Vol. 58 N° 3 - Jul/Aug/Sep - 1990
ORIGINAL ARTICLE
1- Time trends of hansen's disease in Brazil
Celio Paula Motta; Manuel Zuniga G.
In an analysis of the trend of Hansen's disease in Brazil, the "incidence register" or "detection rate" per 100,000 was used. The operational data analyzed were presumed to be related to true incidence because of the time elapsed (38 and 19 years) and because of the large number of cases. The statistical method used was the exponential curve fit. F rom 1950 to 1968, there was an average annual decrease in the rate of 3% as indicated by the regression coefficient (slope), but f rom 1969 to 1987 an increase of 6% per year was observed. If this last trend is sustained, the detection rate in the year 2000 will be 35.03 per 100,000 or, in a population estimated as 190,000,000 inhabitants, 66,600 new cases. For comparison, in 1983 there were 18,759 new cases registered. The trend analysis for each of the Brazilian political-administrative areas (states and territories) is more accentuated in the Center-West and Northeast Mac-roregions, with a slope of 8% and 10%, respectively. In some states, such as Paraíba, Rio Grande do Norte, and Alagoas, there were astonishingly positive slopes of 20%, 18% and 17%, respectively. The distribution of the new cases by clinical forms during most of the period studied (1969-1987) confirms the overall trends observed. There was an increase in the detection rate of the tuberculoid form of 5% annually -compared to the lepromatous (combined with borderline) rate of 3% per year-and, also, the increase in the tuberculoid form was greatest in the Center-West and Northeast Macroregions. In conclusion, there is a strong probability of an increase in the transmission of Hansen's disease in Brazil, a situation of great concern for public health authorities.
Dans une analyse des tendances de la maladie de Hansen au Brésil, 1' "incidence d'enregistrement" ou "taux de détection" pour 100.000 a été utilisé. On a supposé que les données opérationnelles utilisées se rapportaient à l'incidence réelle du fait de l'intervalle de temps écoulé (38 et 19 ans) et du fait du grand nombre de cas. La méthode statistique utilisée fut l'ajustement à une courbe exponentielle. De 1950 à 1968, il y eut une diminution moyenne du taux de 3% par an comme indiqué par le coefficient de régression (pente), mais de 1969 à 1987, on observa une augmentation de 6% par an. Si cette dernière tendance se poursuit, le taux de détection sera en l'an 2000 de 35,03 pour 100.000, soit 66.600 nouveaux cas pour une population estimée à 190.000 habitants. L'analyse effectuée pour chaque région politico-administrative du Brésil (états et territoires), montre une tendance plus accentuée dans les Macrorégions du Centre-Ouest et du Nord-Est, avec des pentes de 8 et 10% respectivement. Dans certains états, comme Paraíba, Rio Grande do Norte et Alagoas, on observa des pentes positives de 20%, 18% et 17% respectivement. La distribution des nouveaux cas par formes cliniques durant la plus grande partie de la période d'étude (1969-1987) confirme les tendances générales observées. Il y eut une augmentation du taux de détection de la forme tub-erculoïde de 5% par an comparé à une augmentation de 3% de la forme lépromateuse (combinée à la forme dimorphe); en outre, l'augmentation observée pour la forme tuberculoïde fut la plus importante dans les Macrorégions du Centre-Ouest et du Nord-Est. En conclusion, il y a une forte probabilité que la transmission de la maladie de Hansen soit en augmentation au Brésil; cette situation est très préoccupante pour les autorités sanitaires.
Se utilizó el "registro de incidencia" o la "frecuencia de detección" por 100,000, para analizar la tendencia de la enfermedad de Hansen en Brasil. Se consideró que los datos analizados estuvieron relacionados con una incidencia verdadera debido al tiempo transcurrido (38 y 19 años) y debido al gran número de casos analizados. El método estadístico usado fue el de ajuste a la curva exponencial. De 1950 a 1968 hubo una disminución anual promedio en la incidencia del 13%, según se dedujo del coeficiente de regresión (pendiente), pero de 1969a 1987 se observó un incremento del 6%. Si esta última tendencia se sostuviera, la frecuencia de detección en el año 2000 sería de 35.03 por 100,000 o de 66,600 casos nuevos en una población estimada de 190,000,000 de habitantes. Para comparación, en 1983 hubieron 18,759 casos nuevos registrados. El análisis de la tendencia para cada área político-administrativa del Brasil (estados y territorios) es más acentuada en las macroregiones centro-occidental y nor-oriental, con pendientes del 8% y del 10%, respectivamente. En algunos estados tales como Paraiba, Rio Grande do Norte, y Alagoas, hubieron pendientes positivas del 20%, 18% y 17%, respectivamente. La distribución de los casos nuevos por forma clínica durante la mayor parte del periodo estudiado (1969- 1987) confirma las tendencias generales observadas. Hubo un incremento en la frecuencia de detección de la forma tuberculoide del 5% anual -comparado con el 3% anual para la forma lepromatosa (combinada con formas intermedias), también, el incremento en la forma tuberculoide fue mayor en las macro regiones centro-occidental y nor-oriental. En conclusión, hay una fuerte posibilidad de un incremento en la transmisión de la enfermedad de Hanscn en Brasil, una situación de gran preocupación para las autoridades de Salud Pública.
2- An unusual case of hansen's disease (lepromatous leprosy) with circulating anticoagulant and macroglobulinemia
Rajendra G. Desai
A 42-year-old Mexican migrant laborer with a previous history of neurofibromatosis presented with a stuffy nose and chronic ulceration of his soft palate. Multiple subcutaneous nodules were found on his skin, and laboratory investigation revealed an elevated activated partial thromboplastin time (APTT). Further laboratory evaluation showed a lupus-like circulating anticoagulant deemed IgM by quantitative immunoglobulin studies. Although coagulation defects in lepromatous leprosy arc rare, the preoperative preparation of a patient with leprosy may require a screening prothrombin time (PT), APTT and platelet count. Abnormalities in these values may indicate the need for specific factor assays and a search for circulating anticoagulant.
Un travailleur emigré mexicain de 42 ans avec une histoire antérieure de neurofibromatose s'est présenté avec un nez encombré et une ulcération chronique du palais. Des nodules sous-cutanés multiples furent trouvés sur sa peau, et les examens de laboratoire ont montré un temps de thromboplastine partielle activée (TTVA) élevé. La poursuite de l'investigation de laboratoire montra des facteurs anticoagulants comme dans le lupus, que des études quantitatives ont révélé être des IgM. Bien que des troubles de la coagulation soient rares dans la lèpre lépromateuse, la préparation pré-opératoire d'un patient atteint de lèpre peut nécessiter la vérification du temps de prothrombine (TP), et le comptage des plaquettes. Des anomalies dans ces valeurs peuvent indiquer le besoin de dosages de facteurs spécifiques et la recherche d'anticoagulants circulants.
Se presenta el caso de un obrero de origen mexicano, de 42 años de edad, con una historia previa de neurofibromatosis, que presentó una nariz congestionada y ulceración crónica del paladar blando. En su piel se encontraron múltiples nodulos subcutáneos y los exámenes de laboratorio revelaron un elevado tiempo parcial de tromboplastina activada (TPTA) y la presencia de un anticoagulante circulante parecido al encontrado en lupus y de clase IgM, según los estudios cuantitativos de inmunoglobulinas. Aunque los defectos de coagulación son raros en la lepra lepromatosa, la preparación prcoperativa de un paciente con lepra puede requerir de la medición del tiempo de protrombina (TP), del TPTA y del número de plaquetas. Las anormalidades de estos valores pueden indicar la necesidad de ensayos para factores específicos y la búsqueda de anticoagulante circulante.
