycobacterium leprae prompted us to undertake this study to determine the correlation between systemic leprosy infection and the occurrence of cultivable mycobacteria in the lungs and stools of these animals. No AFB could be isolated f rom noninfected animals. Seventy percent of the infected animals developed disseminated infection, but no cultivable mycobacteria were isolated f rom their livers and spleens. However, cultivable mycobacteria were isolated f rom the lungs and stools of a large number of armadillos showing disseminated infection. The most common among these were M. gordonae, M. fortuitum, and M. avium. There was a close correlation between the development of disseminated leprosy infection and the occurrence of cultivable mycobacteria in their lungs and stools, perhaps due to the decline in the immune system in these animals in the later stages of infection.
Dans le passé, aucune mycobactérie cultivable n'a été isolée de tatous capturés dans l'état de Floride, U.S.A. Mais les découvertes récentes de bacilles acidorésislants (BAR) dans les poumons de tatous infectés par Mycobacterium leprae nous a amenés à entreprendre cette étude pour déterminer la relation entre l'infection lépreuses systémique et la présence de mycobactéries cultivables dans les poumons et les selles de ces animaux. Aucun bacille acido-resistant n'a pu être isolé d'animaux non infectés. Septante pourcents des animaux infectes ont développé une infection disséminée, mais aucune mycobactérie cultivable n'a été isolée de leur foie et rate. Cependant, des mycobactéries cultivables ont été isolées des poumons et selles d'un grand nombre de tatous présentant une infection disséminée. Les plus communes parmi celles-ci étaient M. gordonae, M.fortuitum. et M. avium. Il y avait une relation étroite entre le développement d'une infection lépreuse disséminée et la présence de mycobactéries cultivables dans leurs poumons et selles; ceci était peutêtre dû au déclin du système immunitaire chez ces animaux dans les dernières phases de l'infection.
En el pasado no se habian aislado micobacterias cultivables de los armadillos capturados en el estado de Florida, USA. Sin embargo, los recientes hallazgos de bacilos ácido resistentes (AFB) en los pulmones de armadillos infectados con Mycobacterium leprae nos impulsaron a emprender este estudio para determinar la correlación entre la infección leprosa sistémica y la ocurrencia de micobacterias cultivables en los pulmones y excrementos de estos animales. No se aislaron AFB de los animales no infectados. Setenta por ciento de los animales infectados desarrollaron una infección diseminada pero no se aislaron micobacterias cultivables de sus hígados y bazos. En cambio se pudieron aislar micobacterias cultivables de pulmones y excrementos de un gran número do armadillos con infección diseminada. Las micobacterias cultivables más comunes fueron M. gordonae, M.fortuitum, y M. avium. Hubo una estrecha correlación entre el desarrollo de la infección leprosa diseminada y la ocurrencia de micobacterias cultivables en sus pulmones y excrementos, quizá esto se debió a la depresión de la función inmune que ocurre en las etapas tardías de la enfermedad en estos animales.

11- Modulan® grip-aids for leprosy patients

Shantaram Yawalkar, Atul Shah; R. Ganapati; Yan Lian-Bin; Zhang Guo-Chen; Chen Hong; Kennett Westmacott; Werner Osterwalder


Made-to-measure Modulan® grip-aids were fitted to 755 articles for 155 patients with hand deformities due to leprosy. The acceptance of the grip-aids was, in general, good. No instance of contact dermatitis or skin irritation was reported. These grip-aids facilitated a normal grip with crippled hands, and thus considerably improved the quality of the patient's personal and working life. They increased the patient's self-esteem and self-confidence because he/she could handle everyday objects or tools without the help of others and could do his/her job-an important step toward social and economic rehabilitation.
Des poignées de préhension Modulan® faites sur mesure ont été adaptées à 755 articles pour 155 patients présentant des déformités des mains ducs à la lèpre. L'acceptation des poignées fut bonne en général. Aucun cas de dermatite de contact ni d'irritation cutanée n'a été signalée. Ces poignées ont facilité une préhension normale avec des mains infirmes, et ont donc considérablement amélioré la qualité de la vie personnelle et professionnelle des patients. Elles ont augmenté le respect et la confiance en soi des patients, parce qu'il ou elle pouvait utiliser des objets ou outils de tous les jours sans l'aide d'autrui et pouvait réaliser son travail-un pas important vers la réhabilitation sociale et économique.
Se fabricaron, sobre medida, aditamentos Modulan® diseñados para manipular 755 artículos, y se instalaron en 155 pacientes con deformidades en las manos debidas a la lepra. La aceptación de estos aditamentos fue buena en general. No se reportaron casos de dermatitis por contacto o irritación de la piel. El uso de estos aditamentos facilitó el manejo de utensilios por los pacientes con deformidades en las manos y mejoró considerablemente su calidad de vida personal y laboral. Los aditamentos incrementaron la autoestima de los pacientes y la confianza en sí mismos porque ahora pudieron manipular objetos o herramientas de uso rutinario sin la ayuda de otros indivíduos y porque pudicron realizar su trabajo-un paso importante hacia su rehabilitación social y económica.

EDITORIAL

CLINICAL NOTES

13- Role of rifampin and clofazimine ointments in the treatment of leprosy

B. Venkateswarlu; D. Venkataramana; A. V. N. Appa Rao; M. C. Prabhakar; B. Madhava Reddy


The use of rifampin and clofazimine ointments alone and in combination over the patches of tuberculoid patients has a beneficial effect. In combination (rifampin and clofazimine), erythema, inflammation, and edema are considerably reduced. For some of the cases with a recent appearance of a patch, the patch completely disappeared. It is suggested that topical therapy with rifampin and clofazimine ointments would be economical and beneficial in tuberculoid leprosy.

CORRESPONDENCE

15- Severe thrombocytopenia and intermittent use of rifampin

Sérgio de Andrade Nishioka; Isabella Maria Bernardes Goulart; Fátima Regina Freire Nunes-Araújo; Silvio Cesar de Freitas Arantes; Marcius Kleber Nunes Burgarelli; Marcelo Simão Ferreira; Rubens Pereira dos Santos; Valéria Ribeiro Lopes


18- Improved method for purification of Mycobacterium leprae f rom armadillo tissues

Cornelia Rodde; Abdel-Hamid A. F. Mohamed; Hans Gerd Lüesse; Jindrich Kazda


20- Avidin-biotin immunoblotting studies on reactivity of leprosy dera with Mycobacterium leprae antigen

Shripad A. Patil; Lalita Shivraj; Bhawncshwar K. Girdhar; Utpal Sengupta


21- Autoradiographic evidence of reduced epidermal cell proliferation in leprosy patients

Maria Heloisa Rached Palmero; Sérgio Zucoloto; Ithamar Vugman; Raul Negrão Fleury; Emilia Simões Trad


NEWS AND NOTES

CURRENT LITERATURE

ACKNOWLEDGMENT

2018 © International Journal of Leprosy and other Mycobacterial Diseases all right reaserved GN1