3- Acid-fast bacilli in semen; correlation with bacterial index
Anil Abraham; Surrinder Kaur; Vinod K. Sharma
Thirty multibacillary patients (12 LL, 18 BL) were historically reviewed and clinically assessed for evidence of testicular involvement. The bacterial index (BI) of the patients ranged f rom 1+ to 6 + ; the morphological index (MI), f rom 0% to 3%. Nine (30%) patients had oligospermia, while acid-fast bacilli (AFB) were demonstrable in the semen of 3 (10%) patients (2 LL, 1 BL). There was a significant correlation between the BI and the demonstration of AFB in semen (p < 0.01).
L'histoire de trente patients multibacillaires (12 LL, 18 BL) fut passée en revue et cliniquement évaluée pour mettre en évidence un envahissement testiculaire. L'indice bactériologique (IB) des patients variait de 1 + à 6 + ; l'indice morphologique (IM) de 0% à 3%. Neuf (30%) patients présentaient une oligospermie, et des bacilles acido-résistants (BAR) pouvaient être mis en évidence dans le liquide séminal de 3 (10%) patients (2 LL, 1 BL). Il y avait une corrélation significative entre l'indice bactériologique et la mise en évidence de bacilles acido-résistants dans le liquide séminal (p < 0.01).
Se revisaron las historias clínicas de 30 pacientes con lepra multibacilar (12 LL, 18 BL) y se estableció el grado de afección testicular. El índice bacteriano (BI) de los pacientes osciló de 1+ a 6+ y el índice morfológico (MI) de 0% a 3%. Nueve pacientes (30%) tuvieron oligospermia y en 3 (10%) (2 LL, 1 BL) se encontraron bacilos acido resistentes (BAR) en el semen. No hubo una correlación significante entre el BI y la demostración de BAR en el semen (p < 0.01).
4- Studies of human leprosy lesions in situ using suction-induced blisters. 2. Cell changes and soluble interleukin 2 receptor (Tac peptide) in reversal reactions
David M. Scollard; Vinai Suriyanon; Lertlakana Bhoopat; David K. Wagner; Trevor C. Smith; Kamthorn Thamprasert; David L. Nelson; Choti Theetranont
To examine the pathogenesis of type 1 (reversal) reactions in leprosy, we studied cellular and soluble immunologic components of skin lesions in 10 patients with reactions, 24 active patients without reactions, and 33 control patients whose leprosy had been treated and cured. Cells and Tac-peptide levels were obtained f rom fluid aspirated f rom blisters induced by suction directly over representative skin lesions. During reversal reactions: a) the lesions contained an increased number and percentage of CD4+ (T-helper) cells; b) Tac-peptide levels were elevated in half of the lesions; c) the increases in Tac peptide and CD4+ cells were directly correlated; and d) systemic administration of corticosteroids appeared to cause a reduction in the intrale-sional CD4+ cell population. These findings were localized to the skin, and do not represent simple filtration of these components f rom the peripheral blood. We conclude that spontaneous lymphocyte activation in situ, primarily of CD4+ cells, is an important feature of reversal reactions, and may be an intermittent or cyclic phenomenon during the reaction. Findings in active patients without reactions are consistent with the hypothesis that differing states of immunologic equilibrium have been established in different portions of the leprosy spectrum. In reversal reactions we may, therefore, be examining immunologic processes set in motion when a pre-existing equilibrium has been upset by spontaneous, natural events. The mechanism of such spontaneous changes in immunity in leprosy is of considerable interest, not only to understand the reaction, but also to examine the underlying déterminants of delayed-type hypersensitivity and cell-mediated immunity in leprosy and the potential for artificially manipulating thèse responses, as proposed with vaccines or immunotherapy.
Afin d'étudier la pathogénèse des réactions de type 1 (réverse) dans la lèpre, nous avons étudié les composants immunologiques cellulaires et solubles des lésions cutanées de 10 patients présentant des réactions, de 24 patients actifs sans réactions, et de 33 témoins dont la lèpre avait été traitée et guérie. Les cellules et les taux de peptide Tac furent obtenus à partir d'ampoules produites par aspiration directement au-dessus de lésions cutanées caractéristiques. Durant les réactions réverses: a) les lésions présentaient une augmentation du nombre et du pourcentage de cellules CD4 + (T-helper); b) les taux de peptide Tac étaient élevés dans la moitié des lésions; c) les augmentations des peptides Tac et des CD4 étaient directement córreles; et d) l'administration de corticostéroïdes par voie systémique apparut résulter en une réduction de la population des cellules CD4+ à l'intérieur des lésions. Ces observations étaient bien localisées au niveau de la peau, et ne sont pas dues à une simple infiltration de ces éléments à partir du sang périphérique. Nous concluons qu'une activation lymphocytaire spontanée in situ principalement de cellules CD4 + , est une caractéristique importante des réactions réverses, et peut être un phénomène intermittent ou cyclique durant la réaction. Les observations faites chez des patients actifs ne présentant pas de réactions sont compatibles avec l'hypothèse que différents états d'équilibre immuno-logique se retrouvent à différents niveaux du spectre de la lèpre. Au cours des réactions réverses, nous pouvons dès lors examiner des processus immunologiques déclenchés lorsqu'un déséquilibre pré-existant a été dérangé par des événements spontanés, naturels. Le mécanisme de tels changements spontanés dans l'immunité de la lèpre est d'un intérêt considérable, non seulement pour comprendre la réaction, mais aussi pour étudier les déterminants sous-jacents de l'hypersensibilité retardée et de l'immunité cellulaire dans la lèpre, et la possibilité de manipuler artificiellement ces réponses, comme on se propose de le faire avec des vaccins ou l'immunothérapie.
Para examinar la patogénesis de las reacciones del tipo 1 (reversas) en la lepra, estudiamos los componentes inmunológicos celulares y humorales en las lesiones dérmicas de 10 pacientes con reacción, en 24 pacientes activos sin reacción, y en 33 pacientes control cuya lepra había sido tratada y curada. Los niveles de células y del péptido Tac se midieron en el liquido de ampollas inducidas por succión directa sobre lesiones dérmicas representativas. Durante las reacciones reversas: a) las lesiones contuvieron un número aumentado de células CD4+ (T-cooperadoras), b) los niveles del péptido Tac estuvieron elevados en la mitad de las lesiones, c) los incrementos en los niveles del péptido Tac y de las células CD4+ mostraron una correlación directa, y d) la administración sistémica de corticoes-teroides causó una reducción en la población de células CD4+ intralesionales. Estos hallazgos estuvieron localizados en la piel y no representan una simple filtración de estos componentes a partir de sangre periférica. Concluimos que la activación espontánea de los lin-focitos in situ, fundamentalmente células CD4 + , es una característica importante de las reacciones reversas y puede ser un fenómeno intermitente o cíclico durante la reacción. Los hallazgos en los pacientes activos sin reacción son consistentes con la hipótesis de que se han establecido diferentes estados de equilibrio inmuno-lógico en las diferentes zonas del espectro de la lepra. Por lo tanto, en las reacciones reversas podemos estar examinando procesos inmunológicos desencadenados cuando el equilibrio pre-existente se ha alterado por eventos naturales espontáneos. El mecanismo de tales cambios espontáneos en la inmunidad de la lepra es de considerable interés, no solo para entender la reacción, sino también para entender los mecanismos de la inmunidad celular y la hipersensibilidad retardada en la lepra, con miras a su posible manipulación por vacunación o inmunoterapia.
5- Operational value of serological measurements in multibacillary leprosy patients: clinical and bacteriological correlates of antibody responses
Paul W. Roche; Warwick J. Britton; Sarah S. Failbus; David Williams; Hira M. Pradhan; Wim J. Theuvenet
The antibody responses of 100 previously untreated multibacillary (MB) leprosy patients to one protein and two carbohydrate antigens were examined: 94% of the patients had Mycobacterium leprae-specific antibodies; 89% directed to the species-specific epitope on phenolic glycolipid (PGL-I), 89% against the specific epitope on the 35-kDa protein, and 94% against one or both of the two. By contrast, 67% of the patients had anti-lipoarabinomannan (LAM) antibodies. There were trends for the seropositivity rate and the antibody level to rise with the increasing extent of the disease and as patients moved to the polar lepromatous end of the spectrum. The bacillary load, as measured by the bacterial index, was moderately correlated with the IgM anti-PGL-I and the anti-35-kDa antibody levels and, to a lesser extent, with the IgG antibodies directed at the common mycobacterial carbohydrate LAM. The sensitivity of the IgM anti-PGL-I antibodies for detecting smear-positive MB disease was 91%; that for the anti-35-kDa antibodies was 92%.
Les réponses en anticorps pour deux hydrates de carbone ct pour une protéine antigéniques ont été étudices chez 100 malades atteints de lèpre multibacillaire (MB) et non traités. Des anticorps spécifiques pour Mycobacterium leprae ont été relevés chez 94% des malades; 89% présentaient des anticorps dirigés contre l'épitope, spécifique d'espèce, de l'antigène phénogly-colipidique (PGL-I), 89% révélaient des anticorps contre l'épitope spécifique situé sur la protéine 35-kDa, et 94% contre l'un et l'autre de ces deux epitopes. Par contre, 67% des malades révélaient la présence d'anticorps anti-lipoarabinomannan (LAM). On a relevé une tendance à une élévation du taux de séropositivité et des taux d'anticorps correspondant à l'étendue de la maladie, et ceci d'autant plus que le type clinique présenté par les malades se rapprochait du pôle lépromateux du spectre. La charge bacillaire, telle qu'elle a pu être mesurée par l'index bactériologique, présentait une certaine corrélation avec les taux d'anticorps IgM anti-PGL-I et anti-35-kDa, et dans une moindre mesure, avec les taux d'anticorps IgG dirigés contre l'hydrate de carbone LAM commun aux mycobactérics. La sensibilité des anticorps IgM anti-PGL-I pour détecter une lèpre multibacillaire à frottis positif était de 91%; cette sensibilité était de 92% pour les anticorps anti-35-kDa.
Se examinó la respuesta en anticuerpos de 100 pacientes con lepra multibaciiar (MB) en contra de un antígeno proteico y 2 carbohidratos del Mycobacterium leprae: 94% de los pacientes tuvieron anticuerpos específicos contra el M. leprae; 89% dirigidos contra el epitope especifico de la especie en el glicolípido fenólico 1 (PGL-1), 89% contra el epitope específico sobre la proteína de 35 kDa, y 94% contra uno de ellos o contra ambos. En contraste, el 67% de los pacientes tuvieron anticuerpos anti-lipoarabinomanana (LAM). La frecuencia de seropositividad y los niveles de anticuerpos tendieron a aumentar conforme aumentaba el grado de la enfermedad y conforme ésta se acercaba al extremo lepromatoso del espectro. La carga bacilar, medida por el índice bacteriano, correlacionó moderadamente con los niveles de anticuerpos IgM anti-PGL-ly anti-35 kDa, y en menor grado con los niveles de anticuerpos IgG anti-LAM. La sensibilidad de los anticuerpos IgM anti-PGL-1 para detectar la enfermedad MB fue del 91%, la sensibilidad de los anticuerpos anti-35 kDa fue del 92%.
6- Quantitation of IgM antibodies to the M. leprae synthetic dissacharide can predict early bacterial multiplication in leprosy
Rabia Hussain; Sarwat Jamil; Arnawaz Kifayet; Fatima Firdausi; Hazel M. Dockrell; Sebastian Lucas; Rumina Hasan
Quantitative enzyme-linked immunosorbent assays detecting IgM to the soluble Mycobacterium leprae crude sonicate (CD75) and the synthetic disaccharide antigen coupled to bovine serum albumin (ND-BSA) were assessed for their ability to determine early infection in families/household contacts of leprosy patients and employees of a leprosy center working in close contact with leprosy patients. Although IgM to both antigens (CD75 and ND-BSA) correlated with the bacterial index (BI) assessed histologically on skin-biopsy samples, the level of IgM antibodies to ND-BSA was a much more sensitive indicator of low bacterial loads. A 4.4-fold difference in antibody levels was observed between the mean group levels of endemic controls (N = 116) and tuberculoid leprosy patients with a BI of 0 (N = 88), increasing to sevenfold in tuberculoid leprosy patients with a BI of 1 (N = 20). Using a statistical cut off with endemic controls (mean + 2 S.D.), household/family contacts showed 30% seropositivity (N = 180) as compared to staff contacts who showed 17% seropositivity (N = 55). Percent seropositivity in family contacts was not related to the type of leprosy of the index case (lepromatous vs. tuberculoid) or the duration of treatment of the index case. Age of the individual in the family contact group had a significant influence on seropositivity. These results support the hypothesis that, in this community, factors other than the viable bacterial load of the index case, such as genetic susceptibility, may be influencing the high rate of seropositivity in family contacts. IgM ND-BSA antibodies seem to provide a good indicator of low antigenic loads and could prove to be useful in detecting subclinical infection before the onset of dis-ease. Follow-up studies of these seropositive individuals are in progress to understand the relationship between seropositivity and the progress of clinical disease.
Des titrages enzymatiques quantitatifs (ELISA) pour la détection d'IgM vis-à-vis du sonicat brut soluble (GD75) de Mycobaclerium leprae et l'antigène disac-charide synthétique couplé à l'albumine sérique bovine (ND-BSDA) furent évalués quant à leur capacité de révéler précocement l'infection parmi des contacts familiaux/domiciliaires de patients lépreux et des employés d'un centre de lèpre travaillant en contact étroit avec des patients. Bien que les IgM vis-à-vis des deux antigènes (CD75 et ND-BSA) étaient en relation avec l'indice bactériologique (IB) évalué histologiquement sur des échantillons de biopsies cutanées, le niveau des anticorps IgM vis-à-vis de ND-BSA était un indicateur beaucoup plus sensible des faibles charges bactériennes. Une différence d'un facteur de 4,4 fut observée entre les taux moyens d'anticorps du groupe témoin de milieux endémiques (N = 116) et les lépreux tub-erculoïdes ayant un IB égal à 0 (N = 88); cette différence augmente à sept fois pour les lépreux tuberculoïdes ayant un IB de 1 (N = 20). Utilisant un seuil statistique par rapport aux témoins des milieux endémiques (moyenne + 2 S.D.), les contacts familiaux/domiciliaires ont montré 30% de séropositivité (N = 180), par rapport au personnel en contact avec les patients, qui ont montré une séropositivité de 17% (N = 55). Le pourcentage de positivité parmi les contacts familiaux ne dépendait pas du type de lèpre du cas index (lépromateux vs tuberculoïde) ni de la durée du traitement du cas index. L'âge des individus dans le groupe des contacts familiaux avait une influence significative sur la séropositivité. Ces résultats supportent l'hypothèse que, dans cette communauté, des facteurs autres que la charge bactérienne viable du cas index, tels que la susceptibilité génétique, peuvent influencer le taux élevé de séropositivité parmi les contacts familiaux. Les anticorps IgM vis-à-vis de ND-BSA semblent fournir un bon indicateur de charges antigéniques faibles, et pourraient se révéler utiles dans le détection de l'infection subclinique avant l'éclosion de la maladie. Des études de suivi de ces individus séropositifs sont en cours, dans le but de comprendre la relation entre la séropositivité et le développement de la maladie clinique.
Se usaron ensayos inmunoenzimáticos para detectar la infección leprosa temprana en base a la presencia de IgM contra un sonicado crudo (CD75) de Mycobacterium leprae y contra el disacárido sintético acoplado a albúmina sérica bovina (ND-BSA) en el suero de convivientes y familiares en contacto con pacientes con lepra y en el suero de empleados de un centro lepro-lógico en estrecho contacto con los pacientes. Aunque los anticuerpos IgM contra ambos antigenos (CD75 y ND-BSA) correlacionaron bien con el índice bacteriano (BI) establecido por el estudio histológico de las biopsias de piel, el nivel de anticuerpos contra el ND-BSA fue el indicador más sensible cuando las cargas bacterianas fueron bajas. Se observó una diferencia de 4.4 veces en los niveles de anticuerpos entre los controles endémicos (N = 116) y los pacientes con lepra tuberculoide con un BI de 0 (N = 88), y de 7 veces en los pacientes tubereuloides con un BI de 1 (N = 20). Haciendo las correcciones estadísticas en relación a los controles endémicos (media + 2 D.E.), los convivientes y familiares mostraron un 30% de seropositividad (N = 180) en comparación con los contactos del centro lcprológico quienes mostraron una seropositividad del 17% (N = 55). El porcentaje de seropositividad en los contactos familiares no estuvo relacionado con el tipo de lepra del caso índice (lepromatoso vs tuberculoide) ni con la duración de su tratamiento. La edad de los individuos en el grupo de contactos familiares tuvo una influencia importante en la seropositividad. Estos resultados apoyan la hipótesis de que, en esta comunidad, otros factores diferentes a la carga bacteriana viable, tales como la susceptibilidad genética, pueden influir en la alta frecuencia de seropositividad en los contactos familiares. Los anticuerpos IgM anti-ND-BSA, parceen scr un buen indicador de bajas cargas antigénicas y pueden resultar utiles en la detección de la infección subclínica antes de que la enfermedad se haga aparente. Los estúdios de seguimiento de estos indivíduos seropositivos para establecer la relación entre seropositividad y progreso de la enfermedad, se encuentran actualmente en desarrollo.
7- Sequential monitoring of leprosy patients with serum antibody levels to phenolic glycopipid-I, a synthetic analog of phenolic glycolipid-I, and mycobacterial lipoarabinomannan
Harry C. Meeker; Georgia Schuller-Levis; Francesca Fusco; Marie-Anne Giardina-Becket; Eugene Sersen; William R. Levis
Sequential serum samples f rom leprosy patients at various stages of antibacterial treatment were tested by an ELISA for antibodies to phenolic glycolipid I (PGL-I), a synthetic PGL-I analog (ND-BSA), and li-poarabinomannan (LAM) f rom Mycobacterium tuberculosis to determine if these antibodies could be useful in monitoring response to therapy. Among patients with positive initial anti-PGL-I IgM, a significant decrease in this antibody was seen over time (p < 0.01), whether assayed by PGL-I or ND-BSA. The two antigens showed good agreement in the detection of decrease in anti-PGL-I IgM. The greatest decrease was seen in patients with a high initial anti-PGL-I IgM and a high bacterial index (BI). Patients with a declining BI were seen to have generally declining antibody levels to PGL-I and to LAM; in those patients with a fluctuating BI, antibody levels were less predictable. We conclude that antibodies to PGL-I and LAM can be useful in following response to therapy in leprosy patients and that cither the native PGL-I or ND-BSA can serve as antigen for the ELISA.
Des échantillons sériques successifs de patients lépreux à différentes étapes du traitement antibactérien furent testés par un ELISA pour la présence d'anticorps vis-à-vis du glycolipide phénolique I (GPL-I), un analogue synthétique du GPL-I (ND-BSA), et un lipoar-abinomannan (LAM) de Mycobacterium tuberculosis pour déterminer si ces anticorps pourraient être utiles dans la surveillance de la réponse au traitement. Parmi les patients positifs au départ pour la présence d'IgM anti-GPL-I, une diminution significative de cet anticorps fut observée au cours du temps (p < 0,01), que le titrage soit fait par GPL-I ou ND-BSA. Les deux antigènes montraient une bonne concordance dans la détection de la diminution des IgM anti-GPL-I. La diminution la plus importante fut observée chez des patients avec des IgM anti-GPL-I et un indice bactériologique (IB) élevés à l'origine. Les patients avec un indice bactériologique en diminution avaient généralement des taux décroissants d'anticorps vis-à-vis de GPL-I et LAM; parmi les patients avec des IB variables, les taux d'anticorps étaient moins prévisibles. Nous concluons que les anticorps vis-à-vis de GPL-I et LAM peuvent être utiles pour suivre la réponse au traitement des malades de la lèpre, et que soit le GPL-I naturel ou le ND-BSA peuvent servir d'antigène pour l'ELISA.
Usando la técnica de ELISA se probaron muestras sccuencialcs de sueros de pacientes con lepra con diferentes tiempos de tratamiento antibacteriano, para buscar anticuerpos contra el glicolípido fenólico I (PGL-I), contra un análogo sintético del PGL-I (ND-BSA), y contra lipoarabinomanana (LAM) de Mycobacterium tuberculosis para determinar si estos anticuerpos podrían ser útiles en el seguimiento de la respuesta a la terapia. Entre los pacientes positivos al inicio para IgM anti-PGL-I, se observó una disminución significativa en los niveles de este anticuerpo proporcional al tiempo del tratamiento (p < 0.01), tanto con el PGL-I como con el ND-BSA. La mayor diminución ocurrió en pacientes con elevados niveles iniciales de IgM anti-PGL-I y con altos índices bacteriológicos (BI). Los pacientes con un BI decreciente también mostraron niveles decrecientes de anticuerpos anti-PGL-I y anti-LAM; en aquellos pacientes con un BI fluctuante, los niveles de anticuerpos fueron menos predeciblcs. Concluímos que los anticuerpos anti-PGL-I y anti-LAM pueden ser útiles en el seguimiento de la respuesta a la terapia en los pacientes con lepra y que tanto el PGL-I nativo como el ND-BSA pueden usarse como antí-geno en la técnica de ELISA.
8- Assessment of anti-phenolic glycolipid-I IgM levels using an ELISA for detection of M. leprae infection in populations of the South Pacific Islands
Jean-Louis Cartel; Suzanne Chanteau; Jean-Paul Boutin; Regis Plichart; Patrick Richez; Jean-Felix Roux; Jacques-Henri Grosset
Anti-phenolic glycolipid-I (PGL-I) IgM levels were determined in 96% of the general population of the Southern Marquesas and Maupiti, remote islands of French Polynesia, where the average annual detection rates of leprosy during the past 30 years have been 57.1 and 4.4 per 100,000, respectively. The seropositivity in these two areas was 4.3% and 4.2%, respectively. No significant difference (p > 0.05) was found between cither these two figures or between the percentages of persons with high (> 0.500 OD) anti-PGL-I IgM levels (9.2% and 5.3%). In the two islands, the age distributions of anti-PGL-I IgM were very similar; the percentage of positive responders was higher in females than in males and higher in adolescents than in adults. These results suggest that the usefulness of the determination of anti-PGL-I IgM levels by ELISA, using the synthetic trisaccharide as antigen, for detecting Mycobacterium leprae infection in leprosy control programs is extremely doubtful.
Les taux d'IgM anti-glycolipide phénolique I (GPL-I) ont été déterminés parmi 96% de la population générale des Marquises Australes et Maupiti, îles éloignées de la Polynésie Française, où les taux annuels moyens de détection durant les 30 dernières années ont été respectivement de 57,1 et 4,4 pour 100.000. La séropositivité dans ces deux régions était respectivement de 4,3% et 4,2%. Aucune différence significative (p > 0,05) ne fut trouvée ni entre ces taux, ni entre les pourcentages de personnes présentant des taux élevés (>0,500 OD) d'IgM anti-GPL-I (9,2% et 5,3%). Dans les deux îles, la distribution par âge des anticorps anti-GPL-I étaient très semblables; le pourcentage de positifs était plus élevé chez les femmes que chez les hommes, et chez les adolescents que chez les adultes. Ces résultats suggèrent que l'utilité, pour la détection de l'infection par Mycobacterium leprae dans les programmes de lutte contre la lèpre, de la détermination des taux d'IgM anti-GPL-I par ELISA en utilisant le trisaccharide synthétique comme antigène, est très incertaine.
Se determinaron los niveles de IgM anti-glicolípido fenólico-I (PGL-I) en el 96% de la población general de las Marquesas del Sur y de Maupili, remotas islas de la Polinesia Francesa, donde la incidencia de lepra en los últimos 30 años ha sido, respectivamente, de 57.1 y de 4.4 por 100,000. La seropositividad en estas 2 áreas fue del 4.3% y del 4.2%, respectivamente. No hubo una diferencia estadísticamente significativa entre estas dos cifras (p > 0.05) ni entre los porcentajes de personas con altos niveles (D.O. > 0.5) de IgM anti-PGL-I (9.2% y 5.3%). Las distribuciones por edades de IgM anti-PGL-I fueron muy similares en las dos islas; los porcentajes de positividad fueron mayores en mujeres que en hombres y mayores en adolescentes que en adultos. Estos resultados sugieren que la utilidad de la determinación de los niveles de IgM anti-PGL-I por ELISA (usando como antígeno el trisacárido sintético) para detectar la infección por Mycobacterium leprae en los programas de control contra la lepra, es extremadamente dudosa.
9- A study of autoantibodies in chronic mycobacterial infections
B. L. Rapoport; R. C. A. Morrison; R. Sher; L. Dos Santos
Infections can cause autoantibody production. The purpose of this study was to determine the prevalence of autoantibodies in patients with chronic mycobacterial infections. Sera f rom 41 leprosy patients and f rom 49 untreated and 73 treated tuberculosis (TB) patients were tested for the presence of rheumatoid factor, antinuclear factor, and several other autoantibodies. The rheumatoid factor, measured by the RheumaTec RF latex test, was positive in 2.4% of the leprosy patients and 2.7% of the treated TB patients but absent in the untreated TB group. The titers ranged f rom 40 to 160 international units. Positivity was dependent upon the technique utilized, and existed in 21% of untreated TB group and 4% of the treated TB patients when using the Rheuma-Wellcotest technique. The antinuclear antibody was positive in 7.3% of the leprosy group, 6.1% of the untreated TB group, and 15% of the treated TB patients (p = 0.0125). Antinuclear antibody positivity correlated with the duration of treatment of the TB patients (p = 0.025). The antinuclear antibody titers were low and gave no specific pattern on staining. No patient had antibodies against native deoxyribonucleic acid, ribonuclear protein, Ro (SS-A) or La (SS-B) antigens.
Due to their low prevalence and frequency in these chronic infections, these autoantibodies should not lead to confusion in distinguishing these conditions f rom the connective tissue diseases.
Due to their low prevalence and frequency in these chronic infections, these autoantibodies should not lead to confusion in distinguishing these conditions f rom the connective tissue diseases.
Des infections peuvent engendrer une production d'auto-anticorps. Le but de cette étude était de déterminer la prévalence d'auto-anticorps chez, des patients avec des infections mycobactériennes chroniques. Les sérums de 41 patients lépreux, de 49 tuberculeux non traités, et de 73 tuberculeux (TB) traités ont été testés pour la fréquence de facteur rhumatoïde, facteur antinucléaire, et différents autres auto-anticorps. Le facteur rhumatoïde mesuré par le test au latex Theumatec RF, était positif chez 2,4% des malades de la lépre, et 2,7% des tuberculeux traités, mais absent dans le groupe des tuberculeux non traités. Les titres variaient de 40 à 160 unités internationales. La positivité dépendait de la technique utilisée, et était présente chez 21% des tuberculeux traités quand la technique du Thcuma-Wellcotest était utilisée. Le facteur antinucléaire était positif chez 7,3% des lépreux, 6,1% des patients TB non traités; et 15% des tuberculeux traités (p = 0,0125). La positivité du facteur antinucléaire était liée à la durée du traitement des patients TB (p = 0,025). Les titres du facteur antinucléaire étaient bas et ne donnaient aucune image spécifique à la coloration. Aucun patient ne présentait d'anticorps vis-à-vis de l'acide désoxyribonucléique naturel, la ribonucléoprotide, les antigènes Ro (SS-A) ou La (SS-B). A cause de leurs prevalence et frequence basses dans ces infections chroniques, ces auto-anticorps ne devraient pas mener a confondre ces conditions des maladies du tissu conjonctif.
Las infecciones pueden causar la producción de au-toanticuerpos. El propósito de este estudio fue el determinar la prevalência de autoanticuerpos en pacientes con infecciones micobacterianas crónicas. Los sueros de 41 pacientes con lepra, de 49 pacientes con tuberculosis (TB) no tratada y de 73 pacientes con tuberculosis tratada, se probaron para buscar la presencia de factor reumatóide, factor antinuclear, y otros autoanticuerpos. El factor reumatóide, medido con el reactivo RheumaTec RF fue positivo en el 2.4% de los pacientes con lepra y en el 2.7% de los pacientes con tuberculosis tratada pero fue negativo en los pacientes con TB no tratada. Los títulos variaron de 40 a 160 unidades internacionales. Con la ténica del Rheuma-Wellcotest, la positividad fue del 21% en el grupo TB no tratado y del 4% en los pacientes TB tratados. Los anticuerpos antinucleares fueron positivos en el 7.3% de los pacientes con lepra, en el 6.1% del grupo TB no tratado y en el 15% de los pacientes TB tratados (p = 0.0125). La positividad de los anticuerpos antinucleares correlacionó con la duración del tratamiento de los pacientes con TB (p = 0.025). Los títulos de anticuerpos antinueleares fueron bajos y no dieron un patrón específico de tinción. Ningún paciente tuvo anticuerpos contra DNA nativo, contra proteína ribonuclear ni contra los antígenos Ro (SS-A) o La (SS-B).
Debido a su baja prevalência y frecuencia en estas infecciones crónicas, estos autoanticuerpos no afectan la diferenciación entre estas condiciones y las enfermedades del tejido conectivo.
Debido a su baja prevalência y frecuencia en estas infecciones crónicas, estos autoanticuerpos no afectan la diferenciación entre estas condiciones y las enfermedades del tejido conectivo.
10- Uptake of purine and pyrimidine nucleosides by macrophage-resident Mycobacterium leprae: 3H-Adenosine as an indicator of viability and antimicrobial activity
K. V. Harshan; A. Mittal; H. K. Prasad; R. S. Misra; N. K. Chopra; Indira Nath
Freshly extracted human- and armadillo-derived Mycobacterium leprae maintained within murine macrophages incorporated significant levels (p < 0.05 to p < 0.001) of 3H-adenosine and 3H-hypoxanthine by 6 and 9 days of the culture period. The incorporation of 3H-adenosine was twofold or more higher than 3H-thymidine in 10 out of 15 human-derived M. leprae isolates. Macrophage-adapted bacilli incorporated 10-14-fold higher levels of 3H-adenosine compared to the same bacilli maintained in axenic cultures. The incorporation of these two labels was inhibited by dapsone and rifampin, indicating the utility of in vitro radiometric assays for screening antileprosy drugs and drug sensitivity/resistance in patients.
Des Mycobacterium leprae fraîchement récoltés chez l'homme et le tatou et maintenus dans des macrophages de souris, incorporaient des taux significatifs (p < 0,05 à p < 0,001) de 3H-adénosine et 3H-hypo-xanthine aux sixième et neuvième jours de la période de culture. L'incorporation de 3H-adénosine était deux fois plus élevée ou davantage que celle de 3H-thymi-dine dans 10 des 15 isolats de M. leprae d'origine humaine. Les bacilles adaptes aux macrophages incorporaient des taux de 3H-adénosinc 10 à 14 fois plus élevés que les mêmes bacilles maintenus dans des cultures axéniques. L'incorporation de ces deux marqueurs était empêchée par la dapsone et la rifampicine, indiquant l'utilité de titrages radiométriques in vitro pour l'étude de médicaments anti-lèpre et de la sensibilité/résistance aux médicaments chez les patients.
Las células de Mycobacterium leprae recién extraídas de lesiones humanas y de armadillos y mantenidas dentro de macrófagos murinos, incorporaron niveles significativos de adenosina-3H y de hipoxantina-3H (p < 0.05 a p < 0.001) durante 6 y 9 días del periodo de cultivo. La incorporación de adenosina-3H fue 2 o más veces mayor que la incorporación de timidina-3H en 10 de 15 muestras de M. leprae obtenidas de humanos. Los bacilos adaptados a los macrófagos incorporaron de 10 a 14 veces más adenosina-3H que los mismos bacilos mantenidos en cultivos axénicos. La incorporación de estas dos marcas se inhibió por dapsona y por rifampina. Esto indica la utilidad de los ensayos radimétricos in vitro para evaluar la efectividad de drogas antileprosas y la sensibilidad o resistencia de M. leprae a las mismas.
11- A comparison of monocyte oxidative responses in leprosy patients and healthy subjects as influenced by mycobacterial lipid pretreatment
Mona Vachula; Sophie Worobec; Burton R. Andersen
Superoxide anion (O
) release by monocytes f rom leprosy patients in a paired study was lower than that released by monocytes f rom healthy controls. Pretreatment of healthy control monocytes with phenolic glycolipid-l (PGL-I) of Mycobacterium leprae resulted in the release of less O than released by buffer-treated cells or cells pre treated with structurally similar lipids. However, pretreatment of patient monocytes with PGL-I did not affect the O generation, perhaps because the cells already had a lower capacity to produce O. Upon further examination of the data f rom the patient population, monocytes f rom lepro-matous patients released significantly less O than cells f rom normal controls, while tuberculoid patient cells released O in amounts similar to that generated by cells f rom normal controls. In addition, monocytes f rom patients with a high bacterial index had a lower capacity to generate O when compared to cells f rom healthy individuals.
) release by monocytes f rom leprosy patients in a paired study was lower than that released by monocytes f rom healthy controls. Pretreatment of healthy control monocytes with phenolic glycolipid-l (PGL-I) of Mycobacterium leprae resulted in the release of less O than released by buffer-treated cells or cells pre treated with structurally similar lipids. However, pretreatment of patient monocytes with PGL-I did not affect the O generation, perhaps because the cells already had a lower capacity to produce O. Upon further examination of the data f rom the patient population, monocytes f rom lepro-matous patients released significantly less O than cells f rom normal controls, while tuberculoid patient cells released O in amounts similar to that generated by cells f rom normal controls. In addition, monocytes f rom patients with a high bacterial index had a lower capacity to generate O when compared to cells f rom healthy individuals.La libération d'anions superoxydes (O) par des monocytes de patients lépreux dans une étude appariée était plus basse que celle de monocytes en provenance de témoins sains. Le traitement préalable des monocytes de témoins sains avec du glycolipide phénolique-1 (GPL-I) de Mycobacterium leprae résulta en la libération de moins d'O que des cellules traitées par des tampons ou des cellules traitées au préalable avec des lipides de structure similaire. Cependant, le traitement préalable des monocytes des patients avec GPL-I ne modifia pas la production de O, peut-être parce que les cellules avaient déjà une capacité amoindrie de produire de l'oxygène O. Après examen plus approfondi des données en provenance de la population de patients, les monocytes de patients lépromateux libéraient significativement moins d'O que les cellules des témoins normaux, tandis que les cellules des patients tuberculoïdcs libéraient des O en quantités semblables à celles produites par les cellules de témoins normaux. De plus, les monocytes des patients avec un indice bactériologique élevé avaient une capacité moindre de produire des O, en comparaison aux cellules d'individus en bonne santé.
) par des monocytes de patients lépreux dans une étude appariée était plus basse que celle de monocytes en provenance de témoins sains. Le traitement préalable des monocytes de témoins sains avec du glycolipide phénolique-1 (GPL-I) de Mycobacterium leprae résulta en la libération de moins d'O que des cellules traitées par des tampons ou des cellules traitées au préalable avec des lipides de structure similaire. Cependant, le traitement préalable des monocytes des patients avec GPL-I ne modifia pas la production de O, peut-être parce que les cellules avaient déjà une capacité amoindrie de produire de l'oxygène O. Après examen plus approfondi des données en provenance de la population de patients, les monocytes de patients lépromateux libéraient significativement moins d'O que les cellules des témoins normaux, tandis que les cellules des patients tuberculoïdcs libéraient des O en quantités semblables à celles produites par les cellules de témoins normaux. De plus, les monocytes des patients avec un indice bactériologique élevé avaient une capacité moindre de produire des O, en comparaison aux cellules d'individus en bonne santé.La liberación del anión superoxido (O) por mo-nocitos de pacientes con lepra fue menor que la liberación de O por monocitos de controles sanos. El pretratamiento de los monocitos de controles sanos con el glicolípido fenólico I (PGL-I) de Mycobacterium leprae, dió como resultado la liberación de menos O que el liberado por células tratadas con regulador o por células pretratadas con lipidos estructuralmente similares. Sin embargo, el pretratamiento de los monocitos de los pacientes con PGL-I no afectó la generación de O, quizá porque estas células ya mostraban una menor capacidad para producir O. Comparados con ios controles sanos, los monocitos de los pacientes con lepra tuberculoide produjeron cantidades semejantes de O, los monocitos de los pacientes lepro-matosos liberaron cantidades significativamente menores del anión y esta producción de O fue todavía menor en los pacientes lepromatosos con índices bacteriológicos altos.
) por mo-nocitos de pacientes con lepra fue menor que la liberación de O por monocitos de controles sanos. El pretratamiento de los monocitos de controles sanos con el glicolípido fenólico I (PGL-I) de Mycobacterium leprae, dió como resultado la liberación de menos O que el liberado por células tratadas con regulador o por células pretratadas con lipidos estructuralmente similares. Sin embargo, el pretratamiento de los monocitos de los pacientes con PGL-I no afectó la generación de O, quizá porque estas células ya mostraban una menor capacidad para producir O. Comparados con ios controles sanos, los monocitos de los pacientes con lepra tuberculoide produjeron cantidades semejantes de O, los monocitos de los pacientes lepro-matosos liberaron cantidades significativamente menores del anión y esta producción de O fue todavía menor en los pacientes lepromatosos con índices bacteriológicos altos.12- Antigenic protein f rom Mycobacterium leprae released in macrophages in vitro as indicator of viability of bacteria
Ishwari Nair; P. R. Mahadevan
Peritoneal macrophages f rom random-bred, Swiss white mice, when cultured and infected with Mycobacterium leprae for 24 hours, are able to show the presence of an-tigen(s) with binding affinity to antibodies present in the sera of bacteriologically positive, lepromatous leprosy patients. Such antibodies are not seen in sera f rom normal and healthy persons, tuberculoid leprosy patients, or long-term-treated, bacteriologically negative, lcpromatous leprosy patients. The production of the antigen(s) is blocked by the anti-M. leprae drug rifampin. Other mycobacteria when incubated with macrophages f rom mice show very little antigens in the lysate but the antigens have an equal affinity for antibodies in sera f rom both normal individuals and lepromatous patients. Only the lysates f rom macrophages exposed to live M. leprae could discriminate and could exhibit differential binding to sera f rom leprosy patients compared to sera f rom normal individuals. This antigcn(s) does not have any binding ability to the monoclonal antibodies available to the antigens of M. leprae identified at present and shown to be specific to M. leprae. This indicates a separate identity of this product which has potential for further exploitation in exploring host-pathogen interactions related specifically to the leprosy infection and the tolerance of M. leprae inside cells.
Les macrophages péritonéaux de souris blanches Swiss d'élevage, mis en culture et infectés par Mycobacterium leprae pendant 24 heures, peuvent montrer la présence d'antigènes ayant une allinité pour des anticorps présents dans le sérum de lépreux lépromateux ayant une bactériologie positive. De tels anticorps ne sont pas observés dans le sérum de personnes normales en bonne santé, les patients lépreux tuberculoïdes, ou les lépreux lépromateux traités depuis longtemps et bactériologiquement négatifs. La production d'anti-gène(s) est bloquée par la rifampicine. Les autres my-cobactéries, incubées avec des macrophages de souris, montrent très peu d'antigènes dans le lysat, mais les antigènes ont une affinité identique pour les anticorps sériques provenant d'individus normaux et de lépreux lépromateux. Seuls les lysats de macrophages exposés à des M. leprae vivants pouvait faire la distinction et présenter une affinité différente pour les sérums de patients lépreux et ceux d'individus normaux. Cet anti-gènc(s) n'a aucune capacité de se lier aux anticorps monoclonaux disponibles vis-à-vis des antigènes de M. leprae identifiés à présent, et dont la spécificité pour M. leprae a été démontrée. Ceci indique que ce produit a une identité propre, et qu'il mérite d'être utilisé plus avant pour explorer les interactions hotc-pathogène liées spécifiquement à l'infection lépreuse, et la tolérance de M. leprae à l'intérieur des cellules.
Los macrófagos peritoneales de ratones Swiss-white cultivados e infectados con Mycobacterium leprae por 24 horas, son capaces de mostrar la presencia de antí-genos que reaccionan con anticuerpos presentes en los sueros de pacientes con lepra lepromatosa bacteriológicamente positivos. Tales anticuerpos no se encuentran en los sueros de personas sanas, de pacientes con lepra tubereuloide, o de pacientes lepromatosos con mucho tiempo de tratamiento y bacteriológicamente negativos. La producción de los antígenos se bloquea por la droga antileprosa rifampina. Cuando se incuban otras micobacterias con macrófagos de ratón, se encuentran muy pocos antígenos en el lisado celular que tienen una afinidad igual por anticuerpos presentes tanto en los sueros de individuos normales como en los sueros de pacientes lepromatosos. Sólo los lisados de los macrófagos expuestos al M. leprae vivo pudieron discriminar, por su enlazamiento diferencial, a los sueros de los pacientes lepromatosos de aquellos de los individuos normales. Estos antigenos no tienen reactividad con los anticuerpos monoclonales existentes a la fecha que identifican antígenos del M. leprae. Esto indica una diferente identidad de estos productos y sugiere su utilidad potencial en el estudio de las interacciones huésped-parásito relacionadas específicamente con la infección y la tolerancia del M. leprae en el interior de las células.
13- Viability of Mycobacterium leprae inside macrophages f rom different strains of mice and possible genetic control
Ishwari Nair; Deepti Varadkar; P. R. Mahadevan
Peritoneal macrophages f rom Swiss white mice in vitro tolerated Mycobacterium leprae and allowed metabolism of the bacteria leading to release of bacteria-specific antigenic protein. This was associated with the maintenance of viability of the bacilli inside the cells. Macrophages f rom C57BL mice reduced viability of M. leprae after phagocytosis, and this was associated with the production of superoxide. Blockage of superoxide production resulted in maintaining viability of the cells of these mouse strains. Associated with loss of viability of the bacilli is the absence of the production of antigenic protein in the lysate. Interestingly, the maintenance of viability or loss of viability and the factors controlling such viability in the macrophages of Swiss white and C57BL mice, respectively, appeared to be genetically controlled.
Des macrophages péritonéaux de souris blanches Swiss ont toléré Mycobacterium leprae in vitro, et permis le métabolisme des bactéries conduisant à la libération de protéines antigéniques spécifiques à la bactérie. Ceci était associé au maintien de la viabilité des bacilles à l'intérieur des cellules. Les macrophages des souris C57BL ont diminué la viabilité de M. leprae après phagocytose, et ceci était associé à la production de superoxyde. Le blocage de la production de superoxyde a résulté dans le maintien de la viabilité des cellules de ces souches de souris. L'absence de production de protéine antigénique dans le lysat est associée à la perte de viabilité des bacilles. Il est intéressant de noter que le maintien de la viabilité ou la perte de viabilité et les facteurs contrôlant cette viabilité dans les macrophages des souris blanches SWISS et C57BL respectivement, sont apparus être sous contrôle génétique.
Los macrófagos peritoncales de ratones Swiss-white toleraron in vitro el crecimiento de Mycobacterium leprae y permitieron su metabolismo que condujo a la liberación de proteínas antigénicas específicas de la bacteria. Esto estuvo asociado con el mantenimiento de la viabilidad de los bacilos dentro de las células. Los macrófagos de los ratones C57BL redujeron la viabilidad del M. leprae después de la fagocitosis, y esto estuvo asociado con la producción de superóxido. El bloqueo de la producción de superóxido permitió el mantenimiento de la viabilidad bacteriana en las células de esta cepa de ratón. La pérdida de viabilidad de los bacilos estuvo asociada a la pérdida de la producción de proteínas antigénicas en los lisados. Interesantemente, los factores que controlan el mantenimiento o la pérdida de la viabilidad de M. leprae en los macrófagos de los ratones Swiss-white y C57BL, respectivamente, parecen estar genéticamente controlados.
14- Ocular leprosy in nine-banded armadillos following intrastromal inoculation
Raga Malaty; Roger W. Beuerman; Lia Pedroza
Leprosy shows a higher percentage of ocular involvement than any other systemic infection. In humans, the cornea is the first ocular tissue affected. Our previous studies in armadillos with naturally acquired and experimental disseminated leprosy showed that 44% had corneal infection. Mycobacterium leprae is found in armadillo burrows in Louisiana, U.S.A., and ocular abrasions may be the portal of entry for these organisms in wild armadillos. To test the cornea as a route of infection, we injected eight armadillos intrastromally with 2 x 106 M. leprae in 1 μl. Two and 4 months later, the armadillos were sacrificed and their eyes processed for light- and electron-microscopy. After 2 months, M. leprae were found in histiocytes mainly in the corneal limbus, sclera and bulbar conjunctiva. At 4 months, however, there was a visible corneal leproma in one animal. Microscopically, it was found to be a histiocytic granuloma with heavy M. leprae invasion. In addition, cells were seen in the anterior chamber. Leprosy is endemic in regions where other corneal infections which compromise the epithelial barrier property are prevalent and where leprosy bacilli are found in the environment. The entry of leprosy bacilli into the cornea may produce lesions which spread posteriorly in the eye.
La lèpre montre un pourcentage d'atteinte oculaire plus élevé qu'aucune autre infection systémique. Chez l'homme, la cornée est le premier tissu oculaire atteint. Nos études antérieures chez des tatous ayant une lèpre disséminée naturelle ou expérimentale ont montré que 44% avaient une infection oculaire. On trouve Mycobacterium leprae dans des terriers de tatous en Louisiane, U.S.A., et des abrasions oculaires pourraient être la porte d'entrée de ces organismes chez les armadillos sauvages. De manière à tester la cornée comme porte d'entrée à l'infection, nous avons injecté 1 μl contenant 2 x 106 M. leprae dans le stroma de huit tatous. Les tatous furent tués deux et quatre mois plus tard, et leurs yeux préparés pour examen au microscope oculaire et électronique. Après deux mois, M. leprae fut trouvé dans les histiocytes, principalement dans le limbe corneal, la sclérotique et la conjonctive bulbaire. A 4 mois, cependant, il y avait un léprome cornéen visible chez un animal. Au microscope, on observa qu'il s'agissait d'un granulome histiocytaire fortement envahi par M. leprae. De plus, des cellules furent observées dans la chambre antérieure. La lèpre est endémique dans des régions où d'autres infections cornéennes qui compromettent la barrière épithéliale sont prévalentes, et où des bacilles de lèpre sont trouvés dans l'environnement. L'entrée des bacilles de lèpre dans la cornée pourrait produire des lésions qui se disséminent plus en arrière dans l'oeil.
La lepra muestra el mayor porcentaje de afección ocular que cualquier otra infección sistémica. En humanos, la córnea es el primer tejido ocular afectado. Nuestros estudios previos en armadillos con lepra diseminada adquirida en forma natural o experimental, mostraron un 44% de afección corneal. Mycobacterium leprae se encuentra en las madrigueras de los armadillos en Louisiana, U.S.A. y las abrasiones oculares pueden ser la puerta de entrada de los organismos en los armadillos salvajes. Para probar la córnea como una ruta de infección, inyectamos 8 armadillos intraes-tromalmente con 2 x 106 M. leprae en 1 μl. Dos y 4 meses después, los armadillos se sacrificaron y sus ojos se prepararon y procesaron para microscopía de luz y electrónica. Después de 2 meses, se encontraron M. leprae en los histiocitos del limbus corneal, en la esclera y en la conjuntiva bulbar. A los 4 meses apareció un leproma corneal visible en un animal. Microscópicamente éste resultó ser un granuloma histiocítico con invasión masiva por M. leprae. También se llegaron a observar células en la cámara anterior. La lepra es endémica en regiones donde prevalecen otras infecciones corneales que comprometen la integridad de la barrera epitelial y donde el bacilo de la lepra se encuentra en el ambiente. La entrada del bacilo de la lepra en la córnea puede producir lesiones que después se dispersan en el ojo.
15- Major histocompatibility complex class ii antigen expression in nerves in leprosy; an immunoelectronmicroscopical study
Sally A. Cowley; Steve E. Gschmeissner; Yohannes Negesse; Jill Curtis; John L. Turk
A technique for immunoelectronmicros-copy has been used to investigate major histocompatibility class II expression in leprosy nerves. In normal nerves, endothelial cells and occasional endoneural cells (not Schwann cells) were constitutively class II positive. In both paucibacillary and multibacillary leprosy nerve biopsies, infiltrating leukocytes were positive but class II-positive Schwann cells were not seen. These observations indicate that Schwann cells may not be involved in presenting Mycobacterium leprae antigens to T cells in leprosy. This conflicts with evidence f rom in vitro studies, but may be explained by the fact that in vivo Schwann cells arc surrounded by basement membranes and are closely associated with axons.
Une technique de microscopic électronique a été utilisée pour étudier l'expression de l'histocompatibi-lité majeure de classe II dans des nerfs de lépreux. Dans les nerfs normaux, des cellules endothéliales et d'occasionnelles cellules endoneurales (mais pas des cellules de Schwann) étaient par constitution positives pour la classe II. Dans des biopsies de nerfs de lèpre paucibacillaire et multibacillaire, des leucocytes infiltrants étaient positifs, mais on n'a pas trouvé de cellules de Schwann positives pour la classe IL Ces observations indiquent que les cellules de Schwann pourraient ne pas être impliquées dans la présentation des antigènes de Mycobacterium leprae aux cellules T au cours de la lèpre. Ceci est en contradiction avec ce qui a été vu dans des études in vitro, mais pourrait être expliqué par le fait que les cellules de Schwann sont in vitro entourées par des membranes basales, et sont étroitement associées aux axones.
Se usó una técnica de inmunomicroscopía electrónica para investigar la expresión de antigenos de his-tocompatibilidad clase II en los nervios de casos con lepra. En los nervios normales, la células endotelialcs y las células endoneurales ocasionales (no las células de Schwann) fueron constitutivamente clase II-posi-tivas. En las biopsias de nervios de casos de lepra tanto paucibacilares como multibacilares, los leucocitos infiltrantes fueron positivos pero no se observaron células de Schwann clase II-positivas. Estas observaciones indican que las células de Schwann pueden no estar involucradas en la presentación de antígenos del Mycobacterium leprae a las células T en la lepra. Los hallazgos están en conflicto con los resultados de los estudios in vitro, pero ésto puede explicarse considerando que las células de Schwann in vivo están rodeadas por membranas básales, además de que se encuentran íntimamente asociadas con axones.
EDITORIAL
16- Report of the indo-european community joint symposium "Leprosy and Other Mycobacterial Diseases," Lonavla, India, 6-9 november 1989
S. H. E. Kaufmann; M. G. Deo
CORRESPONDENCE
17- A case of borderline tuberculoid leprosy presenting with papulonodular lesions
A. Ramachandran; Rita Laxman